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2018 年度 実績報告書

細胞間コミュニケーションにおけるコンタクトアクティベーション機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 16K07343
研究機関東京農工大学

研究代表者

斉藤 美佳子  東京農工大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (20291346)

研究期間 (年度) 2016-10-21 – 2019-03-31
キーワードコンタクトアクティベーション / Cx30.3 / マウスES細胞 / 細胞間コミュニケーション
研究実績の概要

ギャップジャンクション構成タンパク質であるコネキシン群の網羅的解析の過程で、マウスES細胞ではCx30.3が隣接する細胞の細胞間接触部位のみに速やかに発現することを発見した。本研究は、Cx30.3の遺伝子およびタンパク質レベルでの発現機構解析を目的として実施し、以下の点を明らかにした。

細胞接触応答解析:データベースを元にES細胞からプロモーター領域と予想されるゲノムDNAを抽出して解析した結果、プロモーター活性を有する部位を決定することができた。細胞接触によってCx30.3のプロモーターを活性化する細胞内シグナリングについて解析した結果、LIFシグナルの関与だけではなく、E-カドヘリン―β-カテニンシグナル伝達系が大きな役割を担っていることを明らかにした。また、Cx30.3の発現は、異種細胞であるHeLa細胞あるいはメラノーマ細胞と接触させた場合では、mRNAの発現増加は認められず、細胞接触応答に特異性があることがわかった。
Cx30.3タンパク質の細胞接触に伴う空間的発現解析:Cx30.3とEGFPの融合タンパク質発現ES細胞を用い、単一の細胞同士をマニピュレーターを用いて接触させたところ、接触部位から離れて発現していたCx30.3が、速やかに接触点に向かって移動することが確認された。接触後に細胞を離すと、Cx30.3は速やかに接触部位から遠ざかった。この応答はHeLa細胞との接触では観察されなかったことから、Cx30.3は同種の細胞接触を認識しているのではないかと考えられた。
Cx30.3の新機能解析:ES細胞にCx30.3を過剰に発現させた細胞の増殖能を解析したところ、野生型の細胞と比較して有意に細胞増殖活性が上昇することがわかった。このことから、Cx30.3は細胞周期にも関与する新たな機能の発見につながる結果が得られた。

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2019 2018 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Enhancement of connexin30.3 expression in mouse embryonic stem cells line EB3 in response to cell-cell contacts2019

    • 著者名/発表者名
      Naruwa Tokunaga, Ryota Kishi, Tomoko Sasai, Mikako Saito
    • 雑誌名

      Human Cell

      巻: 32 ページ: 95-102

    • DOI

      10.1007/s13577-018-00235-z

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Functional role of natural killer T cells in non-obese pre-diabetes model mice2018

    • 著者名/発表者名
      Mikako Saito, Misako Kaburagi, Keiko Otokuni, Genu Takahashi
    • 雑誌名

      Cytotechnology

      巻: 70 ページ: 423-430

    • DOI

      10.1007/s10616-017-0157-5

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Use of a right triangle chip and its engraved shape as a transferrable x-y coordinate system from light microscopy to electron microscopy2018

    • 著者名/発表者名
      Mikako Saito, Shoya Hiratoko, Ikuko Fukuba, Shin-ichi Tate, Hideaki Matsuoka
    • 雑誌名

      Electrochemistry

      巻: 86 ページ: 6-9

    • DOI

      10.5796/electrochemistry.17-00058

    • 査読あり
  • [学会発表] Cell-cell contact responsive activation of Cx30.3 in mouse embryonic stem cells2018

    • 著者名/発表者名
      Mikako Saito, Naruwa Tokunaga, Ryota Kishi, Shoya Hiratoko
    • 学会等名
      International Society for Stem Cell Research Annual Meeting 2018
    • 国際学会
  • [学会発表] Dynamic expression analysis of Cx30.3 in ES cell microenvironment2018

    • 著者名/発表者名
      徳永成和, 斉藤美佳子
    • 学会等名
      第70回日本細胞生物学会大会
  • [学会発表] Expression analysis of connexin gene family in mouse hepatic cells2018

    • 著者名/発表者名
      岸 亮太, 増井陽香, 斉藤美佳子
    • 学会等名
      第70回日本細胞生物学会大会
  • [学会発表] Effect of the overexpression of connexin isoforms on HeLa cell proliferation2018

    • 著者名/発表者名
      斎藤哉樹, 斉藤美佳子
    • 学会等名
      第70回日本細胞生物学会大会
  • [学会発表] Effects of microenvironment on the connexin expression behavior in mouse melanoma cells2018

    • 著者名/発表者名
      笹井智子, 斉藤美佳子
    • 学会等名
      第70回日本細胞生物学会大会
  • [備考] 東京農工大学工学部生命工学科斉藤研究室ホームページ

    • URL

      http://web.tuat.ac.jp/~msaito/

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公開日: 2019-12-27  

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