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Epstein-Barr ウイルス(EBV)はがん治療や移植医療における強い免疫抑制に伴ってEBV関連リンパ増殖性疾患を発症させことがある。EBV感染症に有効な抗ウイルス薬が存在しないため、これらのウイルス関連合併症によりがん治療や移植治療の継続が困難となる場合も多い。EBVはヒトにしか感染せず適当な動物実験系が存在しなかったため、in vivoでのEBV関連リンパ増殖性疾患の発症病理は不明な点が多い。本研究ではEBVが感染可能かつEBV関連リンパ増殖性疾患を発症する動物実験モデルを確立させる。さらに遺伝子ノックアウトウイルスを感染させ、各EBV 遺伝子がウイルス増殖およびリンパ増殖性疾患の発症にどのように貢献するか明らかにすることを目標とする。
前年度、重度免疫不全マウスと臍帯血由来単核球を用いた感染モデルマウス系を樹立し、同法がウイルス増殖過程やリンパ増殖症の発症病理解明に有用であることを示した。
本年度は前年度の条件検討に基づいて、大腸菌内相同組み換えの手法で作製した変異型EBVを感染させた。EBVゲノムに導入されているGFPの蛍光シグナルを蛍光顕微鏡下で検出し、EBV感染細胞が腹腔内で増殖していることを確認できた。また、各臓器に浸潤した感染細胞をin situ hybridization法や免疫染色にて可視化し、EBER陽性B細胞が腫瘍性に浸潤していることがわかった。さらに各摘出臓器をホモジナイズし、臓器内のウイルスDNA量をリアルタイムPCR法にて定量化した。
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