ピロリ菌病原因子複合体による疾患発症機構

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16H05191
• 研究機関: 大分大学
• 研究代表者: 山岡 吉生 大分大学, 医学部, 教授 (00544248)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: ヘリコバクター・ピロリ / 外膜タンパク / タンパク質複合体 / 病原因子 / 炎症

研究実績の概要

oipA遺伝子のコドンを大腸菌に最適化し、組換え全長OipAタンパク質の発現系を確立した。組換えOipAタンパク質は大腸菌の外膜に局在していたことから、OipAが外膜タンパク質であることを生化学的に明らかにした。また変性条件下での組換えタンパク質の精製と、リフォールディング法を確立し、大腸菌の1L培養から1mgの組換えタンパク質を得ることが可能となった。ピロリ菌の病原因子は病原因子間で相互作用しているのではないかと考え、ピロリ菌の膜タンパク質複合体の解析を行った。その結果、OipAを特定の分子量のゲル (102-222 kDa間) から検出した。単量体OipAの推定分子量は32kDaであることから、OipAがピロリ菌の膜領域で多量体を形成しているか、または他分子と複合体を形成していることが示唆された。さらに、ピロリ菌膜内でのOipA相互作用分子の探索として、精製した組換えOipAタンパク質からウサギポリクローナルOipA抗体を作製し、これを用いた免疫沈降によりOipAの相互作用分子の探索を行った。野生株とoipA欠損株の免疫沈降サンプルをSDS-PAGEゲルで比較解析したところ、野生株ではOipAタンパク質は抗体により検出され、さらに共沈降されたタンパク質もみられた。このことから、ピロリ菌内でOipAは他の分子と相互作用していることが考えられた。OipAタンパク質を胃上皮粘膜細胞と共培養して、マイクロアレイにて解析したところ、OipAタンパク質は炎症性サイトカインであるインターロイキンー8の発現にはかかわっていないことが推測されたが、表面接着に関与するFAKなどの発現に関与していることが示唆された。また、国際共同研究として、アジア各国で分離培養されたピロリ菌におけるoipA遺伝子の構造についても検討を行い、ほぼ全例でoipA遺伝子がスイッチオンの状態であることを確定した。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [国際共同研究] ベイラー医科大学/ヒューストン大学ガルベストン校(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: ベイラー医科大学/ヒューストン大学ガルベストン校
• [国際共同研究] 108病院/チョーライ病院/ハノイ医科大学(ベトナム)
  • 国名: ベトナム
  • 外国機関名: 108病院/チョーライ病院/ハノイ医科大学
  • 他の機関数: 3
• [国際共同研究] ブータン王立医科大学(ブータン)
  • 国名: ブータン
  • 外国機関名: ブータン王立医科大学
• [国際共同研究] キンシャサ大学/ムブジマイ大学/国立バイオ医学研究所(コンゴ民主共和国)
  • 国名: コンゴ民主共和国
  • 外国機関名: キンシャサ大学/ムブジマイ大学/国立バイオ医学研究所
  • 他の機関数: 1
• [国際共同研究] ベンダ大学(南アフリカ)
  • 国名: 南アフリカ
  • 外国機関名: ベンダ大学
• [国際共同研究]
  • 他の国数: 13
• [雑誌論文] Role of Vonoprazan in Helicobacter pylori Eradication Therapy in Japan (2019)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto Mitsushige、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Frontiers in Pharmacology 巻: 9 ページ: 1560-1～1560-15
  • DOI: 10.3389/fphar.2018.01560
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] <p>Alternative eradication regimens for <em>Helicobacter pylori</em> infection in Indonesian regions with high metronidazole and levofloxacin resistance</p> (2019)
  • 著者名/発表者名: Miftahussurur Muhammad、Waskito Langgeng Agung、Syam Ari Fahrial、Nusi Iswan Abbas、Siregar Gontar、Richardo Marselino、Bakry Achmad Fuad、Rezkitha Yudith Annisa Ayu、Wibawa I Dewa Nyoman、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Infection and Drug Resistance 巻: Volume 12 ページ: 345～358
  • DOI: 10.2147/IDR.S187063
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Effective therapeutic regimens in two South Asian countries with high resistance to major Helicobacter pylori antibiotics (2019)
  • 著者名/発表者名: Miftahussurur Muhammad、Aftab Hafeza、Shrestha Pradeep Krishna、Sharma Rabi Prakash、Subsomwong Phawinee、Waskito Langgeng Agung、Doohan Dalla、Fauzia Kartika Afrida、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Antimicrobial Resistance & Infection Control 巻: 8 ページ: 40-1～40-10
  • DOI: 10.1186/s13756-019-0482-x
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Five alternative Helicobacter pylori antibiotics to counter high levofloxacin and metronidazole resistance in the Dominican Republic (2019)
  • 著者名/発表者名: Miftahussurur Muhammad、Cruz Modesto、Doohan Dalla、Subsomwong Phawinee、Abreu Jos? A. Jim?nez、Hosking Celso、Waskito Langgeng Agung、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 14 ページ: e0213868-1～14
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0213868
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Aggregatibacter actinomycetemcomitans infection causes DNA double-strand breaks in host cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Teshima Rie、Hanada Katsuhiro、Akada Junko、Kawano Kenji、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 23 ページ: 264～273
  • DOI: 10.1111/gtc.12570
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The prevalence of Helicobacter pylori infection and other risk factors among Mongolian dyspeptic patients who have a high incidence and mortality rate of gastric cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: Khasag Oyuntsetseg、Boldbaatar Gantuya、Tegshee Tserentogtoh、Duger Davaadorj、Dashdorj Azzaya、Uchida Tomohisa、Matsuhisa Takeshi、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Gut Pathogens 巻: 10 ページ: 14-1～14-9
  • DOI: 10.1186/s13099-018-0240-2
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Distribution and clinical associations of integrating conjugative elements and cag pathogenicity islands of Helicobacter pylori in Indonesia (2018)
  • 著者名/発表者名: Waskito Langgeng Agung、Miftahussurur Muhammad、Lusida Maria Inge、Syam Ari Fahrial、Suzuki Rumiko、Subsomwong Phawinee、Uchida Tomohisa、Hamdan Muhammad、Nasronudin、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 8 ページ: 6073-1～6073-9
  • DOI: 10.1038/s41598-018-24406-y
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Epidemiology of Helicobacter pylori and CagA-Positive Infections and Global Variations in Gastric Cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: Park Jin、Forman David、Waskito Langgeng、Yamaoka Yoshio、Crabtree Jean
  • 雑誌名: Toxins 巻: 10 ページ: 163-1～163-20
  • DOI: 10.3390/toxins10040163
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Prevalence and Pattern of Antibiotic Resistant Strains of Helicobacter Pylori Infection in ASEAN (2018)
  • 著者名/発表者名: Vilaichone RK, Quach DT, Yamaoka Y, Sugano K, Mahachai V
  • 雑誌名: Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 巻: 19 ページ: 1411～1413
  • DOI: 10.22034/APJCP.2018.19.5.1411
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Prevalence of Helicobacter pylori and its CagA subtypes in gastric cancer and duodenal ulcer at an Austrian tertiary referral center over 25 years (2018)
  • 著者名/発表者名: Kamogawa-Schifter Yumiko、Yamaoka Yoshio、Uchida Tomohisa、Beer Andrea、Tribl Barbara、Sch?niger-Hekele Maximilian、Trauner Michael、Dolak Werner
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 13 ページ: e0197695-1～11
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0197695
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Genetic diversity and functional analysis of oipA gene in association with other virulence factors among Helicobacter pylori isolates from Iranian patients with different gastric diseases (2018)
  • 著者名/発表者名: Farzi Nastaran、Yadegar Abbas、Aghdaei Hamid Asadzadeh、Yamaoka Yoshio、Zali Mohammad Reza
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 60 ページ: 26～34
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2018.02.017
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Genetic populations and virulence factors of Helicobacter pylori (2018)
  • 著者名/発表者名: Kabamba Evariste Tshibangu、Tuan Vo Phuoc、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 60 ページ: 109～116
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2018.02.022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Call for shift in Helicobacter pylori treatment (2018)
  • 著者名/発表者名: Talebi Bezmin Abadi Amin、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: European Journal of Gastroenterology & Hepatology 巻: 30 ページ: 687～687
  • DOI: 10.1097/MEG.0000000000001096
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Current understanding and management of Helicobacter pylori infection: an updated appraisal (2018)
  • 著者名/発表者名: Ansari Shamshul、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: F1000Research 巻: 7 ページ: 721-1～721-10
  • DOI: 10.12688/f1000research.14149.1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] How to eliminate gastric cancer-related death worldwide? (2018)
  • 著者名/発表者名: Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Nature Reviews Clinical Oncology 巻: 15 ページ: 407～408
  • DOI: 10.1038/s41571-018-0029-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Therapeutic effect of lyophilized, Kefir-fermented milk on constipation among persons with mental and physical disabilities (2018)
  • 著者名/発表者名: Maki Rumiko、Matsukawa Mayumi、Matsuduka Atsuko、Hashinaga Masahiko、Anai Hirofumi、Yamaoka Yoshio、Hanada Katsuhiro、Fujii Chieko
  • 雑誌名: Japan Journal of Nursing Science 巻: 15 ページ: 218～225
  • DOI: 10.1111/jjns.12189
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori (2018)
  • 著者名/発表者名: Ma Jianwei、Hiratsuka Takahiro、Etoh Tsuyoshi、Akada Junko、Fujishima Hajime、Shiraishi Norio、Yamaoka Yoshio、Inomata Masafumi
  • 雑誌名: Journal of Gastroenterology and Hepatology 巻: 33 ページ: 1492～1499
  • DOI: 10.1111/jgh.14066
  • 査読あり
• [雑誌論文] New observations regarding Helicobacter pylori and gastric cancer in Mongolia (2018)
  • 著者名/発表者名: Gantuya Boldbaatar、Bolor Dashdorj、Oyuntsetseg Khasag、Erdene-Ochir Yansan、Sanduijav Ruvjir、Davaadorj Duger、Tserentogtokh Tegshee、Azzaya Dashdorj、Uchida Tomohisa、Matsuhisa Takeshi、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Helicobacter 巻: 23 ページ: e12491-1～8
  • DOI: 10.1111/hel.12491
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Diffuse Gastric Cancer: A Summary of Analogous Contributing Factors for Its Molecular Pathogenicity (2018)
  • 著者名/発表者名: Ansari Shamshul、Gantuya Boldbaatar、Tuan Vo、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Sciences 巻: 19 ページ: 2424-1～2424-19
  • DOI: 10.3390/ijms19082424
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Helicobacter pylori therapy and clinical perspective (2018)
  • 著者名/発表者名: Talebi Bezmin Abadi Amin、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Journal of Global Antimicrobial Resistance 巻: 14 ページ: 111～117
  • DOI: 10.1016/j.jgar.2018.03.005
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Pathogenesis of Helicobacter pylori infection (2018)
  • 著者名/発表者名: Waskito Langgeng Agung、Salama Nina R.、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Helicobacter 巻: 23 ページ: e12516-1～6
  • DOI: 10.1111/hel.12516
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Gastroesophageal reflux disease in an area with low Helicobacter pylori infection prevalence (2018)
  • 著者名/発表者名: Miftahussurur Muhammad、Doohan Dalla、Nusi Iswan Abbas、Adi Pangestu、Rezkitha Yudith Annisa Ayu、Waskito Langgeng Agung、Fauzia Kartika Afrida、Bramantoro Taufan、Maimunah Ummi、Thamrin Husin、Masithah Safitri Indah、Sukadiono Sukadiono、Uchida Tomohisa、Lusida Maria Inge、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 13 ページ: e0205644.1～15
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0205644
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] The role of integrating conjugative elements in Helicobacter pylori: a review (2018)
  • 著者名/発表者名: Waskito Langgeng Agung、Yih-Wu Jeng、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Journal of Biomedical Science 巻: 25 ページ: 86-1～86-10
  • DOI: 10.1186/s12929-018-0489-2
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Helicobacter pylori Infection and Related Gastrointestinal Diseases in Southeast Asian Countries: An Expert Opinion Survey (2018)
  • 著者名/発表者名: Quach Duc Trong、Vilaichone Ratha-korn、Vu Khien Van、Yamaoka Yoshio、Sugano Kentaro、Mahachai Varocha
  • 雑誌名: Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 巻: 19 ページ: 3565～3569
  • DOI: 10.31557/APJCP.2018.19.12.3565
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Evaluation of serum markers for gastric cancer and its precursor diseases among high incidence and mortality rate of gastric cancer area (2018)
  • 著者名/発表者名: Gantuya Boldbaatar、Oyuntsetseg Khasag、Bolor Dashdorj、Erdene-Ochir Yansan、Sanduijav Ruvjir、Davaadorj Duger、Tserentogtokh Tegshee、Uchida Tomohisa、Yamaoka Yoshio
  • 雑誌名: Gastric Cancer 巻: 22 ページ: 104～112
  • DOI: 10.1007/s10120-018-0844-8
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Dysbiosis of the Gut Microbiota on the Inflammatory Background due to Lack of Suppressor of Cytokine Signalling-1 in Mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Gendo Yoshiko、Matsumoto Takashi、et al. and Yamaoka Yoshio、Murakami Kazunari、Kobayashi Takashi
  • 雑誌名: Inflammatory Intestinal Diseases 巻: 3 ページ: 145～154
  • DOI: 10.1159/000495462
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Helicobacter pylori virulence and gastric cancer pathogenesis: current knoeledge (2019)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: The 27th Annual Meeting of the Korean College of Helicobacter and Upper Gastrointestinal Research and the 16th Japan-Korea Joint Symposium on Helicobacter Research
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] A potential biomarker panel to distinguish gastric cancer from duodenal ulcer: results from GWAS in East Asian-type Helicobacter pylori (2019)
  • 著者名/発表者名: Vo Phuoc Tuan, Kouji Yahara, Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: The 27th Annual Meeting of the Korean College of Helicobacter and Upper Gastrointestinal Research and the 16th Japan-Korea Joint Symposium on Helicobacter Research
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Gastritis: Past, current and future treatment (2019)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: World Class Professor Program in Indonesia
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] H. pylori-related pathogenesis of diffuse-type gastric cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: The 2nd Seoul international Symposium on Helicobacter
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Helicobacter pylori eradication and Gastric cancer prevention (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: The 2018 International Forum of Helicobacter pylori, Gastrointestinal Microbiota and the Associated diseases
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Updated information about the pathogenesis of Helicobacter pylori infection (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: The 8th Shanghai International Conference of Gastroenterology
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Non-Helicobacter pylori microbiome in gastric carcinogenesis (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: Asian Pacific Digestive Week（APDW 2018）
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Helicobacter pylori: Challenging the present and future (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshio Yamaoka
  • 学会等名: Makassar Gastroenterology Hepatology Update 2018 (MAGEHAP2018) & Gastroenterology-Hepatology Update; Surabaya-Denpasar-Malang-Makassar 14 (SUDEMMA14) Joint conference.
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 胃のマイクロバイオームに関する検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 山岡吉生
  • 学会等名: 平成30年度（第50回）九州微生物研究会総会
  • 招待講演
• [図書] Microbiota: Current Research and Emerging Trends (2019)
  • 著者名/発表者名: Vo Phuoc Tuan, Boldbaatar Gantuya, Takashi Matsumoto and Yoshio Yamaoka
  • 総ページ数: 24
  • 出版者: Caister Academic Press
• [備考] 大分大学医学部環境・予防医学講座
  • URL: http://www.med.oita-u.ac.jp/phealth2/index.html
• [備考] 大分大学国際教育研究推進機構
  • URL: http://in-gear.med.oita-u.ac.jp/
• [産業財産権] ペプチド及びその利用 (2018)
  • 発明者名: 赤田純子、山岡吉生、村上和成、塩田星児
  • 権利者名: 赤田純子、山岡吉生、村上和成、塩田星児
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2018-123612
• [学会・シンポジウム開催] 「アフリカにおけるピロリ菌感染」国際セミナー：ルワンダおよびケニア共和国にて開催 (2018)