研究課題
ヒト癌細胞では好気的環境下でも解糖系が有意の働くグルコース代謝のシフト)（Warburg効果）が生じており。環境ストレス下での癌細胞の生存や悪性化進行に密接に関係していると考えられている。PDK4は解糖系から呼吸系への分岐点でピルビン酸をアセチルCoAに代謝するPDHを抑制する調節分子であり解糖と呼吸のバランスを制御するRegulatorの１つである。我々はPDK4阻害活性を持つ低分子化合物(KIS)に着目し、in vitro及びin vivoの腫瘍モデルを用いてその抗腫瘍効果と作用メカニズムをヒト膵臓癌および大腸癌細胞株を中心に解析し下記の成果を得た。1.KIS37(Cryptotanshinone)は膵臓癌細胞株MIAPaCa-2, Panc-1, 及び大腸癌細胞株に対して1-10μMの底濃度でPDHのリン酸化を抑制し、mutant K-Ras蛋白の発現を抑制することで足場非依存性増殖や３次元スフェロイド形成を抑制することを明らかにした。2.このとき、膵臓癌細胞株MIAPaCa-2ではK-Rasの下流では非接着培養条件下でPI3K-Akt-mTORのリン酸化が抑えられ、細胞周期のG1-S移行に関わるcyclin D1の発現とRb蛋白のリン酸化もKIS37によって抑えられることを明らかにした。3.MIAPaCa-2細胞株についてはヌードマウスを用いて膵臓に癌細胞を接種し同所性に膵臓腫瘍を形成させる実験系で、KIS37の腹腔内投与によって膵臓腫瘍の増殖が有意に抑制されることを見いだした。このとき腫瘍組織では増殖の指標であるKi67と幹細胞マーカーであるALDH1A1の発現も抑制されていた。また、肝臓、腎臓、肺、心臓などの腫瘍臓器をはじめ副作用などは見いだされなかった。
2: おおむね順調に進展している
解糖系と呼吸系の分岐点で働くピルビン酸代謝調節分子PDK4の新規阻害剤（Cryptotanshinone)の処理によって膵臓癌や大腸癌細胞株の足場非依存性増殖や3次元スフェロイド形成が抑制されるメカニズムとして変異型K-Ras蛋白質の発現抑制が関わっていることを明らかにした。また、この癌遺伝子産物の下流でPI3K-Akt-mTORのシグナルが抑えられ細胞周期制御に関わるcyclin D1の発現とRB蛋白のリン酸化も抑制されることを明らかにした。また。細胞レベルだけでなくin vivo 同所性膵臓腫瘍形成実験でもこの薬剤が膵臓腫瘍の増殖を抑制できることを明らかにした。また、そのメカニズムとして増殖のみならず幹細胞性の抑制も関わっていることも見いだした。これらの成果から２年を終えて研究が目標に向かって順調に進展していると考えられる。
今後の予定としては、まずこのPDK4阻害剤によって癌細胞の代謝がどのように変化しているのかをさらに詳細に明らかにしてゆく。また、この薬剤による癌蛋白K-Rasの発現抑制のメカニズムについてもさらに検証してゆく。MIAPaCa-2細胞株についてはヌードマウスを用いた同所性膵臓腫瘍形成実験系で、KIS37の腹腔内投与によって膵臓腫瘍の増殖が有意に抑制されることを見いだした。この腫瘍モデル系を用いてさらに投与量を減らして生体に負担の少ない投与条件を確立してゆきたい。また、作用点の異なる他の抗癌剤と併用で相乗的な増強効果や毒性の軽減が可能かどうかについても検討してゆきたい。
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