| 研究課題/領域番号 |
16K09664
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| 研究機関 | 筑波大学 |
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研究代表者 |
玉岡 晃 筑波大学, 医学医療系, 教授 (50192183)
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| 研究分担者 |
冨所 康志 筑波大学, 医学医療系, 講師 (80447250)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | アルツハイマー病 / アミロイドβ蛋白 / ミトコンドリア / アミロイドβ蛋白前駆体 / オートファジー・リソソーム経路 / 転写因子EB / 酸化ストレス / リソゾーム |
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| 研究実績の概要 |
アルツハイマー病（AD）の病態にはミトコンドリア機能障害が関与している可能性があり、ADの病因関連物質であるアミロイドβ蛋白（Aβ）とミトコンドリアとの関係を解析することを目的とした。ヒト神経芽腫細胞由来のSH-SY5Y細胞やスウェーデン型のAPP変異を発現したSH-SY5Y細胞を用いて、ウェスタンブロットにより発現パターンを調べたところ、成熟型Aβ前駆体（APP）、BACE1、γセクレターゼ複合体の構成成分（特にpresenilin1とPEN-2）は、リソゾーム画分に比べてミトコンドリア画分にはほとんど検出できなかった。従って、APPよりのAβの産生は、ミトコンドリアにおいては生じていないものと考えられた。
次に、APPの細胞内代謝を解析するために、オートファジー・リソソーム経路（ALP）の活性化によるAβ産生への影響を検討した。ADの病態においては、ALPの異常が示唆されており、転写因子EB（TFEB）はその活性化によりALPの機能が亢進する。ラットの大脳皮質初代培養神経細胞を培養し、対照細胞と野生型APPを強制発現させた細胞にTFEBを強制発現させ、培養細胞をウエスタンブロットにて解析し、培養上清中のAβを測定した。TFEBのみ過剰発現させた場合には，Aβ分泌量は対照よりも減少し，これはADAM10レベルの増加によるためと考えられた。APPまたはβ-CTFを過剰発現させた神経細胞では、TFEB過剰発現によりAβ分泌量は有意に増加していた。
Aβ産生において、このβ-CTF増加の影響がADAM10増加の影響を上回るため、Aβの分泌量は増加するものと推測される。本実験系においては、TFEBによるALP促進がAβ分泌量に与える影響は、主にβ-CTFレベルの変化によるものと考えられた。今後は、酸化ストレスやミトコンドリア障害とALPやTFEBとの関係を解析する必要がある。
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