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2017 年度 実施状況報告書

アルコール中毒症の改善作用を有する植物乳酸菌の分子機構解明

研究課題

研究課題/領域番号 16K08294
研究機関広島大学

研究代表者

野田 正文  広島大学, 医歯薬保健学研究科(薬), 特任准教授 (40457289)

研究分担者 杉山 政則  広島大学, 医歯薬保健学研究科(薬), 共同研究講座教授 (30106801)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード腸内細菌叢 / プロバイオティクス / アルコール / 乳酸菌
研究実績の概要

本年度は、アルコール摂取量を増減させて昨年度に決定した条件を基に、腸内細菌叢解析ならびにメタボローム解析を行うべく、動物実験を行った。今回は、SN13T株生菌体の摂取によるアルコール中毒症状の改善作用を十分に発揮させる為、アルコール摂取開始一週間前より本株の摂取を始めることとした。また昨年度の研究結果から、バイオマーカーとして各種サイトカインの増減が認められなかったため、血液生化学検査をアルコール中毒症状の指標として取り扱うこととした。
実験の結果、アルコール摂取によって有意に上昇していた血清ASTやALT, アミラーゼの値が、SN13T株生菌体の摂取によって抑制される事が確認された。飼育期間終了後に各群のマウスより回収した小腸、盲腸、および大腸内容物に含まれる細菌叢の解析結果から、アルコールの摂取によって特異的に増減する細菌群の存在と、それらのうちSN13T株生菌体の摂取によってその変化の一部が抑制されることが確認された。とりわけ小腸における細菌叢の変化は顕著であり、盲腸および大腸の変化は小腸と比べると少なくはあったが、複数の分類群の変化が観察された。全ての部位に共通する変化として、Akkermancia属の変化が注目すべき点であった (アルコール摂取群で著しく減少、但しSN13T株生菌体を摂取させることでほぼ回復)。
また、メタボローム解析について、盲腸内容物を対象として実験を行った結果、アルコールの摂取により特異的に増減する化合物の存在が認められた。具体的には、腐敗アミンや特定の有機酸の量が増加する一方で、解糖系や核酸、胆汁酸やコレステロール代謝に関係する化合物の減少が観察された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

腸内細菌叢解析により、アルコールの摂取時に特異的に増減するものの、SN13T株の生菌体を摂取させることでその傾向が抑制される細菌分類群について、消化管のレベル毎に明らかにすることが出来た。また、メタボローム解析によって、盲腸内で細菌叢の変化と共に、内容物にどのような変化が生じているのか、明らかにすることが出来た。
これら2つの項目は本年度の実験計画の軸として掲げていた部分であり、現在この部分までの研究成果を取りまとめ、学術論文を執筆中である。

今後の研究の推進方策

細菌叢解析の結果から、複数にわたる分類群の増減が認められ、また種レベルでの同定には至らなかった為、現段階でマウス腸内から特定の細菌をピックアップし、特徴解析を行うという計画に進むのは困難と考えた。
また、メタボローム解析の結果、タンパク質の分解に伴って生じる腐敗アミンや、粘膜組織に対する腐食性を示すその他のアミン類が検出されていることからも、腸内における腐敗や、腸管組織に対する障害が生じている可能性が考えられている。
そこで、本年度は腸管上皮細胞およびマウス腸管内容物を用いたアッセイ系により、腸管バリア機能に対する障害改善作用を含め、in vitroの系で詳細なメカニズム解明を目的として実験を進める。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (9件)

  • [雑誌論文] Expression of Genes Involved in Bacteriocin Production and Self-Resistance in Lactobacillus brevis 174A Is Mediated by Two Regulatory Proteins.2018

    • 著者名/発表者名
      Noda M, Miyauchi R, Danshiitsoodol N, Matoba Y, Kumagai T, Sugiyama M.
    • 雑誌名

      Appl. Environ. Microbiol.

      巻: 84 ページ: e02707-17

    • DOI

      10.1128/AEM.02707-17

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characterization of the SN35N Strain-Specific Exopolysaccharide Encoded in the Whole Circular Genome of a Plant-Derived Lactobacillus plantarum.2018

    • 著者名/発表者名
      Noda M, Shiraga M, Kumagai T, Danshiitsoodol N, Sugiyama M.
    • 雑誌名

      Biol. Pharm. Bull.

      巻: 41 ページ: 536-545

    • DOI

      10.1248/bpb.b17-00840

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A novel structure of exopolysaccharide produced by a plant-derived lactic acid bacterium Lactobacillus paracasei IJH-SONE68.2018

    • 著者名/発表者名
      Noda M, Sugimoto S, Hayashi I, Danshiitsoodol N, Fukamachi M, Sugiyama M.
    • 雑誌名

      J. Biochem.

      巻: in press ページ: in press

    • 査読あり
  • [学会発表] 植物乳酸菌Lactobacillus reuteri BM53-1の産生するバイオフィルム形成阻害物質の作用機構2018

    • 著者名/発表者名
      杉原奈穂, 野田正文, Narandalai Danshiitsoodol, 野口詩乃, 東川史子, 林幾江, 杉山政則
    • 学会等名
      第56回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会 中国四国支部学術大会
  • [学会発表] :アルコールに対する植物乳酸菌SN13T株の保健機能性―アルコールによる肝機能傷害と腸内細菌叢の改善―,2018

    • 著者名/発表者名
      野田正文, 丸山昌史, Narandalai Danshiitoodol, 東川史子, 杉山政則
    • 学会等名
      日本薬学会第138年会
  • [学会発表] Pediococcus pentosaceus LP28のゲノム配列特異性と菌体外多糖の特徴2017

    • 著者名/発表者名
      熊谷孝則, 安武哲也, 野田正文, 杉山政則
    • 学会等名
      日本乳酸菌学会2017年度大会
  • [学会発表] Isolation and characterization of the lactic acid bacteria from natural sources to screen high ornithine-producing strains2017

    • 著者名/発表者名
      Md Rakhimuzzaman, 野田正文, Narandalai Danshiitsoodol, 東川史子, 杉山政則
    • 学会等名
      日本乳酸菌学会2017年度大会
  • [学会発表] 飲酒に及ぼす植物乳酸菌の保健機能性2017

    • 著者名/発表者名
      丸山昌史, 野田正文, Narandalai Danshiitsoodol, 東川史子, 杉山政則
    • 学会等名
      日本乳酸菌学会2017年度大会
  • [学会発表] 病原細菌の毒素産生能を阻害するLactobacillus reuteri BM53-1由来物質の特性2017

    • 著者名/発表者名
      Narandalai Danshiitsoodol, 野田正文, 東川史子, 杉山政則
    • 学会等名
      日本乳酸菌学会2017年度大会
  • [学会発表] 果実より新しく分離した植物由来乳酸菌Lactobacillus paracaseiの特性2017

    • 著者名/発表者名
      野田正文, Narandalai Danshiitsoodol, 山野幸子, 東川史子, 林幾江, 深町光宏, 杉山政則
    • 学会等名
      日本乳酸菌学会2017年度大会,
  • [学会発表] 肝機能傷害を改善する植物乳酸菌SN13T株の機能解析―アルコール中毒症状と腸内細 菌叢の改善―2017

    • 著者名/発表者名
      野田正文, 丸山昌史, Narandalai Danshiitsoodol, 東川史子, 杉山政則
    • 学会等名
      第56回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会 中国四国支部学術大会
  • [学会発表] Quorum sensing機構を阻害する物質のスクリーニングシステムの構築とその応用2017

    • 著者名/発表者名
      野口詩乃, 野田正文, Narandalai Danshiitsoodol, 杉原奈穂, 東川史子, 杉山政則
    • 学会等名
      第56回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会 中国四国支部学術大会

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公開日: 2018-12-17  

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