• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2017 年度 実施状況報告書

腸管寄生原虫の病原性発現機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 16K08761
研究機関長崎大学

研究代表者

加藤 健太郎  長崎大学, 熱帯医学研究所, 助教 (50508885)

研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード赤痢アメーバレクチン / 溶血活性
研究実績の概要

本年度は昨年度から引き続き、赤痢アメーバ (Entamoeba histolytica, Eh) が発現しており、溶血活性を有するレクチン (EhIgl) の溶血活性部位の同定を試みた。
非病原性で溶血活性の弱いアメーバ(Entamoeba dispar, Ed)も同様のレクチンを有すると同時に、IglにはIgl1とIgl2のアイソフォームがあるため、それぞれ組換え型タンパク質を作製し、各アイソフォームの溶血活性を調べたところ、すべてで溶血活性が確認された。Entamoeba histolyticaとEntamoeba disparではEhIgl2とEdIgl2の発現量は同等だが、EhIgl1の発現量がEdIgl1よりも高いため、EhIgl1の発現を抑制したEntamoeba histolytica株を作製し、溶血活性を検証した。その結果、EhIgl1発現抑制株では、親株と比較して溶血活性が低く、EhIgl1の発現量がEntamoeba histolyticaの溶血活性に影響を与えることが示された [Kato K eta al., PLoS ONE, 12, e0181864 (2017)]。
また、抗体によるEhIglの溶血活性中心の検証では、EhIgl1のC末端側を認識するモノクローナル抗体がEntamoeba histolyticaの溶血活性を抑制した一方で、組換え型EhIgl1の溶血活性を増強するという非常に興味深い結果が得られた。このことは、EhIgl1の溶血活性中心がC末端側に存在するという以前に報告した結果を補強するものであり、EhIgl1のC末端側を抗体あるいは薬剤でブロックすれば、Entamoeba histolyticaの溶血活性を抑制できることを示唆する結果である。
これらの結果より、EhIgl1のC末端側に溶血活性中心があり、その発現量や多量体化が溶血活性に影響を与えることが示唆され、今後の研究に繋がる研究成果が得られた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度計画していた以下の点について自己評価を行った。
Entamoeba histolyticaとEntamoeba disparのIglの発現量に関する論文はすでに発表されていたため、EhIgl1のみに着目して研究を進めていくことを考えていたが、論文投稿時に非常に有意義なコメントを頂き、Entamoeba histolyticaの溶血活性に対するEhIgl1重要性を多角的に明らかにすることができた。まず、モノクローナル抗体を用いて活性中心がEhIgl1のC末端側にあることが改めて確認できたことと、その抗体によってEntamoeba histolyticaの溶血活性を抑制できたことが有意義であった。また、EhIgl1発現抑制株において溶血活性が低下したことも本研究にとっては重要であった。さらにはこれらの結果を誌上発表することができたことは評価できる。
以上の点より、おおむね順調に進展していると評価できる。

今後の研究の推進方策

現在までのところ順調に研究が進展しているので、研究計画通りに以下の研究を進める。
1)EhIgl1の溶血活性部位をさらに絞り込む。
2)Igl1の発現メカニズムと作用機序を明らかにする。

次年度使用額が生じた理由

(理由)
3月に開催された国内学会において、当初、会場の近隣に宿泊を予定していたが、経費削減のため両親宅に宿泊先を変更した結果、次年度使用額が生じた。
(使用計画)
研究を遂行するために物品費として使用する。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (1件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Comparison of hemolytic activity of the intermediate subunit of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar lectins2017

    • 著者名/発表者名
      Kentaro Kato, Takashi Makiuchi, Xunjia Cheng, Hiroshi Tachibana
    • 雑誌名

      PLOS ONE

      巻: 12 ページ: e0181864

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0181864

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] The role of intermediate subunits of Entamoeba histolytica lectin2018

    • 著者名/発表者名
      Kentaro Kato
    • 学会等名
      The U.S.-Japan Cooperative Medical Science Program (The 48 th Joint Conference on Parasitic Diseases)
    • 国際学会
  • [学会発表] Comparison of hemolytic activity of the intermediate subunit of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar lectins2018

    • 著者名/発表者名
      Kentaro Kato, Takashi Makiuchi, Xunjia Cheng, Hiroshi Tachibana
    • 学会等名
      第87回日本寄生虫学会大会
  • [学会発表] Entamoeba histolyticaとEntamoeba disparのIglレクチンの溶血活性比較研究2017

    • 著者名/発表者名
      加藤健太郎, 牧内貴志, Xunjia Cheng, 橘裕司
    • 学会等名
      第86回日本寄生虫学会大会
  • [学会発表] Entamoeba属のIglレクチンの溶血活性比較研究2017

    • 著者名/発表者名
      加藤健太郎、牧内貴志、Cheng Xunjia、橘裕司
    • 学会等名
      第36回日本糖質学会年会
  • [学会発表] Entamoeba レクチンのIglサブユニットが有する溶血活性に関する研究2017

    • 著者名/発表者名
      加藤健太郎、牧内貴志、Xunjia Cheng、橘裕司
    • 学会等名
      第40回日本分子生物学会年会
  • [学会発表] 赤痢アメーバにおけるレクチンサブユニット(Igl)の機能解析2017

    • 著者名/発表者名
      牧内貴志、加藤健太郎、Cheng Xunjia、橘裕司
    • 学会等名
      第50回日本原生生物学会大会・第1回日本共生生物学会大会

URL: 

公開日: 2018-12-17  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi