研究課題
白色脂肪組織（WAT）の褐色化（Browning）は、褐色脂肪細胞の活性化同様、肥満予防と治療の標的である。本研究は、TNFα-converting enzyme (TACE；TNFα変換酵素）によるWATのBrowning抑制の分子機序を解明、TACE活性亢進によりWATのBrowning抑制が、逆にTACE活性抑制によりWATのBrowning促進が起こることを明らかとする。さらに申請者が明らかとした肥満糖尿病動物における短鎖脂肪酸（short-chain fatty acids; SCFA）による内臓脂肪組織（visceral WAT; VAT）の不完全なBrowningを、SCFA刺激とTACE活性抑制とを同時に達成することで完全なるVATのBrowningを誘導できることを証明することを目指している。今年度、WATにおけるTNFαとTACEの局在を解析し、両分子が成熟脂肪細胞画分とstromal vascular fraction（SVF画分）の両画分に存在すること、肥満の進行により両分子の発現が上昇することを明らかとした。動物レベルにてTACEの活性状態がBrowningに如何に影響するか調べるため、TACE活性化薬および阻害薬を肥満および対照マウスに投与しWATを含む各種の臓器を単離した。細胞レベルでは、3T3-L1細胞あるいはマウス脂肪組織SVFから分化・誘導させた脂肪細胞を短鎖脂肪酸の存在・非存在下に培養し、TACE活性化薬あるいは阻害薬を添加して、Browningに如何に影響するか解析した。TACE shRNA Lentiviral Particlesを脂肪細胞に導入し、短鎖脂肪酸によるBrowningに如何に影響するか検討した。さらに、培養マクロファージ細胞に対照およびTACE shRNA Lentiviral Particlesを導入し、トランスウェルにて隔てたマウスSVF由来脂肪細胞の短鎖脂肪酸によるBrowningに如何に影響するか検討した。
2: おおむね順調に進展している
TACE阻害薬によるブラウニングの促進がmRNAレベルおよび蛋白レベルで確認できており、順調に進展していると思われる。
今後も研究計画に従い、実験を進めていく。コンディショナルTACEノックアウトマウスおよび対照マウスの入手を進め、イソプロテレノール、短鎖脂肪酸、寒冷刺激、等によるブラウニングへのTACEの関与を解析していく。
理由： 今回使用できなかった金額は82円と僅かで、試薬等の必要物品購入には不足したため。使用計画： 今回使用できなかった金額82円は、次年度助成金と合わせ、必要物品等の購入に当てる。
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