ヒルシュスプルング病および類縁疾患における乳歯幹細胞による病因解明と新規治療開発

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16H02682
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 田口 智章 九州大学, 医学研究院, 教授 (20197247)
• 研究分担者: 松浦 俊治 九州大学, 大学病院, 准教授 (10532856) ; 柳 佑典 九州大学, 大学病院, 助教 (30596664) ; 吉丸 耕一朗 九州大学, 医学研究院, 講師 (60711190) ; 桐野 浩輔 九州大学, 大学病院, 助教 (00621707) ; 山座 孝義 九州大学, 歯学研究院, 准教授 (80304814) ; 野中 和明 九州大学, 歯学研究院, 教授 (90128067) ; 山座 治義 九州大学, 歯学研究院, 准教授 (30336151) ; 尾崎 正雄 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 教授 (10152472) ; 岡 暁子 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 准教授 (60452778) ; 孝橋 賢一 九州大学, 医学研究院, 講師 (10529879) ; 梶岡 俊一 九州大学, 医学研究院, 准教授 (90274472) ; 大賀 正一 九州大学, 医学研究院, 教授 (60233053) ; 黒田 達夫 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 教授 (60170130) ; 増本 幸二 筑波大学, 医学医療系, 教授 (20343329) ; 田尻 達郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80304806) ; 家入 里志 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (00363359)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 小児外科学 / 再生医療学 / 乳歯幹細胞学 / 細胞移植 / 組織工学 / 指定難病 / ヒルシュスプルング病 / ヒルシュスプルング病類縁疾患

研究実績の概要

平成30年度の研究計画は大きく以下の3つにわけられる。すなわち、1) 疾患特異的SHED（ヒト脱落乳歯歯髄幹細胞, stem cells from human exfoliated deciduous teeth）の性状評価および疾患特異的SHEDを用いた病因病態解明、2) 腸管神経節細胞僅少症に対する新規治療法の開発、3) 健常児／患児乳歯幹細胞・歯髄バンク構築、である。1) に関しては、腸管神経節細胞僅少症患児由来SHEDを培養して、増殖能・間葉系幹細胞としての多分化能などを検討した。さらには未分化SHEDおよびSHED由来の分化細胞に関して詳細な免疫組織学的解析を加えることとした。疾患特異的SHEDを用いた病因病態解明については後述する。2) に関しては、これまで健常人由来SHEDを用いて行ってきた腸管神経節細胞僅少症モデルマウスに対する細胞移植実験を、患者由来SHEDを用いて再検討することとし、実験準備を進めた。この細胞移植実験において、患児由来SHEDでも健常人由来SHEDと同等の成績を収めるか否かを先に検討することにより、SHEDを用いた病因病態解明が実験的に検証可能かについて判断することにした。つまり、患者由来SHEDにおいて細胞治療効果が乏しい場合には、患者細胞特有の機能異常をとらえ得ると考えるからである。3)に関しては、常に門戸を広くし、患者家族・親子の会等とのコミュニケーションを深め、広く収集することができている。今後もさらに整備を進めてゆく。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の研究計画通りに概ね進んでいる。疾患特異的幹細胞の機能的評価がやや遅れていたため、重点的に行い、順調に進んでいる。また、腸管神経節細胞僅少症に関しては、順調に研究が進んでいるが、慢性特発性偽性腸閉塞症（CIIP）およびヒルシュスプルング病に関しては、遅れているため、こちらも焦点を徐々にあててゆくこととする。既に、CIIPモデルマウスの購入先は選定を済ませ、実験計画・体制を考案している。

今後の研究の推進方策

平成31年度の計画は、疾患特異的SHEDによる病因病態解明、他のヒルシュスプルング病類縁疾患であるCIIPモデルマウスにおけるSHEDの有効性と安全性の解析、健常児・患児乳歯幹細胞バンク構築の継続、そして臨床応用準備である。腸管神経節細胞僅少症モデルマウスにて得た知見をCIIPモデルマウスに拡充の必要性もしくは、腸管神経節細胞僅少症に関する疾患特異的遺伝子学的解析を深めるか、方針を検討する。

研究成果

• [雑誌論文] Acquired isolated hypoganglionosis as a distinct entity:results from a nationwide survey (2019)
  • 著者名/発表者名: Obata S, Yoshimau K, Kirino K, Izaki T,Ieiri S, Yamataka A, Koshinaga T, Iwai J, Ikeda H, Matsufuji H, Oda Y, Taguchi T
  • 雑誌名: Pediatric Surgery International 巻: 35 ページ: 215-220
  • DOI: 10.1007/s00383-018-4398-y
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nationwide survey of outcome in patients with extensive aganglionosis in Japan (2019)
  • 著者名/発表者名: Obata S, Ieiri S, Akiyama T, Urushihara N, Kawahara H, Kubota M, Kono M, Nirasawa Y, Honda S, Nio M, Taguchi T
  • 雑誌名: Pediatric Surgery International 巻: 35 ページ: 547-550
  • DOI: 10.1007/s00383-019-04462-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regenerative medicine using stem cell from human exfoliated deciduous teeth (SHED)：promising new treatment in pediatric surgery (2019)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T, Yanagi Y, Yoshimaru K, Zhang X, Matsuura T, Nakayama K, Kobayashi E, Yamaza H, Nonaka K, Ohga S, Yamaza T
  • 雑誌名: Surg Today 巻: 49 ページ: 316-322
  • DOI: 10.1007/s00595-019-01783-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regeneration of diaphragm with bio-3D cellular patch (2018)
  • 著者名/発表者名: Zhang XY, Yanagi Y, Sheng Z, Nagata K, Nakayama K, Taguchi T.
  • 雑誌名: Biomaterials 巻: 167 ページ: 1-14
  • DOI: 10.1016/j.biomaterials.2018.03.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] 小児外科領域における乳歯肝細胞を用いた再生医療 (2018)
  • 著者名/発表者名: 田口智章、吉丸耕一郎、栁佑典、張 秀英、桐野浩輔、山座孝義
  • 雑誌名: 周産期医学 巻: 48 ページ: 855-862
  • 査読あり
• [雑誌論文] 小児短腸症候群・小腸機能不全の最前線 2．ヒルシュプスルング病およびその類縁疾患-成因から再生医療まで- (2018)
  • 著者名/発表者名: 205吉丸耕一朗、桐野浩輔、栁佑典、河野雄紀、河野淳、入江敬子、髙橋良彰
  • 雑誌名: 日本外科学会雑誌 巻: 119 ページ: 616-622
  • 査読あり
• [学会発表] 母の腸洗浄により維持されているCIIP症例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 江角元史郎、中村 睦、河野 淳、近藤琢也、栁 佑典、小幡 聡、松浦俊治、伊崎智子、田口智章
  • 学会等名: 第49回日本小児消化管機能研究会
• [学会発表] 産科DICとなった慢性特発性偽牲腸閉塞（CIIP）の１例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 伊崎智子、栁 佑典、江角元史郎、深水倫子、宮田潤子、小幡 聡、入江敬子、田口智章、城戸咲、片山由大、加藤聖子
  • 学会等名: 第49回日本小児消化管機能研究会
• [学会発表] Hirschsprung病類縁(H類縁)疾患患者を両親とする児の経過と周産期における問題点 (2019)
  • 著者名/発表者名: 髙橋良彰、吉丸耕一朗、栁佑典、松浦俊治、河野淳、桐野浩輔、江角元史郎、田口智章
  • 学会等名: 第31回日本小児小腸移植研究会
• [学会発表] The Outcomes of Transanal Endorectal Pull-through for Hirschsprung’s Disease Regarding Mucosectomy-commencing Points -According to the Results from a Nationwide Survey in Japan- (2019)
  • 著者名/発表者名: Obata S, Ieiri S, Akiyama T, Urushihara N, Kawahara H, Kubota M, Kono M, Nirasawa Y, Honda S, Nio M, Taguchi T
  • 学会等名: PAPS2019
• [学会発表] ヒト脱落乳歯歯髄幹細胞を用いた腸管神経節細胞僅少症に対する腸管神経再生医療 (2018)
  • 著者名/発表者名: 吉丸 耕一朗，山座 孝義，梶岡 俊一，高橋 良彰，栁 佑典，松浦 俊治，小田 義直, 田口 智章
  • 学会等名: 第118回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 小児外科領域における新規治療の開発-難治性疾患に対する乳歯歯髄肝細胞を用いた新規治療 (2018)
  • 著者名/発表者名: 田口 智章
  • 学会等名: 第118回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] The Outcomes of Laparoscopy-assisted Operation for Rcctosigmoid Hirschsprung’s disease in Japan: Comparison to Non-laparoscopy-assisted Operations (2018)
  • 著者名/発表者名: Obata S, Souzaki R, Ieiri1 S, Akiyama T, Urushihara N, Kawahara H, Kubota M, Kono M, Nirasawa Y, Honda S, Nio M, Hashizume M, Taguchi T
  • 学会等名: IPEG’s 27th Annual Congress for Endosurgery in Children
  • 国際学会
• [学会発表] 間葉系幹細胞を用いた腸管神経節細胞僅少症に対する新規再生医療の確立 (2018)
  • 著者名/発表者名: 吉丸 耕一朗，山座 孝義，梶岡 俊一，高橋 良彰，栁 佑典，松浦 俊治，小田 義直, 田口 智章
  • 学会等名: 第121回日本小児科学会学術集会
• [学会発表] Nationwide survey on allied disorders of Hirschsprung’s disease in Japan (2018)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T
  • 学会等名: PAPS2018
  • 国際学会
• [学会発表] Intestinal Neuronal Dysplasia Type B-like Lesion; Possible Finding of Pathological Maturation Process in Immaturity of Ganglia (2018)
  • 著者名/発表者名: Obata S, Yoshimaru K, Miyoshi K, Esumi G, Miyata J, Izaki T, Taguchi T
  • 学会等名: PAPS2018
  • 国際学会
• [学会発表] Hirschsprung’s disease, Japanese nation-wide survey (2018)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T
  • 学会等名: The 40th Anniversary Memorial Lecture, Division of Pediatric surgery, SNUH
• [学会発表] ひらけてきた未来と克服すべき課題～歯髄幹細胞を用いたhypoganglionosis に対する新規治療法の確立～ (2018)
  • 著者名/発表者名: 吉丸 耕一朗，山座 孝義，梶岡 俊一，高橋 良彰，栁 佑典，松浦 俊治，小田 義直, 田口 智章
  • 学会等名: 第55回日本小児外科学会学術集会
• [学会発表] 小児再生医療の進歩と小児在宅医療 (2018)
  • 著者名/発表者名: 田口 智章
  • 学会等名: 第43回北九州ブロック医師会全体協議会
  • 招待講演
• [学会発表] Novel Therapy for Congenital Isolated Generalized Hypoganglionosis Using Mesenchymal Stem Cel (2018)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T, Yoshimaru K, Kirino K, Esumi G, Izaki T
  • 学会等名: PCC25
  • 国際学会
• [学会発表] Acquired Hypoganglionosis as a Distinct Entity: Results from a Nationwide Survey (2018)
  • 著者名/発表者名: Obata S, Yoshimaru K, Kirino K, Izaki T, Ieiri S, Yamataka A, Koshinaga S, Iwai J, Ikeda H, Taguchi T
  • 学会等名: PCC25
• [学会発表] Therapeutic Innovation using Stem Cell for Intractable Pediatric Surgical Disease (2018)
  • 著者名/発表者名: 田口 智章
  • 学会等名: PCC25
• [学会発表] The Operative Results for Consecutive 200 Cases of Hirschsprung’s Disease with the Focus on Complications in a Single Institution Experiences (2018)
  • 著者名/発表者名: Ieiri S, Jimbo T, Obata S, Nagata K, Miyoshi K, Miyata J, Izaki T, Taguchi T
  • 学会等名: PCC25
• [学会発表] Management of Hypoganglionosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T, Yoshimaru K, Kirino K, Esumi G, Izaki T
  • 学会等名: ISPSR2018
• [学会発表] Effective spheroids transplantation of SHED (Stem cells from Human Exfoliated Deciduous Teeth) derived hepatocytes-like cells in liver fibrosis mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Yuniartha R,Yamaza T, Kirino K, Yanagi Y, Matsuura T, Taguchi T
  • 学会等名: ISPSR2018
• [学会発表] Biliary lineage of Hepatocyte-like cells derived from SHED (Stem Cells from Human Exfoliated Deciduous Teeth) in liver fibrosis mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Yuniartha R,Yamaza T, Kirino K, Yanagi Y, Matsuura T, Taguchi T
  • 学会等名: ISPSR2018
• [学会発表] Hirschsprung病術後臀部皮膚トラブルへの漢方治療の可能性 (2018)
  • 著者名/発表者名: 古澤敬子、宮田潤子、小幡聡、江角元史郎、伊崎智子、田口智章
  • 学会等名: PSJM2018 第23回日本小児外科漢方研究会
• [学会発表] Biliary lineage of Hepatocyte-like cells derived from mesenchymal stem cell（MSC）in liver fibrosis mice model. (2018)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T, Yuniartha R, Yamaza T, Kirino K, Yoshimaru K, Yanagi Y, Matsuura T
  • 学会等名: VCGT2018
• [学会発表] Radical innovative therapy for congenital isolated generalized hypoganglionosis using stem cells from human exfoliated deciduous teeth（SHED） (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshimaru K, Yamaza T, Kirino K, Esumi G, Izaki T, Taguchi T
  • 学会等名: VCGT2018
• [学会発表] Hirschaprung’s disease-related Short Bowel Syndrome-High Mortality Rate from a Nationwide Survey Result in Japan (2018)
  • 著者名/発表者名: Taguchi T, Obata S, Takashi A. Urushihara N, Kawahara H, Kubota M, Kono M, Nirasawa Y, Honda S, Nio M, Ieiri S
  • 学会等名: AAPS2018