| 研究課題/領域番号 |
16K08793
|
|---|
| 研究機関 | 徳島文理大学 |
|---|
研究代表者 |
小林 敬子 徳島文理大学, 薬学部, 助教 (90170315)
|
|---|
| 研究分担者 |
永浜 政博 徳島文理大学, 薬学部, 教授 (40164462)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| キーワード | イオタ毒素 / 二成分毒素 / 細胞障害作用 / ADPリボシル化 / エンドサイトーシス / LSR / トリセルタージャンクション |
|---|
| 研究実績の概要 |
腸性中毒症の原因であるＥ型ウエルシュ菌のイオタ毒素の細胞障害作用のメカニズムを検討してきた。本研究では、本毒素の細胞レベルでの検討を行った。イオタ毒素は、IaとIbからなる二成分毒素で、Iaは酵素活性に関与し、Ibは細胞への結合に関与する。Ibが細胞膜のレセプターに結合後、オリゴマーを形成し、これにIaが結合して細胞内に侵入する。Ibの受容体として、Lipolysis-stimulated lipoprotein receptor(LSR)が報告されている。これまで本研究では、Ibは、LSRのN末側25残基と結合することを明らかにした。本研究では、LSRと相互作用して細胞の結合に関与するIbのＣドメイン（Ｄ4）の役割を検討した。Ｄ4は、大腸菌で組換え体にして発現させ精製した。Ｄ4は、Wild-type Ibと同様、細胞に結合し、さらに、Ｄ4は、Ia+Ibによる細胞毒性を強く抑制した。すなわち、IbのＣ末ドメインは、LSRへの結合に関与し、本毒素のエンドサイトーシスの惹起に関与することが判明した。一方、Ｄ4は、トリセルラージャンクションに存在するLSRに作用して障害を示すことから、Ibの毒性の本態であると考えられる。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は、イオタ毒素のレセプターであるLSRとIbのＤ4ドメインとの相互作用を明らかにした。これまで、Ibのいずれの領域がLSRと特異的に相互作用するかを行った報告はない。すなわち、本年度の結果は、新規な知見である。
|
| 今後の研究の推進方策 |
今後の検討は、以下の方法で行う予定である。
1）イオタ毒素のIbのＤ4の細胞障害作用機構を詳細に検討する。
2）イオタ毒素の腸管毒性を調べるため、腸管上皮バリアに対する作用を検討する。
3）イオタ毒素のマウス回腸ループに対する毒性を検討する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
（理由）
使用器具、細胞培養、試薬等が、予定より安価ですんだこと、さらに、予定した旅費が予想より下回り、次年度に使用額が生じた。
（使用計画）
次年度は、イオタ毒素の作用を、動物や細胞生物学的な方法で検討する。そのため、多くの試薬や培地、動物飼育などの費用が必要である。さらに、成果発表のための学会出張費にも使用する。
|
