| 研究課題/領域番号 |
16K04890
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| 研究機関 | 福井県立大学 |
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研究代表者 |
平 修 福井県立大学, 生物資源学部, 准教授 (30416672)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | Nano-PALDI / 体内動態 / 生体異物 |
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| 研究実績の概要 |
マウスの皮膚に2-OAmを塗布後、肝臓のNano-PALDIイメージングMSを行った。長期塗布群と、単回塗布群のマウス肝臓を採取後、凍結切片を作製し、画像解像度20um、ポジティブモードでMSIを行った。イオン化法は低分子測定に適したNano-PALDI法を採用した。
長期塗布群の肝臓に2-OAmが蓄積していることが視覚的に分かった。また、単回塗布群では、皮膚に塗布してから6時間後に肝臓に2-OAmが確認され、24時間後にはほぼwash outしていることがわかった。次に、2-OAmを皮膚に長期間塗布したマウスの肝臓を用いて、2-OAmの蓄積部位を検討した。その結果、肝細胞に加えて、胆管にも2-OAmの蓄積がある事がわかった。この事から、2-OAmの胆管への異常蓄積がミトコンドリア抗体の出現と胆管の選択的破壊の双方に関与している可能性が示された。普段、使用する化粧品などの含有物質であり基礎科学・実学共に重要な知見である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
当初、実験条件を決定するのが困難と思われた、生体異物（2-オクチン酸）がnano-PALDI法のより検出ができたことで当初よりも時間的な余裕ができた。その為、動物実験もスムーズに運び、肝臓の何処（胆管付近）というこまで視覚的に解明できた。ここまでを論文発表できた。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、再現をとり、疾病の機序解明を行う。マウスサンプル切片をCD8染色し、炎症の有無、その局在を調べる。
予備的知見として、2-OAを長期塗布したマウス肝臓の胆管は炎症（CD8(+)）を起こしており、HE染色像では、胆管自体がつぶれて観察できない。
→2-OAの局在が肝臓内の血管、胆管で一致するか、イメージングMSを用いて明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
動物実験が当初の計画よりも進み、データも取得でき、論文発表まで行った。
その為、当初使用匹数よりも少なく済んだため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度の疾病機序解明の研究に動物実験のn数を増やすことに使用する。
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