ハイブリッド低分子抗体による胃がん幹細胞標的強制的オートファジー誘導療法の開発

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16H05291
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 鈴木 秀和 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 教授 (70255454)
• 研究分担者: 津川 仁 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (30468483) ; 土居 信英 慶應義塾大学, 理工学部(矢上), 教授 (50327673)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: オートファジー / CD44v9 / 癌幹細胞 / H. pylori / CagA / ペプチド

研究実績の概要

H. pylori感染細胞におけるオートファジー発現は本菌由来がん蛋白質CagA分解を担うため、癌化抑制に寄与する重要な宿主応答である。しかし、CD44v9発現癌幹細胞では、このオートファジーが発現せず細胞内CagAが分解されずに蓄積するため、胃癌発生・再発に関連する癌幹細胞となると考えられた。CagAのオートファジー分解はautophagosome形成だけでなくLAMP1依存性autophagolysosome形成にも必須であり、我々はアクチン重合制御因子CAPZA1が核内でLRP1-ICDと結合しLAMP1発現を阻害することを明らかにし、かつ、オートファジー発現不全のCAPZA1過剰発現細胞にCagAが装填されるとCagAは分解されずにCD44v9発現が亢進することを示し、CD44v9発現癌幹細胞を標的するためにCD44v9発現の標的に加え核内移行した大量のCAPZA1を標的する必要があると考えた。そこで、CD44v9を標的しCD44v9陽性細胞特異的自殺因子を細胞質内送達する目的で、ヒトSyncytin1由来膜透過促進ペプチドS19とTAT とを組み合わせたところ、細胞質内送達効率を数十倍に向上しえた。さらに初期エンドソーム（EE）と後期エンドソーム（LE）の脂質膜組成模倣リポソームを調製しS19-TATペプチドを作用させたところ、S19-TATはEEではなくLEから細胞質に離脱し、S19-TATは、細胞内異物分解機構から離脱可能であることが示された。次に、CD44v9陽性細胞に標的物質を特異的送達するためmRNAディスプレイ法で取得した抗CD44v9一本鎖抗体とヒト由来膜透過促進ペプチドを融合した蛍光タンパクを大量精製しCD44v9陽性細胞選択的な細胞内取り込みを確認した。以上から、CD44v9発現細胞標的療法の基盤が構築された。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] CAPZA1 determines the risk of gastric carcinogenesis by inhibiting Helicobacter pylori CagA-degraded autophagy (2019)
  • 著者名/発表者名: Tsugawa H, Mori H, Matsuzaki J, Sato A, Saito Y, Imoto M, Suematsu M, Suzuki H
  • 雑誌名: Autophagy 巻: 15 ページ: 242-258
  • DOI: 10.1080/15548627.2018.1515530
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical and endoscopic findings to assist the early detection of duodenal adenoma and adenocarcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki, J., Suzuki, H.*, Shimoda, M., Mori, H., Fukuhara, S., Miyoshi, S., Masaoka, T., Iwao, Y., Kanai, T.
  • 雑誌名: United European Gastroenterology Journal 巻: 7 ページ: 250-260
  • DOI: https://doi.org/10.1177/2050640618817689
  • 査読あり
• [雑誌論文] Burden of impaired sleep quality on work productivity in functional dyspepsia (2018)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki, J., Suzuki, H.*, Togawa, K., Yamane, T., Mori, H., Komori, T., Masaoka, T., Kanai, T. .
  • 雑誌名: United European Gastroenterology Journal 巻: 6 ページ: 398-406
  • DOI: https://doi.org/10.1177/2050640617726466.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pethidine dose and female sex as risk factors for nausea after esophagogastroduodenoscopy. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa, T., Suzuki, H., Arita, M., Kataoka, Y., Fukagawa, K., Ohki, D., Hata, K., Uraoka, T., Kanai, T., Yahagi, N., Toyoshima, O.
  • 雑誌名: J Clin Biochem Nutr. 巻: 63 ページ: 230-232
  • DOI: 10.3164/jcbn.18-5.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autotaxin and vascular endothelial growth factor receptor-2 and -3 are related to vascular development during the progression of chronic viral hepatitis C. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yokomori, H., Ando, W., Kaneko, F., Suzuki, H., Igarashi, K., Oda, M.
  • 雑誌名: APMIS 巻: 126 ページ: 913-921
  • DOI: 10.1111/apm.12904
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibiting xCT improves 5-fluorouracil resistance of gastric cancer induced by CD44 variant 9 expression. (2018)
  • 著者名/発表者名: Miyoshi, S., Tsugawa, H., Matsuzaki, J., Hirata, K., Mori, H., Saya, H., Kanai, T., Suzuki, H.*
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 38 ページ: 6163-6170
  • DOI: 10.21873/anticanres.12969.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pathophysiology of potassium-competitive acid blocker-refractory gastroesophageal reflux and the potential of potassium-competitive acid blocker test. (2018)
  • 著者名/発表者名: Masaoka, T., Kameyama, H., Yamane, T., Yamamoto, Y., Takeuchi, H., Suzuki, H., Kitagawa, Y., Kanai, T.
  • 雑誌名: J Neurogastroenterol Motil. 巻: 24 ページ: 577-583
  • DOI: 10.5056/jnm18036
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum anti-Helicobacter pylori antibody titer and its association with gastric nodularity,atrophy,and age: A cross-sectional study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Toyoshima, O., Nishizawa, T., Sakitani, K., Yamakawa, T., Takahashi, Y., Yamauchi, N., Hata, K., Seto, Y., Koike, K., Watanabe, H., Suzuki, H.
  • 雑誌名: World J. Gastroenterol. 巻: 24 ページ: 4061-4068
  • DOI: 10.3748/wjg.v24.i35.4061
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum autotaxin concentrations reflect changes in liver stiffness and fibrosis after antiviral therapy in patients with chronic hepatitis C. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ando, W., Yokomori, H., Kaneko, F., Kaneko, M., Igarashi, K., Suzuki, H.*
  • 雑誌名: Hepatology Communications 巻: 2 ページ: 1111-1122
  • DOI: 10.1002/hep4.1230.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Helicobacter pylori infection in subjects negative for high titer serum antibody. (2018)
  • 著者名/発表者名: Toyoshima, O., Nishizawa, T., Arita, M., Kataoka, Y., Sakitani, K., Yoshida, S., Yamashita, H., Hata, K., Watanabe, H., Suzuki, H.
  • 雑誌名: World J. Gastroenterol. 巻: 24 ページ: 1419-1428
  • DOI: 10.3748/wjg.v24.i13.1419.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acquisition of double mutation in gyrA caused high resistance to sitafloxacin in Helicobacter pylori after unsuccessful eradication with sitafloxacin-containing regimens. (2018)
  • 著者名/発表者名: Mori, H., Suzuki, H.*, Matsuzaki, J., Masaoka, T., Kanai, T.
  • 雑誌名: United European Gastroenterology Journal 巻: 6 ページ: 391-397
  • DOI: https://doi.org/10.1177/2050640617737215.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Plausibility criteria for putative pathophysiological mechanisms in functional gastrointestinal disorders: a consensus of experts. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tack, J., Corsetti, M., Camilleri, Mi., Quigley, A., Simren, M., Suzuki, H., Talley, N.J., Tornbloom, H., Van Oudenhove, L.
  • 雑誌名: Gut 巻: 67 ページ: 1425-1433
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2016-312230.
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] H. pylori eradication: past, present and future. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: APDW2018, Seoul, Korea
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Nationwide eradication strategy for Helicobacter pylori infection in Japan. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: APDW2018, Seoul, Korea
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Gender difference in gastrointestinal function and functional GI disorders. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: APDW2018, Seoul, Korea
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] The evolving landscape of H. pylori, Relation to gastric cancer. Sponsored seminar lecture. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: The International Sentinel Node Society Biennial Meeting 2018 (ISNS 2018) Tokyo, Japan
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Case Presentation and Q&A - Novel approaches for PPI refractory GERD. Plenary Session 11: Novel approaches for PPI refractory GERD. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: The International Society for Diseases of the Esophagus (ISDE) 2018. VIenna, Austria
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Refux hypersensitivity: a new entity? (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: GUT 2018 (Annual Scientific Meeting of the Malaysian Society of Gastroenterology & Hepatology) Penang, Malaysia
  • 招待講演
• [学会発表] The evolving landscape of Helicobacter pylori in Asia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: GUT 2018 (Annual Scientific Meeting of the Malaysian Society of Gastroenterology & Hepatology) Penang, Malaysia
  • 招待講演
• [学会発表] Recent Advance in the therapeutic strategy for acid-related diseases. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: 58th GAT (Gastrointestinal Association of Thailand) Midyear Annual Meeting 2018, Bangkok, Thailand
  • 招待講演
• [学会発表] Association between oxidative stress and gastric carcinogenesis in H. pylori-infected patients. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tsugawa, H., Kato, C., Mori, H., Suematsu, M., Suzuki, H.
  • 学会等名: Summer School on Stress 2018, Osaka, Japan
  • 国際学会
• [学会発表] Role of stress on gastrointestinal function and diseases. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: Summer School on Stress 2018, Osaka, Japan
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Changes of characterization in gastric cancer cells via reactive oxygen species resistance. (2018)
  • 著者名/発表者名: Mori, H., Tsugawa, H., Matsuzaki, J., Masaoka, T., Kanai, T., Suzuki, H.
  • 学会等名: Summer School on Stress 2018, Osaka, Japan
  • 国際学会
• [学会発表] Expression of CAPZA1, a negative regulator of CagA-degrading autophagy, is enhanced by oxidative stress-induced histone acetylation in Helicobacter pylori-infected gastric mucosa: A possible risk for gastric carcinogenesis. Esophageal, Gastric & Duodenal Disorders (EGD) Section Distinguished Abstract Plenary. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kato, C., Tsugawa, H., Saito, Y., Suzuki, H.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2018, Washington, DC, U.S.A.
  • 国際学会
• [学会発表] Ghrelin is a useful marker of gastric mucosal atrophy after Helicobacter pylori eradication: a prospective clinical study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Mori, H., Suzuki, H., Matsuzaki, J., Masaoka, T., Igarashi, K., Kanai, T.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2018, Washington, DC, U.S.A.
  • 国際学会
• [学会発表] Specific prediction of duodenal tumor using demographic and endoscopic characteristics: an age and sex matched case control study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H., Matsuzaki, J., Shimoda, M., Mori, H., Fukuhara, S., Kanai, Y., Kanai, T.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2018, Washington, DC, U.S.A.
  • 国際学会
• [学会発表] Case study 2: Bloating & Fullness. Understanding Bloating & Fullness (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: SEAGMA&AGIFT 4th Scientific Meeting, Singapore
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Case study 1: Epigastric Pain. Helicobacter pylori gastritis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: SEAGMA&AGIFT 4th Scientific Meeting, Singapore
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Clinical evidence of Kampo medicine for functional gastrointestinal disorders (FGIDs). (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: SEAGMA&AGIFT 4th Scientific Meeting, Singapore
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Role of acid suppression in FD: PPI and PCAB. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H.
  • 学会等名: APNM2018, Seoul, Korea
  • 国際学会 / 招待講演