| 研究課題/領域番号 |
16K07101
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| 研究機関 | 久留米大学 |
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研究代表者 |
松井 孝憲 久留米大学, 医学部, 講師 (10425233)
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| 研究分担者 |
東元 祐一郎 久留米大学, 医学部, 教授 (40352124)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | PEDFペプチド |
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| 研究実績の概要 |
全長のPEDFを3分割し, Hisタグを付加した組み換えフラグメントの発現プラスミドを作製し、大腸菌にて発現・精製をおこなった。各フラグメント存在下で腎メサンギウム細胞をAGEで刺激した際の酸化ストレスレベル(細胞内活性酸素種)をROS検出試薬(Carboxy-H2DFFDA)により測定し, MCP-1,VCAM-1, PAI-1遺伝子の発現をreal-time PCR法により定量した。得られたフラグメントをさらに分割したペプチドを作製したところ、ROS産生、遺伝子発現について効果が確認できなかった。そこで、合成したペプチドの溶解条件と修飾方法について現在検討をおこなっている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
全長PEDFから7-15残基程度のペプチドに絞り込むところを、得られたペプチドに全長PEDFの作用を有するものが得られなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
ペプチドについて溶解条件と修飾方法の変更をおこない、in vitroにおける効果の確認実験に移行する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
今年度の研究内容である、ペプチドを用いたin vitroアッセイにおいて、有効なペプチドが得られなかったため、予定していたin vitroアッセイを全ておこなう必要がなくなったため、一部の試薬等を購入しなかったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
新しく作製したペプチドを用いてin vitroのアッセイをおこなう分として使用する。
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