研究課題/領域番号 |
16K01346
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研究機関 | 名古屋大学 |
研究代表者 |
前田 英次郎 名古屋大学, 工学研究科, 助教 (20581614)
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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キーワード | 細胞内張力 / 炎症反応 / 細胞外基質 / 剛性 / 機能的適応 |
研究実績の概要 |
本研究課題は腱炎進行のメカニズムの一端を明らかにすることを目的とし,細胞内張力や細胞膜流動性といった腱細胞自らが有する力学的な特性が炎症性サイトカイン刺激によってどのように変化するかを調べ、細胞の炎症反応が進行する機序を検討するものである.2016年度は予備実験で得られた結果の再現性を確認するため,マイクロピラーデバイス上で培養したウサギアキレス腱由来腱細胞に炎症性サイトカインIL-1beta刺激を与え,細胞形態の変化を調べる実験を行った.腱細胞はIL-1beta刺激が加わると,細胞形状が紡錘系から放射状に細く伸展した形状に変化した.その変化は剛性の低いマイクロピラー上では,より低い濃度のIL-1beta刺激で現れることが確認されたことから,予備実験のデータを再現することができた.このことは,細胞外環境の剛性が低いことで惹起される細胞内張力が低い状態では,過去に示されたように細胞異化作用が亢進するだけでなく,炎症性サイトカインに対する応答性も増進されることがわかった.また,in situ hybridization法を用いたMMP-1遺伝子発現解析を行うための最適化実験を行った.しかしながら,研究を遂行する代表者が2016年11月に所属を異動したため,今年度計画していた残りの研究実験をスムーズに行うことが困難であった.したがって,次年度以降に計画をしていた光硬化性PDMSを使用するためのUV光LEDを用いた照射装置を作製した.次年度は初年度に計画していたFRAP法を用いた細胞膜流動性の解析や,遺伝子発現解析を中心に進めることにしている.
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
2016年度中に異動があったので,研究計画を調整して進めている.
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今後の研究の推進方策 |
2017年度は初年度に計画していた,マイクロピラー上に培養した腱細胞にIL-1beta刺激を加えた際の遺伝子発現解析や細胞膜流動性の変化を調べることから始め,IL-1受容体のリン酸化度や細胞膜流動性の人為的な操作を用いた実験まで行うことを目標に研究を進める.得られた成果は積極的に学会で発表し,成果を広くアピールする予定である.
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次年度使用額が生じた理由 |
異動があったため,当初計画していた学会出張を取りやめたので次年度使用額が発生した.
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次年度使用額の使用計画 |
次年度交付金額と合算し,主に実験に関わる消耗品の購入や旅費などに使用する予定である.
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