AD・PD患者での糖脂質による各原因蛋白修飾の実態とその意義の解明

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K09685
• 研究機関: 藤田医科大学
• 研究代表者: 武藤 多津郎 藤田医科大学, 医学部, 教授 (60190857)
• 研究分担者: 朝倉 邦彦 藤田医科大学, 医学部, 教授 (50333159) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: AD / PD / α-synuclein / Tau蛋白 / アミロイドβ / 糖脂質 / ラフト / 神経栄養因子受容体

研究実績の概要

本研究では、我々が同定したTrkと酸性糖脂質であるGM1による脂質修飾の実態解明のため、Trkのjuxtamembrane領域に様々な deletion mutantを作成し、Trkを発現しないPC12細胞 (PCnnr) に変異cDNAを含むベクターをtransfectし、stable transformantを作成した。各々の変異cDNAを 恒常的に発現するcell lineを放射性同位元素でwhole cell labelし、抗Trk抗体で免疫沈降 (IP)し、そのIP物より全脂質を抽出し薄層クロマトプレート (TLC) で展開、GM1を同定した (論文作成中)。これら変異Trkを発現するstable transfectantでは、Trkのリガンドに対する反応性は失われ、細胞内 traffickingにも異常をきたすことを解明した（論文作成中）。
一方、PD,AD,ALS,MS患者試料中特に髄液での中性糖脂質などの脂質類をLC-MS/MSを用いた高感度アッセイ法で測定した．さらに、神経学的に正常な泌尿器患者200例の解析も同時に行い、その脂質プロファイル化を行った．その結果、主要な糖脂質特に中性糖脂質には年齢及び性別で有意に異なるプロファイルパターンを呈する事が判明した（論文準備中）．この事実を基に、現在までに解析が終了している各種神経疾患患者での異常検出に応用し、各疾患での異常所見の特定を終了した．PD、MS、ALSなど の神経疾患で新規脂質や糖脂質の異常とそれらが神経炎症に如何に関連するかを免疫学的・生化学的に追求する研究に取りかかっているが、残念ながら本研究の最終年までに終えることが出来なかった．今後、他の研究費によりこの仕事を完成させる予定である．

研究成果

• [雑誌論文] Altered regulation of serum lysosomal acid hydrolase activities in Parkinson's disease: A potential peripheral biomarker? (2019)
  • 著者名/発表者名: Niimi Yoshiki、Ito Shinji、Mizutani Yasuaki、Murate Kenichiro、Shima Sayuri、Ueda Akihiro、Satake Wataru、Hattori Nobutaka、Toda Tatsushi、Mutoh Tatsuro
  • 雑誌名: Parkinsonism & Related Disorders 巻: 61 ページ: 132～137
  • DOI: https://doi.org/10.1016/j.parkreldis.2018.10.032
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Patient With Encephalomyeloradiculoneuropathy Exhibiting a Relapsing?Remitting Clinical Course: Correlation of Serum and Cerebrospinal Fluid Anti-Neutral Glycosphingolipids Antibodies With Clinical Relapse (2018)
  • 著者名/発表者名: Nanaura Hitoki、Kataoka Hiroshi、Shima Sayuri、Iwasa Naoki、Eura Nobuyuki、Sugie Kazuma、Mutoh Tatsuro、Ueno Satoshi
  • 雑誌名: Frontiers in Neurology 巻: 9 ページ: -
  • DOI: 10.3389/fneur.2018.00206
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Anti-GM1 ganglioside antibodies modulate membrane-associated sphingomyelin metabolism by altering neutral sphingomyelinase activity (2018)
  • 著者名/発表者名: Ueda Akihiro、Shima Sayuri、Murate Kenitiroh、Kikuchi Kouichi、Nagao Ryunosuke、Maeda Toshiki、Muto Eri、Niimi Yoshiki、Mizutani Yasuaki、Mutoh Tatsuro
  • 雑誌名: Molecular and Cellular Neuroscience 巻: 89 ページ: 42～48
  • DOI: 10.1016/j.mcn.2018.03.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in Serial D-Dimer Levels Predict the Prognoses of Trousseau's Syndrome Patients (2018)
  • 著者名/発表者名: Ito Shinji、Kikuchi Koichi、Ueda Akihiro、Nagao Ryunosuke、Maeda Toshiki、Murate Kenichiro、Shima Sayuri、Mizutani Yasuaki、Niimi Yoshiki、Mutoh Tatsuro
  • 雑誌名: Frontiers in Neurology 巻: 9 ページ: -
  • DOI: 10.3389/fneur.2018.00528
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Anti-neutral glycolipids antibody-positive combined central and peripheral demyelination mimicking encephalomyeloradiculoneuropathy phenotype (2018)
  • 著者名/発表者名: Saito Kazuyuki、Toru Shuta、Shima Sayuri、Mutoh Tatsuro
  • 雑誌名: Clinical Neurology and Neurosurgery 巻: 172 ページ: 90～92
  • DOI: 10.1016/j.clineuro.2018.06.046
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Patient With Thiamine Deficiency Exhibiting Muscle Edema Suggested by MRI (2018)
  • 著者名/発表者名: Murate Kenichiro、Mizutani Yasuaki、Maeda Toshiki、Nagao Ryunosuke、Kikuchi Kouichi、Shima Sayuri、Niimi Yoshiki、Ueda Akihiro、Ito Shinji、Mutoh Tatsuro
  • 雑誌名: Frontiers in Neurology 巻: 9 ページ: -
  • DOI: https://doi.org/10.3389/fneur.2018.01083
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 抗GM1抗体が及ぼす神経系培養細胞の細胞膜への影響の解明． (2019)
  • 著者名/発表者名: 武藤多津郎、植田晃広、水谷泰彰、島さゆり
  • 学会等名: 平成30年度 神経免疫疾患のエビデンスによる診断基準・重要度分類・ガイドラインの妥当性と患者QOLの検証班 研究報告会
• [学会発表] Clioquinolの培養astrocyteに及ぼす作用の解明② (2019)
  • 著者名/発表者名: 武藤多津郎、水谷泰彰、新美芳樹、植田晃広、島さゆり、村手健一郎．
  • 学会等名: 平成30年度 スモンに関する調査研究班.研究報告会
• [学会発表] 特異な臨床像を呈したSpinocerebellar ataxia type 6 （SCA6）の１例． (2019)
  • 著者名/発表者名: 村手健一郎、坂野文彦、加藤邦尚、東篤宏、長尾龍之介、前田利樹、菊池洸一、廣田政古、石川等真、島さゆり、新美芳樹、水谷泰彰、植田晃広、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第153回日本神経学会東海北陸地方会
• [学会発表] Altered Serum Lysosomal Hydrolase Activities in Parkinson’s Disease. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshiki Niimi, Yasuaki Mizutani, Shinji Ito, Sayuri Shima, Akihiro Ueda, Tatsuro Mutoh.
  • 学会等名: American Academy of Neurology annual meeting
• [学会発表] Effects of clioquinol on autophagy-lysosome system in cultured astrocytes. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yasuaki Mizutani, Toshiki Maeda, Yoshiki Niimi, Ryunosuke Nagao, Sayuri Shima, Akihiro Ueda, Tatsuro Mutoh.
  • 学会等名: 第59回日本神経学会学術集会
• [学会発表] Altered regulation of serum lysosomal hydrolase activity in Parkinson's disease. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshiki Niimi, Toshiki Maeda, Kouichi Kikuchi, Ryunosuke Nagao, Kenichiro Murate, Seiko Hirota, Chika Hikichi, Tomomasa Ishikawa, Yasuaki Mizutani, Sayuri Shima, Akihiro Ueda, Shinji Ito, Wataru Satake, Nobutaka Hattori, Tatsushi Toda and Tatsuro Mutoh.
  • 学会等名: 第59回日本神経学会学術集会
• [学会発表] ALS患者におけるMRIを用いた末梢神経系の可視化・定量の試み. (2018)
  • 著者名/発表者名: 長尾龍之介、石川等真、新美芳樹、菊池洸一、前田利樹、村手健一郎、廣田政古、引地智加、水谷泰彰、島さゆり、植田晃広、伊藤信二、村山和宏、外山宏、武藤多津郎.
  • 学会等名: 第59回日本神経学会学術集会
• [学会発表] 髄液中の抗中性糖脂質抗体が経過中に陽性になったEMRN（脳脊髄根末梢神経炎）の１例. (2018)
  • 著者名/発表者名: 前田利樹、伊藤信二、坂野文彦、加藤邦尚、東篤宏、菊池洸一、長尾龍之介、村手健一郎、廣田政古、引地智加、石川等真、新美芳樹、水谷泰彰、島さゆり、植田晃広、武藤多津郎.
  • 学会等名: 第151回日本神経学会東海北陸地方会
• [学会発表] 髄液糖の低下が持続し、再発を繰り返したEncephalomyeloradiculoneuropathy(EMRN)の1例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 松本雄志、岩永育貴、池添浩二、島さゆり、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第104回日本神経学会中国・四国地方会
• [学会発表] 肺小細胞癌への化学療法が自律神経症状に有効であった、抗ganglionicアセチルコリン受容体抗体陽性の自己免疫性自律神経節障害の１例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 廣田政古、伊藤信二、植田晃広、坂野文彦、加藤邦尚、東篤宏、菊池洸一、長尾龍之介、前田利樹、村手健一郎、引地智加、石川等真、島さゆり、水谷泰彰、新美芳樹、中根俊成、安東由喜雄、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第30回日本神経免疫学会学術集会
• [学会発表] 意識障害、四肢筋力低下、自律神経障害を呈し、抗SS-B抗体、血清・髄液中の抗LacCer抗体陽性であった脳脊髄根末梢神経炎の症例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 桐山敬生、小原啓弥、七浦仁紀、西森裕佳子、江浦信之、岩佐直毅、形岡博史、島さゆり、武藤多津郎、杉江和馬．
  • 学会等名: 第30回日本神経免疫学会学術集会
• [学会発表] 左真菌性中耳炎・錐体骨炎から両側の肥厚性硬膜炎と脳神経麻痺を来した1例感染症. (2018)
  • 著者名/発表者名: 前田利樹、坂野文彦、加藤邦尚、東篤宏、菊池洸一、長尾龍之介、村手健一郎、廣田政古、石川等真、新美芳樹、水谷泰彰、島さゆり、植田晃広、伊藤信二、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第23回日本神経感染症学会総会・学術大会
• [学会発表] 大腸菌性髄膜脳炎に下垂体膿瘍を合併し、汎下垂体機能低下症を呈した成人例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 菊池洸一、坂野文彦、加藤邦尚、東篤宏、前田利樹、長尾龍之介、村手健一郎、廣田政古、石川等真、新美芳樹、水谷泰彰、島さゆり、植田晃広、伊藤信二、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第23回日本神経感染症学会総会・学術大会
• [学会発表] 髄液中の抗中性糖脂質抗体を追跡し得たEncephalomyeloradiculoneuropathy(EMRN)の２例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 七浦仁紀、形岡博史、島さゆり、小原啓弥、福島功士、岩佐直毅、江浦信之、武藤多津郎、杉江和馬．
  • 学会等名: 第23回日本神経感染症学会総会・学術大会
• [学会発表] 血清抗体価がステロイド療法により経時的に減少した抗NF155抗体陽性CIDP の1例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 東篤宏、水谷泰彰、坂野文彦、加藤邦尚、菊池洸一、長尾龍之介、前田利樹、村手健一郎、廣田政古、引地智加、石川等真、島さゆり、新美芳樹、植田晃広、伊藤信二、海田賢一、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第152回日本神経学会東海北陸地方会
• [学会発表] 経過中抗中性糖脂質抗体の抗体価が変動した脳脊髄根末梢神経炎． (2018)
  • 著者名/発表者名: 島さゆり、水谷泰彰、植田晃広、村手健一郎、前田利樹、長尾龍之介、菊池洸一、加藤邦尚、坂野文彦、東篤宏、廣田政古、石川等真、引地智加、新美芳樹、伊藤信二、武藤多津郎．
  • 学会等名: 第36回日本神経治療学会学術集会
• [学会発表] 呼吸苦を契機に入院し，免疫治療が奏功した抗中性糖脂質抗体陽性脳脊髄根末梢神経炎（EMRN）の一例． (2018)
  • 著者名/発表者名: 西森裕佳子、岩佐直毅、江浦信之、桐山敬生、島さゆり、武藤多津郎、杉江和馬．
  • 学会等名: 第222回日本内科学会近畿地方会