| 研究課題/領域番号 |
16K08707
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| 研究機関 | 富山大学 |
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研究代表者 |
井村 穣二 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 教授 (80316554)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 膵癌 / IL-32 / 浸潤 |
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| 研究実績の概要 |
悪性腫瘍の中でも膵癌は他臓器と比較しても、浸潤転移が高頻度であり、その結果、予後が不良で生物学的にも悪性度の高い腫瘍の筆頭でもある。特に高い浸潤能は、膵癌のもう一方の特徴と一つである高度の線維化を伴った間質内でも、容易に浸潤することを反映しているものである。ではこれらの高い浸潤性を成業している機構はどの様なものあるのか、また、それらを構成している因子はどの様なものであるのか、現在までの所、明確化されていない。
本研究ではまず、各種の膵癌細胞株より高浸潤性の細胞を樹立し、それらの細胞において高発現している因子を同定することである 。次に、同定された因子について、直接的あるいは間接的に浸潤を規定しているのか検討することである。
以上の背景と目的を踏まえ、まず、高浸潤性細胞株を樹立することができ、さらにそれらの細胞において発現が亢進しているものを選択、その中でもInterleukin-32：IL-32が有意に亢進していることを確認した。このIL-32がどの様に膵癌の浸潤機構に関わるかを検討するのが本研究の趣旨である。特に、細胞増殖、遊走能などの関連性、発現の制御により浸潤性に変化をもたらすか、これらの点を当初の検討課題とする。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
膵癌における浸潤を規定している因子を同定する目的で高浸潤性膵癌株を樹立した。これらの細胞において高発現している諸因子を同定することができ、その中でもInterleukin-32:IL-32が高発現していることを見出した。高浸潤性細胞株に対し、IL-32に対するsiRNAとexon3領域を選択的にNock outした抑制実験では有意にその浸潤性が減少していた。さらにIL-32の高発現Vectorを導入した細胞では浸潤性の亢進を認めた。一方、抑制系ならびに高発現系では、種々の分子の亢進を認め、細胞形態も変貌していた。特に細胞接着性を制御する分子の亢進を認め、細胞相互の接着性の減弱等も認められた。
一方、浸潤した単一細胞から培養を進めることで、数種類の異なるサブクローンを樹立した。これらの細胞は浸潤能、接着のならびに細胞形態を異としており、発現する分子も異なっていた。特に細胞接着関連分子の発現の相違が認められた。また、浸潤能ならびに細胞増殖能にも同様の変化を認めた。
以上の結果より、IL-32は膵癌の浸潤能と何らかの因果関係を有していることが考えられてた。今後は、IL-32のPromoter活性の同定と下流域で制御を受けている因子の同定を試みる予定である。また、サブクローン化した細胞における発現解析を進めている。
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| 今後の研究の推進方策 |
IL-32のプロモーター解析を行うと共に、in vivoの条件下を想定し、ヌードマウスへの同所移植を試み、IL-32高発現株での浸潤・転移能の検索と共に、サブクローン化した細胞における動態を観察する予定である。
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