| 研究課題/領域番号 |
16K08482
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
中西 慶子 東京大学, 定量生命科学研究所, 助教 (30415252)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 細胞分化 / 小胞体ストレス / 筋発生 / 小胞体膜動態 / カルシウム |
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| 研究実績の概要 |
筋前駆細胞である筋芽細胞が筋蛋白質を発現する筋管細胞に分化する筋最終分化過程（以降筋分化と呼ぶ）において、一過的に小胞体ストレス応答が生じ、これが筋分化過程において重要な役割を果たしていることを私たちは以前報告した。更に分化過程に組込まれた生理的小胞体ストレスの発生源が小胞体内カルシウム枯渇であることを突き止め、小胞体内カルシウム枯渇をイメージングによって可視化することにより直接的に証明した。本研究課題では筋分化に伴う生理的な小胞体ストレスの原因である小胞体内カルシウム枯渇がどのように引き起こされるのか、その誘導機構を明らかにすることを目的として、筋分化過程を異なるステップで阻害したサンプルに対する遺伝子発現解析を行い、小胞体内カルシウム枯渇が生じる上流での変化を抽出することに取り組んでいる。その結果、小胞体内カルシウム枯渇を抑制した状態においても、小胞体膜成分に重要な分子の合成に関わる特定の遺伝子群について、発現上昇が生じることがわかってきた。これらの遺伝子群の発現が及ぼす小胞体の変化（増大や膜組成の変化等）によって、小胞体内カルシウム枯渇とそれに続く小胞体ストレスが引き起こされている可能性が考えられることから、これらの遺伝子群の発現を制御している転写因子をクローニングし、その活性化体を筋芽細胞に導入し、この時の小胞体膜の変化及び小胞体内カルシウム枯渇が生じるかどうかについて、現在検討を行っている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
今年度初頭は研究室の移転作業に伴う研究室の立ち上げ作業（セットアップ）、またその半年後には私自身の外部研究機関への出向に伴う移転作業のため、継続して研究を行える環境になかった。このような理由から、今年度は研究費の使用も30万円に満たず、ほとんどを次年度に繰り越している。
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| 今後の研究の推進方策 |
候補の経路が絞られたことから、引き続き関連遺伝子のクローニングを行い、筋芽細胞に強制発現させることで小胞体内カルシウムの変化が生じるかどうかを検討する。また、内在性のタンパク質の発現変化の確認及び、ノックダウン時の小胞体内カルシウム枯渇や筋分化への影響の検討を行っていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
今年度初頭は研究室の移転作業に伴う研究室の立ち上げ作業（セットアップ）、またその半年後には私自身の外部研究機関への出向に伴う移転作業のため、継続して研究を行える環境になかった。このような理由から、今年度は研究費の使用も30万円に満たず、ほとんどを次年度に繰り越している。次年度使用額については、研究の進捗とともに必要になる抗体や試薬類の購入に充てる。
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