単一細胞の網羅的遺伝子発現プロファイルの統合解析による乳がん組織不均一性の解明

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16J40231
• 研究機関: 国立研究開発法人国立がん研究センター
• 研究代表者: 富永 香菜 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 特別研究員(RPD)
• 研究期間 (年度): 2016-04-22 – 2019-03-31
• キーワード: 乳がん / がん幹細胞 / セマフォリン / １細胞解析

研究実績の概要

我が国において乳がんは女性で最も罹患数が高いがんであり、今後も患者数や死亡者数の増加が懸念されている。近年の研究により、正常幹細胞と同様に自己複製し、非対称性分裂により分化する特徴を持つ、がん幹細胞とよばれる少数の細胞集団が、腫瘍の発生や転移、再発の原因であると考えられている。本研究では、がん幹細胞を腫瘍細胞のヒエラルキーの頂点としたがん組織の多様性・可塑性の実態の解明を目的とする。具体的には、すでに収集済みの乳がん臨床検体2例（トリプルネガティブタイプ）について、我々が発見した新規乳がん幹細胞様細胞マーカーであるNeuropilin1 (NP1)が陽性の分画(乳がん幹細胞濃縮群)と陰性分画(コントロール群) をFlow cytometryにて各々分取し、Fluidigm　C１ single cell-prep systemにより単一細胞を回収した。回収した細胞より抽出したRNAからタグ付けした断片化cDNAライブラリーを作製し、次世代シーケンサーで解析した。結果、NP1陽性と陰性で分散が異なる遺伝子群についてNP1陽性群のほうに従来のがん幹細胞に関わる遺伝子群と神経軸索伸長に関与する遺伝子群が非常に濃縮することが明らかになった。NP1陽性細胞群の中から高発現している遺伝子を数個選び、qPCRを用いて発現を確認することにより、がん幹細胞の維持に関与すると予測される新規の分子標的候補を同定した。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Semaphorin signaling via MICAL3 induces symmetric cell division to expand breast cancer stem-like cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Tominaga K, Minato H, Murayama T, Sasahara A, Nishimura T, Kiyokawa E, Kanauchi H, Shimizu S, Sato A, Nishioka K, Tsuji E, Yano M, Ogawa T, Ishii H, Mori M, Akashi K, Okamoto K, Tanabe M, Tada K, Tojo A, Gotoh N
  • 雑誌名: Proceedings of the National Academy of Sciences USA 巻: 116(2) ページ: 625-630
  • DOI: 10.1073/pnas.1806851116
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Signaling Factors Involved in Self-Renewal of Breast Cancer Stem-like Cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Kana Tominaga
  • 雑誌名: Cancer Studies 巻: 2(1) ページ: 1-11
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Semaphorin Signaling via MICAL3 Induces Symmetric Cell Division to Expand Breast Cancer Stem-Like Cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Tominaga K and Gotoh N
  • 学会等名: Gordon Research Seminar・Stem Cells and Cancer
  • 国際学会