IgE非依存的なマスト細胞活性化機構

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K08231
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 田中 智之 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (40303846)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: マスト細胞 / Mrgpr / δ毒素 / GPR35 / AMPK

研究実績の概要

本研究の目的は、種々の生理活性物質、あるいは低分子化合物によるIgE非依存的なマスト細胞活性化のメカニズムを解明し、マスト細胞を標的とした新たな慢性炎症性疾患の治療薬開発のための基礎的知見を得ることである。平成28年度は以下の成果を得た。
１．Mrgprファミリー遺伝子の機能解析：GPCR shedding assayを利用してヒトMrgprX2の評価系を確立した。その他のヒトMrgpr遺伝子群をクローニングした。マウスの培養モデルを用いて、マスト細胞の成熟に伴いMrgprB1, B2, B10がそれぞれ誘導されることを見いだした。
２．黄色ブドウ球菌δ毒素による脱顆粒応答の解析：マウス骨髄由来培養マスト細胞を用いて、δ毒素による脱顆粒応答は、抗原抗体反応による応答を抑制する阻害剤（ホスホリパーゼC阻害剤U73122、Ca2+キレーターBAPTA-AM、Syk阻害剤piceatannol、PI3キナーゼ阻害剤LY294002）にいずれも抵抗性であることを見いだした。また、サイトゾルCa2+濃度の増大を誘導することを明らかにした。
３．GPR35アゴニストの探索および機能解析：いくつかのリガンド候補をスクリーニングしているが、既存のものより高親和性のものは見いだせていない。
４．AICARおよびレスベラトロールの作用機序の解析：AICARの前処理は、小胞体のCa2+-ATPase阻害剤であるタプシガージン、あるいは抗原刺激によるサイトゾルCa2+濃度の増大を抑制することが明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

計画していた実験を実施し、それぞれ成果を得ている。有望な化合物を得ていないGPR35アゴニストの探索は継続して実施する予定である。

今後の研究の推進方策

当初の計画の遅延、あるいは実験を進める上での想定外の問題はないため、引き続き現在の検討を継続する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] 1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene and its derivatives act as secretagogues on rodent mast cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Manabe, Y., Yoshimura, M., Sakamaki, K., Inoue, A., Kakinoki, A., Hokari, S., Sakanaka, M., Aoki, J., Miyachi, H., Furuta, K., Tanaka, S.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 巻: 47 ページ: 60-67
  • DOI: 10.1002/eji.201646536
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Vesicular polyamine transporter mediates vesicular storage and release of polyamine from mast cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi, T., Harada, Y., Moriyama, S., Furuta, K., Tanaka, S., Miyaji, T., Omote, H., Moriyama, Y., Hiasa, M.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1074/jbc.M116.756197
  • 査読あり
• [雑誌論文] Down-modulation of antigen-induced activation of mast cells sensitized with a highly cytokinergic clone. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sakanaka, M., Kurimune, Y., Yamada, K., Hyodo, Y., Natsuhara, M., Ichikawa, A., Furuta, K., Tanaka, S.
  • 雑誌名: Immunol. Lett. 巻: 174 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2016.04.003
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Critical role of endogenous histamine in promoting end-organ tissue injury in sepsis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hattori, M., Yamazaki, M., Ohashi, W., Tanaka, S., Hattori, K., Todoroki, K., Fujimori, T., Ohtsu, H., Matsuda, N., Hattori, Y.
  • 雑誌名: Int. Care Med. Exp. 巻: 4 ページ: 36
  • DOI: 10.1186/s40635-016-0109-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] IgE非依存的なマスト細胞活性化に対するデキサメタゾンの作用 (2016)
  • 著者名/発表者名: 田中智之、山田圭位子、佐藤仁美、鎌田真由美、奥野恭史、福石信之、古田和幸
  • 学会等名: 第20回日本ヒスタミン学会
  • 発表場所: 倉敷
  • 年月日: 2016-11-25 – 2016-11-25
• [学会発表] IgE-independent activation of mast cells: An experimental contact allergen, 1-fluoro-2,4-dinitorbenzene is a mast cell secretagogue. (2016)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Tanaka
  • 学会等名: XVIth Meeting of Polish Histamine Research Society
  • 発表場所: ウッチ（ポーランド）
  • 年月日: 2016-10-28 – 2016-10-28
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] マウスマスト細胞の成熟過程におけるデキサメタゾンの作用 (2016)
  • 著者名/発表者名: 田中智之、山田圭位子、佐藤仁美、鎌田真由美、奥野恭史、福石信之、古田和幸
  • 学会等名: 第89回日本生化学会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2016-09-26 – 2016-09-27
• [備考] 薬学部田中研究室：岡山大学
  • URL: http://www.pharm.okayama-u.ac.jp/lab/meneki/