急性心筋梗塞における内皮Toll様受容体を介した冠微小循環傷害の分子機序の解明

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K08668
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 倉田 美恵 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 講師 (80423440)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 急性心筋梗塞 / 好中球 / NETs / Toll様受容体

研究実績の概要

好中球は自らの核酸と細胞内タンパクの複合体を放出することで外来病原体を捕獲する機序：neutrophil extracellular traps (NETs)を持つ。NETs は強い細胞毒性を有しており敗血症時の血管内皮細胞傷害の一因とされている。急性心筋梗塞においてもNETs が放出され、内皮傷害に関与している可能性がある。これらの傷害が細胞傷害性物質を認識するToll 様受容体（TLR）を介している可能性に着目しコムギ無細胞胚芽系を用いて病態を明らかにすることを目指した。
今年度は複数のTLRをコムギ無細胞胚芽系にて作成し、それらが既知のリガンドと会合することを証明した。さらに培養細胞を用いてNETs作成に成功、それらの染色性は剖検心における心筋梗塞巣と同様の染色性であることが証明できた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

初年度に複数のTLRとその結合タンパクを作成することを目標とし、かつ既知のリガンドに反応することを証明することを目標としていたが、それらは達成できた。さらにNETsを人為的に作成することができたことから、おおむね順調に進展していると考える。

今後の研究の推進方策

今後は作成したNETsをTLRに負荷しアルファ法を用いてその結合性を検出する。次に結合物質が何であるかを質量分析を用いて明らかにする。ここで明らかにしたリガンドが実際心筋梗塞巣において確認できるか剖検心を用いて証明する。

研究成果

• [雑誌論文] Proteomics-based analysis of lung injury-induced proteins in a mouse model of common bile duct ligation. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sakaue T, Shikata F, Utsunomiya K, Fukae S, Kurata M, Nakaoka H, Okazaki M, Kawanishi Y, Kojima A, Higashiyama S, Izutani H.
  • 雑誌名: Surgery 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1016/j.surg.2016.12.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Plasma thrombin-cleaved osteopontin as a potential biomarker of acute atherothrombotic ischemic stroke. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ozaki S, Kurata M, Kumon Y, Matsumoto S, Tagawa M, Watanabe H, Ohue S, Higaki J, Ohnishi T
  • 雑誌名: Hypertens Res. 巻: 40 ページ: 61-66
  • DOI: 10.1038/hr.2016.110.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Histological assessment of the efficacy of drug-eluting beads in portal tumor thrombosis of hepatocellular carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Hirooka M, Koizumi Y, Nakamura Y, Watanabe T, Yoshida O, Tokumoto Y, Takeshita E, Abe M, Tanaka H, Kurata M, Kitazawa S, Hiasa Y.
  • 雑誌名: Radiol Case Rep. 巻: 12 ページ: 179-184
  • DOI: 10.1016/j.radcr.2016.11.006. eCollection 2017 Mar.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Nod2-Nodosome in a Cell-Free System: Implications in Pathogenesis and Drug Discovery for Blau Syndrome and Early-Onset Sarcoidosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki T, Kaneko N, Ito Y, Takeda H, Sawasaki T, Heike T, Migita K, Agematsu K, Kawakami A, Morikawa S, Mokuda S, Kurata M, Masumoto J.
  • 雑誌名: ScientificWorldJournal. 巻: 2016 ページ: 2597376-2597385
  • DOI: 10.1155/2016/2597376.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Osteopontin deficiency reduces kidney damage from hypercholesterolemia in Apolipoprotein E-deficient mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Pei Z, Okura T, Nagao T, Enomoto D, Kukida M, Tanino A, Miyoshi K, Kurata M, Higaki J.
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 6 ページ: 28882-28894
  • DOI: 10.1038/srep28882
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 急性心筋梗心におけるNeutrophil Extracellular TrapsとASCの分布 (2017)
  • 著者名/発表者名: 南渕杜萌, 井坂 光佑，森川紳之祐, 金子直恵, 伊藤有紀, 中野直子, 倉田美恵, 増本純也
  • 学会等名: 日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2017-04-27 – 2017-04-29
• [学会発表] THE PATHOLOGICAL DISTRIBUTION OF NEUTROPHIL EXTRACELLULAR TRAPS CORRELATE WITH IMPAIRED MYOCARDIAL REPERFUSION IN PATIENTS WITH ST ELEVATED MYOCARDIAL INFARCTION (2017)
  • 著者名/発表者名: Mie Kurata, Tomo Nabuchi, Kosuke Isaka, Anouschka Auter, Heleen M.M. van Beusekom, Yuki Ito, Takahiro Yamamoto, Naoko Nakano, Takahiro Yamamoto and Junya Masumoto
  • 学会等名: 18th International Vasculitis and ANCA Workshop
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2017-03-25 – 2017-03-28
  • 国際学会
• [学会発表] The Pathological Distribution of Neutrophil Extracellular Traps in Patients with ST Elevated Myocardial Infarction by Autopsy Hearts (2017)
  • 著者名/発表者名: Mie Kurata, Tomo Nabuchi
  • 学会等名: 日本循環器学会総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2017-03-17 – 2017-03-19