| 研究課題/領域番号 |
16K09666
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| 研究機関 | 東京医科大学 |
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研究代表者 |
山下 雄也 東京医科大学, 医学部, 客員研究員 (20431843)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | ADAR2 / AMPA受容体 / RNA編集 / カルパイン / 筋萎縮性側索硬化症 / 神経細胞死 / 核膜孔複合体 / 核-細胞質輸送 |
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| 研究実績の概要 |
我々は、AMPA受容体を介したカルシウムイオン透過性の亢進が孤発性筋萎縮性側索硬化症（ALS）の病態に繋がること、その過程でカルシウムイオン依存性プロテアーゼであるカルパインの活性化やTDP-43の病理形成に関与することを孤発性ALSの分子病態モデルマウスである、RNA編集酵素adenosine deaminase acting on RNA 2 (ADAR2)のコンディショナルノックアウト（AR2）マウスの解析から明らかにした。孤発性ALSの分子病態モデルであるAR2マウスでは、AMPA受容体を介したカルシウムイオン透過性の亢進で、運動ニューロンに変性・脱落が起き、その過程でローターロッドやグリップ力（行動解析）を指標とした運動機能が低下する。AR2マウスの行動解析が低下する以前に、脊髄運動ニューロンの核に核内空胞を見出し、この核の機能異常が核膜孔複合体（Nuclear pore complex: NPC）と核-細胞質輸送システムの破綻をきたし、細胞死に繋がるカスケードの一部であることを見出した。さらにAR2マウスの脊髄運動ニューロン死の指標としてコリンアセチルトランスフェラーゼ（ChAT）抗体陽性の運動ニューロン数と細胞体のサイズが相関することを見出した。また、細胞死カスケードの過程において、NPCの構成分子であるヌクレオポリンの一つNUP62がTDP-43を含む凝集体と共在することをAR2とAR2ヘテロマウスの脊髄前角領域で見出し、その結果を論文に掲載した。今後はこれらの変化から細胞死に繋がるカスケードをさらに詳細に調べる予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
AR2マウスを用いて、Ca2+流入に伴い核-細胞質輸送システムが破綻することによる、細胞死に繋がるカスケードの一部を見出した。さらに細胞死の指標を見出し、新たに細胞死カスケードの過程において、NPCの構成分子であるヌクレオポリンの一つが凝集体と共在することを見出した。平成30年度の後半に体調を崩し休職をしていたために実験計画が遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、延長申請が認められたので、休職により、遅れた計画を実行に移す。これまでに見出したCa2+流入に伴いカルパインが活性化され、核-細胞質輸送システムが破綻する変化がどのように関連して神経細胞死を引き起こすのか、それらのカスケードを更に検討し、孤発性ALSの病態解明と治療法の開発を行いたいと考える。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究が遅延した部分について当初の研究計画に従って遅れている研究を進める。今回1098858円の次年度使用額が出た。平成30年後半に研究代表者が体調を崩し休職していたためによる。これに関しては、研究計画に従い、物品費、旅費、人件費・謝金、その他の領域として使用する。
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