HBV転写制御領域を標的とする抗HBV薬開発の為の海洋生物由来シード化合物の探索

2017 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K09348
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 山下 篤哉 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (00334871)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: HBV / 転写制御 / 化合物 / 可溶生物

研究実績の概要

今年度はHBVコアプロモーターレポーター細胞を用いて海洋生物由来テルペン系化合物15種類についてHBVコアプロモーターの転写抑制活性を検討した。その結果、沖縄県近海に生息するカイメンDactylospongia metachromia由来化合物のmetachromin Aおよび沖縄県近海に生息する未同定のカイメン由来化合物のKalihinol Eがヒット化合物として得られた。更に、これらの２つの化合物のHBV増殖抑制活性について検討したところ、metachromin A はHBVの増殖を強く抑制したが、Kalihinol Eは細胞毒性が強くHBVの増殖抑制活性は弱かった。そこで、以後、metachromin Aについて解析を進めた。次に、5種類の類縁化合物を使って構造活性相関を検討したところhydroquinone基および5位、9位の2重結合が転写抑制活性に重要な部位であることがわかった。また、metachromin AのHBVコアプロモーターの転写抑制活性の作用機序を検討したところ、metachromin AはHNF4αの転写レベルを抑制するのではなく、HNF4αのタンパクの分解を促進しHBVコアプロモーターの転写活性を抑制することを見出した。更に、metachromin AはHBVコアプロモーターのみならずHBVエンハンサーIの抑制活性もあることを見出した。
沖縄近海に生息する海洋生物の抽出物100種からエンハンサーIを抑制活性するものをsクリーニングした結果、一つの海洋生物抽出物でエンハンサーIの抑制活性が見られたことを昨年度報告した。この海洋生物抽出物から抑制化合物の分画・精製を行っているが、これまでのところその単離には至っていない。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

海洋生物由来の化合物の中からHBVコアプロモーターを抑制しHBVの増殖を抑える化合物を見出し、更に、その抑制機序についても確認することが出来た。従って、申請書の実験計画通りに進んでいる。

今後の研究の推進方策

新たな海洋生物由来の化合物を入手出来たので、HBVコアプロモーターおよびエンハンサーIの活性を抑制する化合物を探索する。

研究成果

• [雑誌論文] Hepatitis B virus prevents excessive viral production via reduction of cell death-inducing DFF45-like effectors. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yasumoto J, Kasai H, Yoshimura K, Otoguro T, Watashi K, Wakita T, Yamashita A, Tanaka T, Takeda S, Moriishi K.
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 98 ページ: 123-130
  • DOI: 10.1099/jgv.0.000813.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cinnamic acid derivatives inhibit hepatitis C virus replication via the induction of oxidative stress. (2017)
  • 著者名/発表者名: Amano R, Yamashita A, Kasai H, Hori T, Miyasato S, Saito S, Yokoe H, Takahashi K, Tanaka T, Otoguro T, Maekawa S, Enomoto N, Tsubuki M, Moriishi K.
  • 雑誌名: Antiviral Research 巻: 145 ページ: 123-130
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2017.07.018. Epub 2017 Aug 2.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Inhibitory effects of metachromin A on hepatitis B virus production via impairment of the viral promoter activity. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamashita A, Tamaki M, Kasai H, Tanaka T, Otoguro T, Ryo A, Maekawa S, Enomoto N, de Voogd NJ, Tanaka J, Moriishi K.
  • 雑誌名: Antiviral Research 巻: 145 ページ: 136-145.
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2017.08.001. Epub 2017 Aug 4.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Catechol Group of Cinnamic Acid Derivative Is Essential for Its Anti-Hepatitis C Virus Activity. (2017)
  • 著者名/発表者名: Amano R, Yamashita A, Kasai H, Hori T, Miyasato S, Saito S,Tsubuki M, Moriishi K.
  • 雑誌名: Yamanashi Medical Journal 巻: 32 ページ: 95-103
  • 査読あり
• [学会発表] 海洋生物由来テルペン系化合物metachromin AのHNF4α発現抑制作用によるHBV増殖抑制 (2017)
  • 著者名/発表者名: 山下篤哉、玉城麻友美、田中智久、葛西宏威、乙黒光姫、梁明秀、前川伸哉、榎本信幸、田中淳一、森石恆司
  • 学会等名: 第27回抗ウイルス療法学会 学術集会・総会
• [学会発表] Inhibitory effects of metachromin A on hepatitis B virus production via impairment of the viral promoter activity (2017)
  • 著者名/発表者名: Atsuya Yamashita, Tomohisa Tanaka, Teruhime Otoguro, Hirotake Kasai, Kohji Moriishi
  • 学会等名: 第65回日本ウイルス学会学術集会
• [備考] 山梨大学 医学部 微生物学講座
  • URL: https://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical_basic/microbio/Microbiology_Yamanashi_Uni_Japanese/Home.html
• [備考] 山梨大学 研究者総覧
  • URL: http://nerdb-re.yamanashi.ac.jp/Profiles/319/0031900/profile.html