| 研究実績の概要 |
本研究は、骨格筋幹細胞の未分化維持機構における分子機序の解明及び新規培養法の確立を目指し、マウス及びヒト骨格筋組織及びフローサイトメーターにより分離した骨格筋幹細胞を用いた研究を遂行している。平成２８年度は、骨格筋幹細胞に発現が確認されている細胞膜貫通タンパク質であるTeneurin-4（Ishii et al., 2015, Stem Cells）と基底膜との相互作用の解析を目標とした。基底膜の構成タンパク質は、ラミニン、コラーゲン、パールカン、ニドゲンであるが、これらのうち細胞との相互作用に寄与しているのは、前者の3種類（ラミニン、コラーゲン、パールカン）である。まず、骨格筋幹細胞の細胞外マトッリクスを構成するタンパク質を解析するために、マウス及びヒト骨格筋組織を組織免疫化学染色により解析した。組織免疫化学染色の結果から、ラミニンのアイソフォームであるラミニンα３、α４、α５が骨格筋幹細胞の細胞外マトリックスを構成するタンパク質であることを同定をした。さらに、これらの結果を元にして生体内での環境を、リコンビナントに精製されたタンパク質（ラミニンE8フラグメント）を用いてin vitroにて再現することにより、骨格筋幹細胞の未分化性を維持させたままの培養を可能にした。さらに、ラミニンE8フラグメントを用いて培養した骨格筋幹細胞は、移植時に筋繊維へと分化する効率が高く、移植効率の改善が見られた。以上の研究は、骨格筋幹細胞の分子メカニズムの解析など基礎的研究に用いられるだけでなく、再生医療に向けた細胞移植治療にも用いられることが期待される。
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