EBV感染が誘導するエピゲノム改変・維持に関わる因子の同定とその機能解析

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K08729
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 松坂 恵介 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (40610150)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: エピジェネティクス / DNAメチル化 / ウイルス / 胃癌

研究実績の概要

本研究は胃癌を対象にEpstein-Barrウイルス(EBV)感染が誘導するゲノムワイドなエピゲノム改変に関わる因子の同定と、EBV感染脱落系を用いたエピゲノム維持機構の解明を目的としている。先行研究により、EBVの潜伏感染を伴う胃癌(EBV陽性胃癌)がゲノムワイドにDNAメチル化の亢進した超高DNAメチル化形質を示し、さらにEBV感染により宿主細胞に新規DNAメチル化が誘導されEBV感染そのものが超高DNAメチル化形質の原因であること証明してきた。胃癌細胞株MKN7と正常胃粘膜上皮由来細胞株GES1において感染早期における新規DNAメチル化形質誘導パターンを経時的に解析した結果、宿主細胞のDNAメチル化誘導に先駆けてウイルスゲノムDNAにメチル化が誘導されることを見いだし、現在論文投稿中である。さらに新規にDNAメチル化が誘導される時相におけるウイルスと宿主細胞両者の遺伝子発現を包括的に解析中であり、DNAメチル化誘導候補因子に対するshRNAの構築を計画中である。一方、変異型EBNA1を用いた実験系によりEBV脱落細胞の作製を遂行中であり、脱落後の細胞に脱メチル化剤やDNMTのknockdown、TETの強制発現系などを作用させることで、EBV感染がDNAメチル化の維持に果たす役割を解析する予定である。このようにウイルスと宿主との間の秩序だった相互作用をより詳細に解析することで、新規DNAメチル化のメカニズムの解明が期待される。これらの成果はより根源的な生命現象の解明にとどまらず、EBV関連疾患の予防と治療に向けた臨床的な応用も幅広く期待されるものである。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

EBV感染脱落効率の検討で多少時間がかかっているが、おおむね順調に進展している。

今後の研究の推進方策

preliminaryなデータから、EBV感染初期におけるウイルス遺伝子発現は予想よりも多数に及んでいることが予想され、ウイルス遺伝子に対するshRNAによるknockdownの標的はより包括的に展開する必要がある。

研究成果

• [雑誌論文] Tumor Content Chart-Assisted HER2/CEP17 Digital PCR Analysis of Gastric Cancer Biopsy Specimens. (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka K, Ishikawa S, Nakayama A, Ushiku T, Nishimoto A, Urabe M, Kaneko N, Kunita A, Kaneda A, Aburatani H, Fujishiro M, Seto Y, Fukayama M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11(4) ページ: e0154430
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0154430. eCollection 2016.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Two subtypes of colorectal tumor with distinct molecular features in familial adenomatous polyposis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takane K, Matsusaka K, Ota S, Fukuyo M, Yue Y, Nishimura M, Sakai E, Matsushita K, Miyauchi H, Aburatani H, Nakatani Y, Takayama T, Matsubara H, Akagi K, Kaneda A
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 7(51) ページ: 84003-84016
  • DOI: 10.18632/oncotarget.11510.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Coupling CDH17 and CLDN18 Markers for Comprehensive Membrane-targeted Detection of Human Gastric Cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka K, Ushiku T, Urabe M, Fukuyo M, Abe H, Ishikawa S, Seto Y, Aburatani H, Hamakubo T, Kaneda A, Fukayama M.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 7(39) ページ: 64168-64181
  • DOI: 10.18632/oncotarget.11638.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] TET2 functions as a resistance factor against DNA methylation acquisition during Epstein-Barr virus infection. (2016)
  • 著者名/発表者名: Namba-Fukuyo H, Funata S, Matsusaka K, Fukuyo M, Rahmutulla B, Mano Y, Fukayama M, Aburatani H, Kaneda A
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 7(49) ページ: 81512-81526
  • DOI: 10.18632/oncotarget.13130.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] 発がんに関わるエピゲノム異常誘導因子としての病原体の意義 (2016)
  • 著者名/発表者名: 松坂恵介
  • 学会等名: 日本環境変異原学会 第45回大会
  • 発表場所: つくば国際会議場（茨城県、つくば市）
  • 年月日: 2016-11-17 – 2016-11-18
• [学会発表] Unique genetic and epigenetic features of gastric cancer subtypes with high-methylation or Epstein-Barr virus infection (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka K, Mano Y, Fukuyo M, Urabe M, Rahmutulla B, Sakai E, Aburatani H, Seto Y, Fukayama M, Kaneda A.
  • 学会等名: The75th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県、横浜市）
  • 年月日: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [図書] 病理と臨床 (2016)
  • 著者名/発表者名: 松坂恵介、宇於崎宏
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: 文光堂
• [備考] 千葉大学大学院医学研究院分子腫瘍学
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/moloncol/