血管内皮接着因子、JCADによるプラーク不安定化機序の解明－血管新生に注目して－

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K09515
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 川合 宏哉 神戸大学, 医学研究科, 客員教授 (20346266)
• 研究分担者: 原 哲也 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (70547504)
• 研究期間 (年度): 2016-10-21 – 2019-03-31
• キーワード: 血管新生

研究実績の概要

A) in vitroの培養血管内皮細胞を用いたJCADの血管新生の役割の解明　　培養ヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC)に対してsiRNAやtransfection法を用いたJCADのノックダウンや過剰発現を誘導し、（１）WST-1アッセイによる細胞増殖能、（２）wound healing modelによる細胞遊走能、（３）tube formation による血管新生能を比較検討し、JCADは血管新生を制御していることを明らかにする。HUVECにおいて、JCADのノックダウンにより、細胞増殖能が低下し、tube formationも低下する、という結果をえた。
（B)　in vivoにおけるJCADの血管新生における役割の解明
（B-1)　JCAD-/-マウスの生理的脈管形成への影響　　作製されたJCAD-/-マウスは少なくとも胎生致死はおこらず、肉眼上は野生型と変化を認めなかった。生理的な血管発生に異常がないことを確認するために、マウス網膜血管の解剖をFITCの静脈投与後の摘出眼球において組織学的に検討したが、明らかな差を認めなかった。（B-2) tumor growth modelによる生体内での腫瘍血管新生能　　JCAD-/-マウスと野生型マウスに対してメラノーマ癌細胞（B16F10)及び肺腺癌細胞株（LL/2)を皮下注し、その増殖を経時的に2日毎に観察し、その増殖速度を比較する。2週間後に安楽死させ、腫瘍組織を取り出し、血管内皮細胞のマーカーであるCD31染色によって腫瘍内の血管新生の程度を評価する。。成熟した新生血管は血管周囲をSMAにより覆われているが、逆に未成熟なものはSMA陰性となることが知られており、JCADのノックアウトマウスでは血管新生が減少し、さらにSMA陰性の未熟な血管新生がおこることを解明した。

研究成果

• [雑誌論文] Targeted Disruption of JCAD (Junctional Protein Associated With Coronary Artery Disease)/KIAA1462, a Coronary Artery Disease?Associated Gene Product, Inhibits Angiogenic Processes In Vitro and In Vivo (2018)
  • 著者名/発表者名: Hara Tetsuya、Monguchi Tomoko、Iwamoto Noriko、Akashi Masaya、Mori Kenta、Oshita Toshihiko、Okano Mitsumasa、Toh Ryuji、Irino Yasuhiro、Shinohara Masakazu、Yamashita Yui、Shioi Go、Furuse Mikio、Ishida Tatsuro、Hirata Ken-ichi
  • 雑誌名: Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology 巻: 37 ページ: 1667～1673
  • DOI: 10.1161/ATVBAHA.117.309721
  • 査読あり