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2017 年度 実績報告書

環境中のアフラトキシン産生菌及びその拮抗菌の探索と汚染制御

研究課題

研究課題/領域番号 16H05785
研究機関国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構

研究代表者

久城 真代  国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 食品研究部門, ユニット長 (40353932)

研究分担者 矢部 希見子  福井工業大学, 環境情報学部, 教授 (70158054)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード菌類 / カビ毒
研究実績の概要

昨年に引き続きトウモロコシ栽培期にメキシコの共同研究機関を訪問し、各地のトウモロコシ試験圃場から土壌を採取した。土壌の一部を用いて現地にて協力者と実験を行い、アフラトキシン産生菌ならびに非産生菌のスクリーニングを行った。亜熱帯に属する地域の試験圃場土壌より、2度スクリーニングを行い、Aspergillus属と思われる菌株4株(化学分析により毒素産生陽性2株ならびに陰性2株)を選抜・分離することができた。産生株と非産生株を1株ずつ形態解析及び分子遺伝学的解析に供した結果、これらは両者ともに目標のAspergillus flavusグループの菌株(毒素産生性のみ異なる)であり、それぞれMEX-A19-13(Bタイプアフラトキシン産生)ならびにMEX-A19-2nd-5(アフラトキシン非産生)と命名した。以上により、DV-AM法が、毒素産生特性の異なる同種の菌株の取得にも実用的に有効であることが示された。
MEX-A19-13については、国内分離のA. flavus菌株であるHA9-S1-1(ジーンバンク寄託:MAFF 111859, つくばソルガム試験圃場土壌由来, Mycoscience 2017に昨年度公表済)ならびに国内分離のA. pseudonomius菌株であるOKI-12(MAFF 111900, 沖縄さとうきび圃場土壌由来, JSM Mycotoxinsに本年度公表)と、糖に対する応答性が異なるという興味深い結果が得られた。
MEX-A19-13とMEX-A19-2nd-5については論文を準備しており、共同研究機関の研究者も興味を持っていることから、日墨でのシェアについても検討中である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

実績概要に記載のように、メキシコの共同研究機関の協力を得て、DV-AM法によりAspergillus flavus種に属するアフラトキシン産生株とアフラトキシン非産生株を取得することができた。これまでに、培養法により産生株と非産生株の同時スクリーニングを効率的に行った例は少ないことから、DV-AM法の活用事例として、学会発表ならびに論文化を準備している。以上より、計画通り、同種(Aspergillus flavus)に属しかつ毒素産生特性の異なる2株の取得に成功したことから、上の区分とした。
今回得られたアフラトキシン産生株は、以前に同様に圃場土壌から得られたアフラトキシン産生株2株(MAFF 111859, MAFF 111900)と糖に対する応答性等が異なっていた。
また、より高感度化した改良手法を確立しつつあるとともに、これまでにDV-AM法を用いて国内の圃場土壌より多くのアフラトキシン産生菌を分離することが出来たのみならず、圃場以外の土壌にも、アフラトキシン産生菌が分布しているという新たな知見が得られている。

今後の研究の推進方策

取得した産生株の特性解明を進めるとともに、計画に従って得られた非産生株と対峙培養を行い、非産生株のバイオコントロール剤としての効果を検証する。実績概要のとおり、メキシコ土壌からアフラトキシン産生株とアフラトキシン非産生株(バイオコントロール剤の候補株)の両者が得られていることから、これらを用いて、アフラトキシン生産の拮抗作用について解析する。両者を共存させた場合のアフラトキシン蓄積量ならびに菌体量(カビの細胞膜成分であるエルゴステロールを指標とする)の変動を解析する計画である。
日本国内及びメキシコの土壌を用いてバイオコントロール株の探索を継続して行う。さらに、12月に開催されるブラジルでの学会に参加してこれまでの成果を発表するとともに、ブラジルのトウモロコシ圃場においてアフラトキシン汚染が報告されていることから、ブラジルの研究者の協力の下、ブラジル国内のトウモロコシ圃場で汚染実態や防除に関する情報交換を考えており、現在連絡をとっているところである。
トウモロコシのアフラトキシン防除に関連して、ケニアの研究者が手法に興味を持っているほか、香辛料のアフラトキシン汚染が問題となっている東南アジアからも問合せが有り、手法の普及にも努めたいと考えている。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2018 2017 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (3件) (うち招待講演 1件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] 国際トウモロコシ・小麦改良センター(CIMMYT)(メキシコ)

    • 国名
      メキシコ
    • 外国機関名
      国際トウモロコシ・小麦改良センター(CIMMYT)
  • [雑誌論文] Isolation of minor aflatoxigenic fungi using dichlorvos-ammonia(DV-AM) method2018

    • 著者名/発表者名
      Kushiro Masayo、Hatabayashi Hidemi、Nakagawa Hiroyuki、Yabe Kimiko
    • 雑誌名

      JSM Mycotoxins

      巻: 68 ページ: 13~18

    • DOI

      https://doi.org/10.2520/myco.68-1-4

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 培養による毒素産生型アスペルギルス属かびの検出法-ジクロルボス-アンモニア蒸気法(DV-AM法)2018

    • 著者名/発表者名
      久城真代、矢部希見子
    • 雑誌名

      ニューフードインダストリー

      巻: 60(3) ページ: 21-27

  • [雑誌論文] Analysis of the Masked Metabolite of Deoxynivalenol and Fusarium Resistance in CIMMYT Wheat Germplasm2017

    • 著者名/発表者名
      Nakagawa Hiroyuki、He Xinyao、Matsuo Yosuke、Singh Pawan、Kushiro Masayo
    • 雑誌名

      Toxins

      巻: 9 ページ: 238~238

    • DOI

      10.3390/toxins9080238

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] Isolation of minor aflatoxigenic fungi using dichlorvos-ammonia (DV-AM) metho2018

    • 著者名/発表者名
      Chaw Nu Nu Aye, Yoshitsugu Sugiura, Masayo Kushiro
    • 学会等名
      日本マイコトキシン学会第81回学術講演会
  • [学会発表] ジクロルボス-アンモニア(DV-AM)法によるマイナーなアフラトキシン産生菌の同定2018

    • 著者名/発表者名
      久城真代、畑林秀美、中川博之、矢部希見子
    • 学会等名
      日本マイコトキシン学会第81回学術講演会
  • [学会発表] 培養による毒素産生型アスペルギルス属菌判別法の高度化2017

    • 著者名/発表者名
      久城真代
    • 学会等名
      公益財団法人飯島藤十郎記念食品科学振興財団第29回学術講演会
    • 招待講演
  • [備考] 食品研究部門 食品安全研究領域 食品化学ハザードユニット

    • URL

      http://www.naro.affrc.go.jp/nfri-neo/introduction/chart/0402/index.html

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公開日: 2018-12-17   更新日: 2022-08-05  

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