| 研究課題/領域番号 |
16K07055
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
小西 博之 名古屋大学, 医学系研究科, 助教 (90448746)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | ミクログリア / 神経損傷 / 神経炎症 |
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| 研究実績の概要 |
神経損傷後のミクログリア活性化には、神経損傷を感知するミクログリアの膜上受容体が重要な役割を担うと考えられる。本研究では、ミクログリア活性化を制御する分子として、ミクログリア特異的に発現する1回膜貫通型タンパクDAP12に着目した。
既知のDAP12共役受容体のうち、前年度に機能解析したTREM2以外にSiglec-Hもミクログリアに発現することをすでに見出していた。そこで、神経損傷後のミクログリア活性化におけるSiglec-Hの機能を、Siglec-Hノックダウンマウスを用い解析した。マウスL4脊髄神経の切断により神経因性疼痛モデルを作成し、von Freyテストにより後肢の疼痛試験を行った結果、Siglec-Hノックダウンマウスでは疼痛が増悪することを見出した。さらに脊髄後角における分子発現を解析した結果、Siglec-Hノックダウンマウスでは野生型マウスに比べ、神経損傷後の炎症性サイトカインの発現上昇が顕著であることが判明した。これらの結果から、Siglec-H/DAP12複合体を介するシグナルはミクログリアの炎症性反応を抑制することが示唆された。
脳内におけるSiglec-Hの発現特異性についても研究を進めた。Siglec-Hは胎生期を含めミクログリアに発現するが、汎用されるミクログリアマーカーIba1やCD11bとは異なり、脳内マクロファージや浸潤性単球には発現しないことを示した。さらに、Iba1やCD11bとは異なり、末梢神経系に存在するマクロファージにも発現しないことから、神経系において非常に特異性の高いミクログリアマーカーであることが明らかとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
ミクログリアでは既知のDAP12共役受容体のうちTREM2とSiglec-Hが発現する。TREM2とSiglec-Hのミクログリア活性化における機能を神経因性疼痛（アロディニア）モデルを用い示した。DAP12はTREM2と複合体を形成した時にはミクログリアの活性化を促進するのに対して、Siglec-Hと複合体を形成した時にはミクログリアの活性化を抑制することが明らかにし、それらの結果を論文発表した。
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| 今後の研究の推進方策 |
最近TREM2に関してはリガンドが他グループから報告され、TREM2/DAP12複合体がAkt－mTORシグナル経路を介してミクログリアを活性化することが示された。しかし、Siglec-Hに関しては現在のところリガンドが不明であり、分子メカニズムはほぼ解析されていない。そこで、生化学的手法などを用いリガンド探索を行う。さらに、同定されたリガンドがどのようにミクログリアを沈静化するのか、Siglec-H/DAP12複合体の下流で働く細胞内シグナルを明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
非常に順調に研究を遂行することができ、実験の条件検討や人件費にあまり費用がかからなかったため。次年度はリガンドのスクリーニングやその機能解析に多くの消耗品が必要となるため、その購入に充てる予定である。
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