HBV転写制御領域を標的とする抗HBV薬開発の為の海洋生物由来シード化合物の探索

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K09348
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 山下 篤哉 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (00334871)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: HBV / 転写制御 / 化合物 / 海洋生物

研究実績の概要

昨年度は、HBVコアプロモーターレポーター細胞を用いてカイメン由来の抗HBV化合物metachromin Aを同定し、その抑制機序も解明した。今年度はファーストスクリーニングをHepG2.215.7細胞をスクリーニング系として用い、海洋生物由来の化合物ライブラリーから抗HBV活性を有する化合物のスクリーニングを行った。その結果、カイメン由来の化合物アレナロールがHBVの増殖を抑制することを見出した。しかし、アレナロールはあまり強い抗HBV活性が無かったため、アレナロールの誘導体20種を合成して、アレナロールより高い抗HBV活性を有する化合物の探索を行った。その結果、化合物HYTO-20がアレナロールより高い抗HBV活性を有し、更に、HBVコアプロモーターの転写活性を抑制することによりHBVの増殖を抑制することを見出した。また、HYTO-20とHBVコアプロモーターの転写抑制活性との構造活性相関を確認するために、HYTO-20の誘導体を作製し検討を行った。その結果、HYTO-20の水酸基が重要であることが判った。次に、HYTO-20のHBVコアプロモーターの転写活性抑制の機序について検討を行った。その結果、MG132を一緒にHYTO-20を処理した際に、HYTO-20のHBVコアプロモーターの転写活性抑制がキャンセルされることから、HYTO-20はHBVの転写を制御している転写因子のタンパクを分解することにより、HBVコアプロモーターの転写活性を抑制する可能性が示唆された。更に、metachromin AはHBVコアプロモーターHNF4αのタンパクの分解を促進しHBVコアプロモーターの転写活性を抑制したため、同様の機序を考えHNF4αについて検討を行ったが、HYTO-20を処理することにより細胞内のHNF4αタンパクの低下は見られなかった。

研究成果

• [雑誌論文] HBV patients with low HBsAg and high HBcrAg titers have a high risk of HBV-related HCC. (2019)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Y, Maekawa S, Komatsu N, Sato N, Tatsumi A, Miura M, Muraoka M, Nakakuki N, Shindo H, Amemiya F, Takano S, Nakayama Y, Fukasawa M, Yamaguchi T, Inoue T, Sato T, Sakamoto M, Yamashita A, Moriishi K, Enomoto N
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 49 ページ: 51-63
  • DOI: 10.1111/hepr.13277
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] HBV preS deletion mapping using deep sequencing demonstrates a unique association with viral markers. (2019)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Y, Maekawa S, Komatsu N, Sato M, Tatsumi A, Miura M, Matsuda S, Muraoka M, Nakakuki N, Amemiya F, Takano S, Fukasawa M, Nakayama Y, Yamaguchi T, Inoue T, Sato T, Sakamoto M, Yamashita A, Moriishi K, Enomoto N
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 14 ページ: e0212559
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0212559
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] BeberineのHBV増殖抑制活性とその抑制機序の解明 (2018)
  • 著者名/発表者名: 山下 篤哉, 田中 智久, 葛西 宏威, 乙黒 光姫, 梁 明秀, 前川 伸哉, 榎本 信幸, 森石 恆司
  • 学会等名: 第28回 抗ウイルス療法学会 学術集会・総会
• [学会発表] Berberine suppresses hepatitis B virus production via impairment of HBV core promoter activity. (2018)
  • 著者名/発表者名: 山下 篤哉、田中 智久、乙黒 光姫、葛西 宏威、森石 恆司
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会学術集会
• [備考] 山梨大学 医学部 微生物学講座
  • URL: https://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical_basic/microbio/Microbiology_Yamanashi_Uni_Japanese/Home.html
• [備考] 山梨大学 研究者総覧
  • URL: http://nerdb-re.yamanashi.ac.jp/Profiles/319/0031900/profile.html