iPS細胞を利用したCD4陽性T細胞の再生医療のための基盤技術の確立

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16H05194
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 塩田 達雄 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (00187329)
• 研究分担者: 明里 宏文 京都大学, 霊長類研究所, 教授 (20294671) ; 金子 新 京都大学, iPS細胞研究所, 准教授 (40361331)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: iPS / TRIM5 / CCR5 / CD4

研究実績の概要

iPS細胞から様々な組織が再生構築可能になっている。我々はこれまで血球系細胞の分化、なかでもT細胞の構築に取り組んできた結果、ヒトCD8陽性T細胞の再生に成功した。一方で、サルでの前臨床試験の必要性を鑑み、アカゲザルiPS細胞の樹立とマクロファージあるいはCD8陽性T細胞への分化誘導にも成功している。しかし、ヒトにおいてもアカゲザルにおいても、CD4陽性T細胞の再構築は出来ていない。本研究は、in vivoにおけるT細胞の選択分化が可能なマウスやアカゲザル個体への移植実験により、CD4陽性T細胞の誘導と定着を目的とする。
iPS細胞由来のT細胞が実験動物の個体内でどこまで生着できるか、の検討を行うために、樹立したiPS細胞に、HIV-1阻害因子TRIM5遺伝子やHIV-1やSIV感染に必須なCCR5遺伝子をCRISPR/Cas9によるゲノム編集技術で人為的に破壊しGFPでマーキングする作業を行ってきた。残念ながら、ヒト由来のiPS細胞では遺伝子導入が成功するのに対して、同じ実験条件ではサル由来iPS細胞には導入できず、H30年度を遺伝子導入効率の向上の条件検討に費やし、TRIM5遺伝子のCRISPR/Cas9によるゲノム編集は可能となり現在はマーカー遺伝子EGFRの導入を行なっている。一方で、樹立したiPS細胞からマクロファージへの分化誘導は安定してできるようになり、マクロファージとしての貪食能を備えていること、SIVmac316の感染が成立することを確認した。現在、TRIM5遺伝子欠損細胞でのHIV感染能獲得を確認している。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Relationship between genome packaging and Gag translation/AUG of primate lentiviruses (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakuragi Sayuri、Shioda Tatsuo、Sakuragi Jun-ichi
  • 雑誌名: Microbes and Infection 巻: 21 ページ: 119～123
  • DOI: 10.1016/j.micinf.2018.09.002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] PIM kinases facilitate lentiviral evasion from SAMHD1 restriction via Vpx phosphorylation (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyakawa K, Matsunaga S, Yokoyama M, Nomaguchi M, Kimura Y, Nishi M, Kimura H, Sato H, Hirano H, Tamura T, Akari H, Miura T, Adachi A, Sawasaki T, Yamamoto N, Ryo A
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Targeted Disruption of HLA Genes via CRISPR-Cas9 Generates iPSCs with Enhanced Immune Compatibility (2019)
  • 著者名/発表者名: Xu Huaigeng、Wang Bo、Ono Miyuki、Kagita Akihiro、Fujii Kaho、Sasakawa Noriko、Ueda Tatsuki、Gee Peter、Nishikawa Misato、Nomura Masaki、Kitaoka Fumiyo、Takahashi Tomoko、Okita Keisuke、Yoshida Yoshinori、Kaneko Shin、Hotta Akitsu
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 巻: 24 ページ: 566～578.e7
  • DOI: 10.1016/j.stem.2019.02.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Developing thymus-on-a-chip and cancer-on-a-chip for cancer immunotherapy. (2019)
  • 著者名/発表者名: Torisawa Y, Mishima Y, Kaneko S
  • 雑誌名: Impact 巻: 29 ページ: 33-35
  • 査読あり
• [雑誌論文] Toward the development of true “off-the-shelf” synthetic T-cell immunotherapy (2019)
  • 著者名/発表者名: Iriguchi Shoichi、Kaneko Shin
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 110 ページ: 16～22
  • DOI: 10.1111/cas.13892
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Defects in assembly explain reduced antiviral activity of the G249D polymorphism in human TRIM5α. (2018)
  • 著者名/発表者名: KomurluS, Bradley M, Smolin N, Imam S, Pauszek RF 3rd, Robia SL, Millar D, Nakayama EE, Shioda T, Campbell EM.
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 14 ページ: e0212888
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0212888
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] External Quality Assessment Scheme for HIV-1 Drug-Resistance Genotyping in Thailand (2018)
  • 著者名/発表者名: Saeng-aroon Siriphan、Saipradit Nonglak、Loket Ruangchai、Klamkhai Nattapong、Boonmuang Ratrawee、Kaewprommal Pavita、Prommajan Korrakot、Takeda Naokazu、Sungkanuparph Somnuek、Shioda Tatsuo、Sangkitporn Somchai、Motomura Kazushi
  • 雑誌名: AIDS Research and Human Retroviruses 巻: 34 ページ: 1028～1035
  • DOI: 10.1089/AID.2017.0299
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Naturally Occurring Mutations in HIV-1 CRF01_AE Capsid Affect Viral Sensitivity to Restriction Factors (2018)
  • 著者名/発表者名: Nakayama Emi E.、Saito Akatsuki、Sultana Tahmina、Jin Zhuan、Nohata Kyotaro、Shibata Masato、Hosoi Miho、Motomura Kazushi、Shioda Tatsuo、Sangkitporn Somchai、Loket Ruangchai、Saeng-aroon Siriphan
  • 雑誌名: AIDS Research and Human Retroviruses 巻: 34 ページ: 382～392
  • DOI: 10.1089/AID.2017.0212
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Diversity of <i>ULBP5</i> in Old-World monkeys (Cercopithecidae) and divergence of the <i>ULBP</i> gene family in primates (2018)
  • 著者名/発表者名: NARUSE Taeko K.、AKARI Hirofumi、MATANO Tetsuro、KIMURA Akinori
  • 雑誌名: Proceedings of the Japan Academy, Series B 巻: 94 ページ: 441～453
  • DOI: 10.2183/pjab.94.029
  • 査読あり
• [雑誌論文] Understanding the facts and minding the gap of (HIV-1/HIV-2) primate research and infectious disease laboratories in Africa. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ejikeugwu C, Eze P, Iroha I, Esimone C, Adikwu M, Akari H,
  • 雑誌名: International Journal of Virology and AIDS 巻: 5 ページ: 046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of HIV-Resistant Macrophages from iPSCs by Using Transcriptional Gene Silencing and Promoter-Targeted RNA. (2018)
  • 著者名/発表者名: Higaki K, Hirao M, Kawana-Tachikawa A, Iriguchi S, Kumagai A, Ueda N, Bo W, Kamibayashi S, Watanabe A, Nakauchi H, Suzuki K, Kaneko S.
  • 雑誌名: Molecular Therapy Nucleic Acids 巻: 12 ページ: 793-804
  • DOI: 10.1016/j.omtn.2018.07.017.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Regeneration of TCR expressing Innate Lymphoid helper cells that induces cytotoxic T cell-mediated anti-leukemic immunity in HLA Class II and bcr-abl peptide restriction. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ueda N, Uemura Y, Zhang R, Kitayama S, Iriguchi S, Kawai Y, Yasui Y, Tatsumi M, Liu TY, Mizoro Y, Okada C, Watanabe A, Nakanishi M, Senju S, Nishimura Y, Kuzushima K, Kiyoi H, Naoe T, and Kaneko S.
  • 雑誌名: Stem Cell Reports 巻: 10 ページ: 1935-1946
  • DOI: 10.1016/j.stemcr.2018.04.025.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Repurposing the Cord Blood Bank for Haplobanking of HLA-Homozygous iPSCs and Their Usefulness to Multiple Populations (2018)
  • 著者名/発表者名: Lee Suji、Huh Ji Young、Turner David M.、Lee Soohyeon、Robinson James、Stein Jeremy E.、Shim Sung Han、Hong Chang Pyo、Kang Myung Seo、Nakagawa Masato、Kaneko Shin、Nakanishi Mahito、Rao Mahendra S.、Kurtz Andreas、Stacey Glyn N.、Marsh Steven G.E.、Turner Marc L.、Song Jihwan
  • 雑誌名: STEM CELLS 巻: 36 ページ: 1552～1566
  • DOI: 10.1002/stem.2865
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Enhancing T Cell Receptor Stability in Rejuvenated iPSC-Derived T Cells Improves Their Use in Cancer Immunotherapy (2018)
  • 著者名/発表者名: Minagawa A、Yoshikawa T、Yasukawa M、Hotta A、Kunitomo M、Iriguchi S、Takiguchi M、Kassai Y、Imai E、Yasui Y、Kawai Y、Zhang R、Uemura Y、Miyoshi Hi、Nakanishi M、Watanabe A、Hayashi A、Kawana K、Fujii T、Nakatsura T、Kaneko S
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 巻: 23 ページ: 850～858.e4
  • DOI: 10.1016/j.stem.2018.10.005
  • 査読あり
• [学会発表] 再生医療等製品の若手開発者による薬事承認に向けた開発と課題 (2019)
  • 著者名/発表者名: 金子新
  • 学会等名: 第18回日本再生医療学会 シンポジウム39
  • 招待講演
• [学会発表] Multiple pathways to avoid IFN-β sensitivity of HIV-1 by mutants capsid (2018)
  • 著者名/発表者名: Akatsuki Saito,Joa0 I Mamede,Tahmina Sultana,Hirotaka Ode,Kyoutaro Nohata,Emi Nakayama,Yasumasa Iwatani,Thomas J Hope,Tatsuo Shioda
  • 学会等名: Retroviruses 2018
  • 国際学会
• [学会発表] Naturally Occurring Mutations in HIV-1 CRF01_AE Capsid Affect Viral Sensitivity to Restriction Factors (2018)
  • 著者名/発表者名: Nakayama EE, Saito A, Sultana T, Jin Z, Nohata K, Shibata M, Hosoi M, Motomura K, Shioda T, Sangkitporn S, Loket R, Saeng-Aroon S.
  • 学会等名: The 17th Awaji International Forum on Infection and Immunity
  • 国際学会
• [学会発表] The Q4R mutation accelerates Kinetics of reverse transcription and initiation of uncoating of IFN-β hypersensitive HIV-1 capsid mutant (2018)
  • 著者名/発表者名: Akatsuki Saito, Joao I Mamede, Tahmina Sultana, kyoutaro Nohata, Emi E nakayama, Tatsuo Shioda, Thomas J Hope.
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] HIV-1カプシドによるI型インターフェロン感受性の制御 (2018)
  • 著者名/発表者名: 齊藤 暁
  • 学会等名: 第32回日本エイズ学会学術集会
• [学会発表] カプシド182番目アミノ酸残基のCPSF6結合への寄与はHIV-1とHIV-2で異なる (2018)
  • 著者名/発表者名: 齊藤 暁, 大出裕高,野畑享太郎,大森久樹,中山英美,岩谷靖雅,塩田達雄
  • 学会等名: 第32回日本エイズ学会学術集会
• [学会発表] A novel PKC actvator 10-Methyl-Aplog-1 in combination with JQ1 showed high potency as LRA for shock and kill therapy (2018)
  • 著者名/発表者名: Ayaka Washizaki, Megumi Murata, Yohei Seki, Yin Pui Tang, Hiroyuki Kangawa, Tan Wei Keat, Kazuhiro Irie, Hirofumi Akari
  • 学会等名: 36th Annual Symposium Nonhuman Primate Models for AIDS
  • 国際学会
• [学会発表] Cooperative cellular and humoral immunity may contribute to the efficient control of HIV-1 replication in macaques. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yohei Seki, Akatsuki Saito, Shigeyoshi Harada, Ayaka Washizaki, Megumi Murata, Yuta Hikichi, Kazuhisa Yoshimura, Hiroshi Ishii, Yorifumi Satou, Islam Mohammad Saiful, Hirotaka Ode, Yasumasa Iwatani, Takeshi Yoshida, Yasuhiro Yasutomi, Tetsuro Matano, Tomoyuki Miura, Hirofumi Akari
  • 学会等名: 36th Annual Symposium Nonhuman Primate Models for AIDS
  • 国際学会
• [学会発表] Molecular characterization of the env gene during transmission of macaque-tropic human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1mt) (2018)
  • 著者名/発表者名: Shigeyoshi Harada, Yuta Hikichi, Yohei Seki, Yasumasa Iwatani, Yasuhiro Yasutomi, Tomoyuki Miura, Tetsuro Matano, Hirofumi Akari, Kazuhisa Yoshimura
  • 学会等名: 36th Annual Symposium Nonhuman Primate Models for AIDS
  • 国際学会
• [学会発表] A novel PKC activator 10-Methyl-Aplog-1 in combination with JQ1 showed high potency as LRA for shock and kill therapy. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ayaka Washizaki, Megumi Murata, Yohei Seki, Yin Pui Tang, Hiroyuki Kangawa, Kazuhiro Irie, Hirofumi Akari
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] 新しいHIV感染霊長類モデル：HIV感染症の根治に向けて (2018)
  • 著者名/発表者名: 明里宏文
  • 学会等名: 第14回霊長類医科学フォーラム
  • 招待講演
• [学会発表] 新規PKC活性化剤10-Methyl-Aplog-1とJQ1の併用はLatency Reversing Agentとして理想的な活性を示す (2018)
  • 著者名/発表者名: 鷲崎彩夏, 村田めぐみ, 関洋平, Yin Pui Tang, 寒川裕之, Wei Keat Tan, 入江一浩, 明里宏文
  • 学会等名: 第32回 日本エイズ学会学術集会・総会
• [学会発表] HIV感染霊長類モデルによるHIV根治研究 (2018)
  • 著者名/発表者名: 明里宏文
  • 学会等名: 第32回 日本エイズ学会学術集会・総会
  • 招待講演
• [学会発表] T cell receptor-stabilized regenerated CD8ab cytotoxic T lymphocytes for cancer immunotherapy. (2018)
  • 著者名/発表者名: Minagawa A, Hotta A, Kawai Y, Yasui Y, Uemura Y, Yasukawa Y, Nakatsura T, Kaneko S.
  • 学会等名: AACR Annual Meeting 2018
  • 国際学会
• [学会発表] iPS細胞からのヒト免疫細胞再生 (2018)
  • 著者名/発表者名: 金子新
  • 学会等名: 第29回日本生体防御学学会学術総会
  • 招待講演
• [学会発表] HLA homologous iPS cell project for regenerative medicine. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kaneko S
  • 学会等名: Frontier iPS and Stem Cell Therapeutic Summit 2018 in Taipei
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Enhancing T cell receptor stability confirm antigen specificity of regenerated T cell (2018)
  • 著者名/発表者名: 金子新
  • 学会等名: 第18回日本再生医療学会ISCT Joint Symposium
  • 招待講演