研究課題/領域番号 |
16H04167
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研究種目 |
基盤研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
分析化学
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研究機関 | 九州大学 |
研究代表者 |
森 健 九州大学, 工学研究院, 准教授 (70335785)
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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キーワード | 蛍光検出 / フローサイトメトリー / 加水分解酵素 / 酵素増感 |
研究成果の概要 |
細胞表面の抗原の高感度な検出を目指して、新しい酵素増感法の開発を目指した。本法(CARP法)は、加水分解酵素を用い、酵素反応により、蛍光性基質から親水性の部位が脱離することにより、疎水性となり、細胞質を染色するものである。以下のことを明らかとした。1. CARP法をβガラクトシダーゼに拡張し、従来のフォスファターゼを用いる場合に比べて、操作が簡便となった。2.CARP法の問題点である蛍光分子の細胞からの脱離を抑制するために、共有結合型の基質を開発した(CLAMP法)。これはキノンメチドを蛍光の母核内に導入した分子であり、酵素により親水部が脱離した後、細胞内に浸透して、タンパク質と共有結合した。
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自由記述の分野 |
バイオ分析
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研究成果の学術的意義や社会的意義 |
本研究では、がんなどの診断に利用されるフローサイトメトリー(FCM)の加水分解酵素を用いる増感を目的とした。従来、HRPを用いる酵素増感では、多色染色が困難であるが、本法では抗原の種類に対応した複数の酵素を用意することで、多色染色が可能である。これまでに2種の加水分解酵素に適用することができた。現在、新しい複数の酵素に拡張中である。このような新しい酵素は、FCMに限らず、さまざまなバイオ分析に適用可能である。新しく開発したCLAMP法は脱離が抑制できる点でより実用性が高い。本法に興味を持つ製薬企業が、現在、抗がん剤のコンパニオン診断法として試験を実施している。
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