研究課題
①ALS/FTLDモデルマウスに対するリボソーム蛋白質の保護効果の解析ALS/FTLDモデルマウスを用いたリボソーム蛋白質の発現増加による神経保護効果を検証するため、患者関連変異型TDP-43およびリボソーム蛋白質翻訳促進因子である遺伝子Xを発現するアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを生直後のマウス側脳室内に投与し、TDP-43過剰発現による運動症状出現の有無を経時的に観察した。投与後1年経った時点で変異型TDP-43発現マウスで運動麻痺症状が出現し始めており、今後引き続き観察を行う。遺伝子X発現マウスでは特に明らかな症状はみられていない。合わせて患者関連変異型TDP-43トランスジェニックマウスをJackson Laboratoryより導入し運動症状出現の有無を観察した。明らかな運動症状の出現なしに死亡する個体がみられ、今後他のトランスジェニックマウスの導入を含めた検討を行う。またリボソーム蛋白質の発現を増加させる既存薬をリボソーム蛋白質遺伝子プロモーター領域を用いたルシフェラーゼレポーターアッセイを構築してライブラリーからのスクリーニングにより行い、約20種類の薬剤でリボソーム蛋白質の発現が3倍以上に増加することを確認した。②ALS/FTLD患者剖検組織における局所蛋白質翻訳能障害と神経変性機構の解析ALS/FTLD患者剖検組織として延髄錐体より運動神経軸索を採取し、リボソーム蛋白質mRNAの量を定量PCRにより測定したところ、複数のリボソーム蛋白質mRNAが有意にALS/FTLD患者群で減少していることを確認した。
3: やや遅れている
ALS/FTLDモデルマウスの確立およびその症状観察、病理学的解析に時間がかかっており、引き続きいくつかの方法を用いて確立を目指す。
今後他系統の導入も含めたALS/FTLDモデルマウスの確立を行うとともに、現在までに得られたリボソーム蛋白質発現促進薬剤のALS/FTLD治療薬としての可能性につき、in vitro、in vivoでのALS/FTLDモデルを用いた保護効果の確認により検証していく。
(理由)ALS/FTLDモデルマウスの確立、リボソーム蛋白質発現促進化合物のスクリーニングにやや手間取っており、その解析に必要な経費の支出がまだ行われておらず、支出額が当初計画よりも少なかった。(使用計画)次年度は効率的に研究を進め、本年度分と合わせて経費を支出する予定である。
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