新規高度免疫不全マウスを用いたヒトがん微小環境療法モデルの樹立

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K08742
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 岡田 誠治 熊本大学, エイズ学研究センター, 教授 (50282455)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: がん微小環境 / マウスモデル / 患者腫瘍組織移植モデル / 胆管細胞癌 / 原発性滲出性リンパ腫 / 消化管間質腫瘍 / がん関連線維芽細胞

研究実績の概要

本研究の目的は、新規無毛高度免疫不全マウス体内に「ヒトがん微小環境」を構築し、がん微小環境研究に供することを第一の目的とする。そして、がん微小環境等を標的とした新規治療法開発を第二の目的とする。
胆管細胞癌腫瘍株の移植モデルマウスを用いて、肺転移・肝転移モデルを作成した。特にCD147を高発現させることで、上皮間葉転換が起こり、転移を促進することを示した。胆管癌細胞株をがん関連線維芽細胞と同時移植すると腫瘍形成が早まることから、胆管細胞癌においてはがん関連線維芽細胞が腫瘍増殖に重要な働きを示すことを見いだした。また、原発性滲出性リンパ腫（Primary effusion lymphoma;PEL）ではオートファジーが亢進しており、オートファジーを阻害するとERストレスが亢進してアポトーシスに陥ることを示した。更に、PELでは転写因子PU.1がメチル化により抑制されており、脱メチル化剤使用によりPU.1は再活性化し、インターフェロン関連遺伝子が活性化することでPEL細胞はアポ-トーシスに陥ることを証明した。原発性滲出性リンパ腫のマウスモデルを用いて、シコニンやクロロゲン酸などの薬剤の有効性を検証し、その作用機序を明らかにした。消化管間質腫瘍（Gatrointestinal stromal tumor; GIST）の手術サンプルを高度免疫不全マウス皮下に移植して、患者腫瘍組織移植モデル(Patient-derived xenografts; PDX)を作成中である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

胆管細胞癌腫瘍株や原発性滲出性リンパ腫の移植モデルマウスを用いて、ある程度の成果を得た。患者腫瘍組織移植モデルを作成中であるが、各々樹立までに1年程度かかるので、確実に研究を遂行する予定である。熊本地震により飼育している高度免疫不全マウスが約半数が死亡したため、一時期移植実験が困難となった。現在ほぼ回復しており、精力的に移植実験を進める予定である。

今後の研究の推進方策

胆管細胞癌および消化管間質腫瘍において、手術サンプルを高度免疫不全マウス皮下に移植して、様々な患者腫瘍組織移植モデル(Patient-derived xenografts; PDX)を作成する。また、その他の様々な腫瘍を用いてPDXモデルを樹立したいと考えている。PDXの樹立には長期間かかるので同時に細胞株の移植モデルを用いて、腫瘍およびがん微小環境を対象とした新規治療法の開発を行っていく予定である。

次年度使用額が生じた理由

熊本地震により計画していた実験の遂行が遅れたため。特に飼育棚の倒壊によりマウス実験の中断が余儀なくされ、飼育しているマウスの約半数が死亡したため、その後のマウス実験の継続が困難となった。このため、マウス飼育費・投与する薬剤費。解析に要する費用が減った。

次年度使用額の使用計画

平成28年度に遅れた実験は、平成29年度と平成30年度に取り戻す予定である。それに伴い、研究費ｈ、平成29年度と30年度で使用する。

研究成果

• [国際共同研究] コンケン大学医学部/マヒドン大学医学部シリラ病院/ブラパー大学薬学部・理学部(タイ)
  • 国名: タイ
  • 外国機関名: コンケン大学医学部/マヒドン大学医学部シリラ病院/ブラパー大学薬学部・理学部
• [国際共同研究] ソウル国立大学薬学部(韓国)
  • 国名: 韓国
  • 外国機関名: ソウル国立大学薬学部
• [雑誌論文] Correlation between histone acetylation and expression of Notch1 in human lung carcinoma and its possible role in combined small-cell lung carcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hassan WA, Takebayashi SI, Abdalla MOA, Fujino K, Kudoh S, Motooka Y, Sato Y, Naito Y, Higaki K, Wakimoto J, Okada S, Nakao M, Ishikawa Y, Ito T.
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1038/labinvest.2017.36.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Restoring PU.1 induces apoptosis and modulates viral transactivation via interferon-stimulated genes in primary effusion lymphoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Goto H, Kariya R, Kudo E, Okuno Y, Ueda K, Katano H and Okada S
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] YM155 induces apoptosis through proteasome-dependent degradation of MCL-1 in primary effusion lymphoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kojima Y, Hayakakwa F, Morishita T, Sugimoto K, Iwase M, Yamamoto H, Hirano D, Imoto N, Shimada K, Okada S, and Kiyoi H.
  • 雑誌名: Pharmacol Res 巻: 120 ページ: 242-251
  • DOI: 10.1016/j.phrs.2017.04.006.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Upregulation of CD147 Promotes Metastasis of Cholangiocarcinoma by Modulating the Epithelial-to-Mesenchymal Transitional Process. (2017)
  • 著者名/発表者名: Dana P, Kariya R, Vaeteewoottacharn K, Sawanyawisuth K, Seubwai W, Matsuda K, Okada S, and Wongkham S.
  • 雑誌名: Oncol Res 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.3727/096504016X14813899000565.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Repurposing cimetidine for cholangiocarcinoma: antitumor effects in vitro and in vivo (2017)
  • 著者名/発表者名: Dana P, Vaeteewoottacharn K, Kariya R, Matsuda K, Wongkham S, and Okada S.
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 13 ページ: 1432-1436
  • DOI: 10.3892/ol.2017.5563.
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] Inhibition of autophagy by chloroquine induces apoptosis in primary effusion lymphoma in vitro and in vivo through induction of endoplasmic reticulum stress. (2016)
  • 著者名/発表者名: Alam MM, Kariya R, Kawaguchi A, Matsuda K, Kudo E, and Okada S.
  • 雑誌名: Apoptosis 巻: 21 ページ: 1191-1201
  • DOI: 10.1007/s10495-016-1277-7.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Establishment and characterization of a novel human cholangiocarcinoma cell line with high metastatic activity. (2016)
  • 著者名/発表者名: Uthaisar K, Vaeteewoottacharn K, Seubwai W, Talabnin C, Sawanyawisuth K, Obchoei S, Kraiklang R, Okada S, Wongkham S.
  • 雑誌名: Oncol Rep 巻: 36 ページ: 1435-1446
  • DOI: 10.3892/or.2016.4974.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] Application of novel highly immunodeficient mice for patient derived xenograft (PDX) model and evaluation of anticancer therapy (2017)
  • 著者名/発表者名: Seiji Okada, Kulthida Vaeteewoottacahrn, Hiroki Goto, and Ryusho Kariya
  • 学会等名: 3rd International Symposium for Medicinal Sciences
  • 発表場所: 仙台国際センター 仙台
  • 年月日: 2017-03-24 – 2017-03-27
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] クロロゲン酸の原発性滲出性悪性リンパ腫に対する抗腫瘍効果の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 刈谷龍昇, Ployplon Phikulsod, 川口梓, Jutatip Panaampon, Md. Masud Alam, 岡田誠治
  • 学会等名: 日本薬学会第137回年会
  • 発表場所: 仙台国際センター 仙台
  • 年月日: 2017-03-24 – 2017-03-27
• [学会発表] Role of PU.1 Down-Regulation for the Development of Primary Effusion Lymphoma (2016)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Goto, Ryusho Kariya, Eriko Kudo, Yutaka Okuno, and Seiji Okada
  • 学会等名: American Society of Hematology Annual Meeting
  • 発表場所: San Diego Convention Center, San Diego
  • 年月日: 2016-12-03 – 2016-12-06
  • 国際学会
• [学会発表] Induction of apoptosis by Shikonin through a ROS/JNK mediated process in primary effusion lymphoma (2016)
  • 著者名/発表者名: Md. Masud Alam, Ryusho Kariya, Azusa Kawaguchi, and Seiji Okada
  • 学会等名: 第78回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、横浜
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-15
• [学会発表] がん関連繊維芽細胞分化抑制剤の探索 (2016)
  • 著者名/発表者名: 刈谷龍昇、Dana Paweena、松田幸樹、Masud Alam、川口梓、岡田誠治
  • 学会等名: 第26回日本サイトメトリー学会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂、福岡
  • 年月日: 2016-07-23 – 2016-07-24
• [学会発表] シコニンの原発性滲出液悪性リンパ腫に対する抗腫瘍効果について (2016)
  • 著者名/発表者名: 川口梓、刈谷龍昇、Masud Alam、岡田誠治
  • 学会等名: 第26回日本サイトメトリー学会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂、福岡
  • 年月日: 2016-07-23 – 2016-07-24
• [備考] 熊本大学エイズ学研究センター岡田研究室
  • URL: http://www.caids.kumamoto-u.ac.jp/data/okada/default.html
• [備考] 岡田 誠治 ｜ 研究紹介 ｜ がん研究分野の特性等を踏まえた支援活動
  • URL: http://ganshien.umin.jp/research/spotlight/okada/index.html
• [備考] 【KUMADAI NOW】 岡田 誠治 教授（エイズ学研究センター）
  • URL: https://www.youtube.com/watch?v=RJNjHjMKzHU
• [備考] 岡田 誠治 — Kumamoto University
  • URL: https://kumamoto.pure.elsevier.com/ja/persons/seiji-okada