| 研究実績の概要 |
実験は培養細胞と動物実験の両方を平行して進めている。ヒト星細胞（cell line LX-2)、ヒト血管平滑筋細胞（PCS-100)、を培養しcollagen I, PDGFR,HFN1, AFP,TGFβ,TNFα,PPARα、PPARγの各遺伝子発現を定量した。肝臓内皮細胞（HEC)においても同様にその遺伝子発現定量を試みた。
結果、内皮細胞培養を試みVEGF刺激によるPDGF-BB産生の変化を観察する予定であったが培養自体がうまくできずVEGF刺激によるPDGF-BB産生の変化も同定できなかった。
またATBF1強制発現、siRNAによる発現抑制を星細胞、平滑筋細胞を使用し実験した。それぞれの状態でcollagen I, PDGFR,HFN1, AFP,TGFβ,TNFα,PPARα、PPARγの各遺伝子発現の変化を定量した。しかし強制発現系は細胞の状態が不安定になりやすく実験データのばらつきが非常に強く解析に難渋している。
In vivo実験は現在loxP系で挟まれたATBF1 floxマウスを樹立した。Estrogen receptorによってCre酵素の発現誘導がかかる(Tamoxifen誘導型)CreERT2マウスと交配を試み現在作成中である。しかし当初の予定では生後2日目のマウスにStreptozotocinを皮下注し4Wから高脂肪食を与えNASH肝癌モデルを作成する方針であったがその後同マウスが予想よりNASHになりずらいことが判明したため今後の実験に支障が出る可能性がある。そのため現在他のNASHモデルでの実験を検討中である。
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