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2017 年度 実績報告書

活性酸素により生じた変異誘発物質の排除機構

研究課題

研究課題/領域番号 16K07453
研究機関福岡歯科大学

研究代表者

早川 浩  福岡歯科大学, 口腔歯学部, 教授 (70150422)

研究分担者 関口 睦夫  福岡歯科大学, 口腔歯学部, 客員教授 (00037342)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2018-03-31
キーワード活性酸素 / 突然変異 / 網羅的
研究実績の概要

ROSあるいは8-oxoGを生じさせないような新たな変異株の網羅的検索:大腸菌内で活性酸素(ROS)あるいは8-oxoGの生成に関わる遺伝子を網羅的に検索するため、ROSあるいは8-oxoG増加によるmutT欠損株の突然変異の上昇が、目的遺伝子の欠損によって抑制されると想定し、その表現型(突然変異)を指標にして変異株を検出する系を構築した。 網羅的欠損株ライブラリーであるKeio clone(3909 clones)を用い、全cloneのmutT geneを1つ1つ、P1 transductionによってCm^r geneに置き換えた二重変異株を作成した。それらの中から自然突然変異頻度がmutT遺伝子欠損導入によっても、なお低い株をリファンピシリン耐性を指標として網羅的に検索した。現在、全部で14個の変異株を分離できたが、そのうち10個はenergy metabolism に関与する遺伝子、残り4個は膜構造に関連する遺伝子におちた。 これら14個の遺伝子それぞれについて、現在個別に解析を進めている。

その他の研究成果:上記の他にROSにより酸化損傷を受けたRNAに対応する生体防御機構の解析で新たな進展が見られた。8-oxoGを含むRNAオリゴマーをプローブに用い、ヒト細胞抽出液から8-oxoGを特異的に認識し結合する新規のタンパクを同定した。このタンパクは8oxoGを含む1本鎖のRNAおよびDNAオリゴには結合するが、2本鎖DNAには結合しない。また、このタンパクを欠損する変異株は野生株に比べ低濃度の過酸化水素水に対し抵抗性を示した。このことから、このタンパクはアポトーシスを介して、酸化RNA特異的な防御を荷うことが考えられる。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (1件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Transcriptional mutagenesis mediated by 8-oxoG induces translational errors in mammalian cells2018

    • 著者名/発表者名
      Dai D-P, et al.
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci USA

      巻: Epub ahead of print ページ: xxx xxx

    • DOI

      10.1073/pnas.1718363115

    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] Human proteins that recognize oxidative RNA damage2017

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Hayakawa
    • 学会等名
      "Oxidative Stress & Disease" Gordon Research Conference
    • 国際学会
  • [学会発表] 酸化損傷を受けたRNA鎖に結合する新規因子の同定2017

    • 著者名/発表者名
      石井健士、井川達弘、関口猛、早川浩、関口睦夫
    • 学会等名
      日本分子生物学会年会

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公開日: 2018-12-17  

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