研究課題/領域番号 |
16H05539
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研究機関 | 新潟大学 |
研究代表者 |
高木 律男 新潟大学, 医歯学系, 教授 (20143795)
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研究分担者 |
大峡 淳 新潟大学, 医歯学系, 教授 (40266169)
児玉 泰光 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (90419276)
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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キーワード | 口蓋裂 |
研究実績の概要 |
CL/Fr系統p53遺伝子欠損コンジェニックマウス(CL/Fr-p53KO)の放射線照射実験から、p53遺伝子と口唇・口蓋裂発症の関連性は確認しているものの、p53遺伝子の機能喪失(増強)がCL/Fr系統に限られている可能性も否めない。そこで、他の系統マウスでのp53遺伝子欠損コンジェニックマウスを用い、各系統における疾患感受性を検討する。p53遺伝子の機能解析には、p53遺伝子の口蓋形成における正確な発現時期と発現領域の把握が必須となる。そこで、p53遺伝子欠損コンジェニックマウスの解析に先立ち、p53の口唇・口蓋形成における発現を、組織切片でのin situ hybridizationにて確認した。その際、口蓋突起の挙上、水平方向への突起の成長、口蓋突起の癒合という口蓋形成における形態変化、それぞれの形態におけるp53の発現が確認できるように考慮した。その結果、それぞれの形態でのp53の詳細な発現様式が確認できた。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
各系統マウスでのp53遺伝子欠損コンジェニックマウスを用いた口唇・口蓋裂の確認に先立ち、そのコントロールとなるCL/Fr-p53KOマウスの解析を行っているが、口唇・口蓋裂の発症率が低かった。異常の発現頻度は、実験デザインに大きく影響するため、実験に使用するマウスの匹数を増加させることを試みたものの、CL/Frマウスの繁殖力が弱く、予定の匹数を確保できなかったことが、実験の進捗に大きく影響した。現在様々な処置により、繁殖力は改善しており、今後は予定通りの研究遂行が可能と思われる。
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今後の研究の推進方策 |
CL/Fr-p53KOマウス、ならびに各系統p53マウスへの放射線照射実験からp53遺伝子の口蓋形成における機能解明を行う。各マウスにおけるShh, Wnt, Tgf, Bmpなどのシグナル活性、口蓋形成・口唇形成関連遺伝子の発現を、in situ hybridization、免疫染色、ウェスタンブロット、マイクロアレイ、qPCRなどで確認していく。一方で、TUNEL法にてアポトーシスの、Brd-U法にて細胞増殖の把握も行う。
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