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2018 年度 実績報告書

スポロゾイトの肝細胞侵入におけるRON3の作用機序の解明とレセプターの同定

研究課題

研究課題/領域番号 16H05182
研究機関愛媛大学

研究代表者

石野 智子  愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 准教授 (40402680)

研究分担者 橘 真由美  愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 助教 (00301325)
鳥居 本美  愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 教授 (20164072)
馬場 みなみ  愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 研究員 (00814906)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
キーワードマラリア / スポロゾイト / 肝細胞侵入
研究実績の概要

本研究は、マラリア原虫の感染ステージであるメロゾイトとスポロゾイトで共通にロプトリーに局在する分子RON3について、スポロゾイトにおける役割を解析することを通じて、宿主細胞との相互作用を解明する糸口をつかもうとするものである。これまでに、スポロゾイトステージ特異的にRON3遺伝子発現を抑制することで、RON3が蚊の唾液腺侵入には必須ではないが、哺乳類の肝細胞への侵入に重要な役割を担うことを見出してきた。
RON3がスポロゾイトの肝細胞侵入時に、細胞外で機能を有するのかを明らかにするために、RON3の特異抗体を作成し、これによりスポロゾイトの細胞侵入に影響が見られるか検討した。RON3は2240アミノ酸残基を超える大きなタンパク質であり、これまで立体構造が解明されておらず、また機能を予測させるドメイン構造も知られていない。そこで、構造予測アルゴリズム(Phyre2)を用いることで、アルファヘリックス領域を選択し、そのうちタンパク質が十分量合成されたものについて、ウサギを免疫し抗体を作成した。これをGFP発現スポロゾイトと混合し、肝由来培養細胞に添加し2日後に固定した後、肝内型原虫を蛍光抗体法で検出する。その結果、前年度報告したものに加えて、もう一種類の抗体がスポロゾイトの培養肝細胞への侵入を有意に阻害することを見出した。さらに、これらの抗体によるスポロゾイトの侵入阻害効果が、抗体の濃度に依存することを明らかにした。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (15件)

すべて 2019 2018 その他

すべて 雑誌論文 (5件) (うち国際共著 4件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (9件) (うち国際学会 4件、 招待講演 2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Plasmodium RON12 localizes to the rhoptry body in sporozoites2019

    • 著者名/発表者名
      Oda-Yokouchi Yuki、Tachibana Mayumi、Iriko Hideyuki、Torii Motomi、Ishino Tomoko、Tsuboi Takafumi
    • 雑誌名

      Parasitology International

      巻: 68 ページ: 17~23

    • DOI

      10.1016/j.parint.2018.10.001

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Rhoptry neck protein 11 has crucial roles during malaria parasite sporozoite invasion of salivary glands and hepatocytes2019

    • 著者名/発表者名
      Sirasate BANTUCHAI, Mamoru NOZAKI, Amporn THONGKUKIATKUL, Natcha LORSUWANNARAT, Mayumi TACHIBANA, Minami BABA, Kazuhiro MATSUOKA, Takafumi TSUBOI, Motomi TORII, Tomoko ISHINO
    • 雑誌名

      International Journal for Parasitology

      巻: 印刷中 ページ: 印刷中

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] The Micronemal Plasmodium Proteins P36 and P52 Act in Concert to Establish the Replication-Permissive Compartment Within Infected Hepatocytes2018

    • 著者名/発表者名
      Arredondo Silvia A.、Swearingen Kristian E.、Martinson Thomas、Steel Ryan、Dankwa Dorender A.、Harupa Anke、Camargo Nelly、Betz William、Vigdorovich Vladimir、Oliver Brian G.、Kangwanrangsan Niwat、Ishino Tomoko、Sather Noah、Mikolajczak Sebastian、Vaughan Ashley M.、Torii Motomi、Moritz Robert L.、Kappe Stefan H. I.
    • 雑誌名

      Frontiers in Cellular and Infection Microbiology

      巻: 8 ページ: -

    • DOI

      10.3389/fcimb.2018.00413

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Cytotoxic anti-circumsporozoite antibodies target malaria sporozoites in the host skin2018

    • 著者名/発表者名
      Aliprandini Eduardo、Tavares Joana、Panatieri Raquel Hoffmann、Thiberge Sabine、Yamamoto Marcio Massao、Silvie Olivier、Ishino Tomoko、Yuda Masao、Dartevelle Sylvie、Traincard Fran?ois、Boscardin Silvia Beatriz、Amino Rogerio
    • 雑誌名

      Nature Microbiology

      巻: 3 ページ: 1224~1233

    • DOI

      doi: 10.1038/s41564-018-0254-z

    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Rhoptry neck protein 2 expressed in Plasmodium sporozoites plays a crucial role during invasion of mosquito salivary glands2018

    • 著者名/発表者名
      Ishino Tomoko、Murata Eri、Tokunaga Naohito、Baba Minami、Tachibana Mayumi、Thongkukiatkul Amporn、Tsuboi Takafumi、Torii Motomi
    • 雑誌名

      Cellular Microbiology

      巻: 21 ページ: e12964~e12964

    • DOI

      10.1111/cmi.12964

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] スポロゾイトの唾液腺侵入に関わるロプトリータンパク質RAMAの作用機序の解明2019

    • 著者名/発表者名
      藤崎佳乃、馬場みなみ、野崎守、橘真由美、松岡和弘、坪井敬文、鳥居本美、石野智子
    • 学会等名
      第88回 日本寄生虫学会大会
  • [学会発表] マラリア原虫侵入型の先端部小器官ロプトリーに局在するRON12の解析2019

    • 著者名/発表者名
      小田(横内)ゆき、橘真由美、入子英幸、鳥居本美、坪井敬文、石野智子
    • 学会等名
      第88回 日本寄生虫学会大会
  • [学会発表] マラリア原虫スポロゾイト肝臓感染における RON4 の機能解析2019

    • 著者名/発表者名
      馬場 みなみ, 野崎 守, 鳥居 本美, 石野 智子
    • 学会等名
      第88回 日本寄生虫学会大会
  • [学会発表] 時期特異的遺伝子発現抑制原虫を用いた マラリア原虫スポロゾイトの侵入機構の解析2019

    • 著者名/発表者名
      石野智子
    • 学会等名
      第一回 日本医学会連合Rising Starリトリート
  • [学会発表] Involvement of Plasmodium rhoptry proteins in sporozoite invasion of mammalian hepatocytes.2018

    • 著者名/発表者名
      Tomoko Ishino
    • 学会等名
      14th International Congress of Parasitology
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Involvement of Plasmodium rhoptry proteins in sporozoite invasion2018

    • 著者名/発表者名
      Tomoko Ishino
    • 学会等名
      Protein Island Matsuyama
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Role of Apical Sushi Protein in sporozoite invasion of salivary glands.2018

    • 著者名/発表者名
      Kazuhiro Matsuoka, Amporn Thongkukiatkul, Takafumi Tsuboi, Motomi Torii, Tomoko Ishino
    • 学会等名
      American Society of Tropical Medicine and Hygiene 67th Annual Meeting
    • 国際学会
  • [学会発表] RALP1 is localized to rhoptries in sporozoites and involved in infection of the mammalian liver.2018

    • 著者名/発表者名
      Minami Baba, Mina Fujii, Yuka Sugino, Motomi Torii, Tomoko Ishino
    • 学会等名
      American Society of Tropical Medicine and Hygiene 67th Annual Meeting
    • 国際学会
  • [学会発表] スポロゾイトにおけるロプトリータンパク質群の網羅的機能解析2018

    • 著者名/発表者名
      石野智子
    • 学会等名
      分子寄生虫学フォーラム
  • [備考] 愛媛大学 プロテオサイエンスセンター 寄生病原体学部門

    • URL

      https://www.m.ehime-u.ac.jp/school/parasitology/

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公開日: 2019-12-27  

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