研究課題
褐色脂肪組織やベージュ脂肪組織での熱産生には、糖や脂肪が燃料として必要であることが知られているので、コントロールマウスと脂肪特異的Pin1 KOマウスを用い、寒冷刺激後の血糖値や血清トリグリセリド含量等を調べた。その結果、両群のマウスに差は認められなかった。また、Pin1が褐色脂肪細胞やベージュ脂肪細胞の脂肪分化に影響を与えるかを検討するために、マウスよりstromal vascular fractionsを分取し、定法に従い脂肪分化を誘導した。その結果、Pin1は両脂肪組織の脂肪分化には影響を与えなかった。また、前年度の研究によりPin1が転写共役因子のPRDM16と結合し、その蛋白発現を減少させることが認められたので、そのメカニズムについてさらに検討した。プロテアソーム阻害剤であるMG-132で処理するとPin1過剰発現によるPRDM16の発現量減少は抑制された。さらに、Pin1をノックダウンするとPRDM16のポリユビキチン化が減少することも明らかとなった。以上より、Pin1はPRDM16のポリユビキチン化を促進し、プロテアソームによる分解を促進していると考えられた。Pin1は、標的蛋白のpSer/pThr-Proを含むモチーフに結合する。従ってPRDM16がリン酸化されている必要があり、そのキナーゼの同定を試みた。しかしながら、各種キナーゼ阻害剤を用いてPin1とPRDM16の結合抑制を指標に探索したが、キナーゼの同定には至らなかった。また、脂肪組織のPin1が糖代謝に影響を与えるかを検討したところ、普通食時には両群に差は認められなかったが、高脂肪食時にはPin1 KOマウスで耐糖能の改善が認めれた。
2: おおむね順調に進展している
Pin1を介したPRDM16の蛋白発現調節のメカニズムについて明らかにできたとともに、脂肪組織のPin1が糖代謝に重要であることを明らかにできたため。
①今年同定できなかったPRDM16をリン酸化するキナーゼの同定について、阻害剤ライブラリーを用いて同定を試みる②褐色脂肪やベージュ脂肪細胞でのPRDM16以外のPin1結合蛋白の同定を試みる。③UCP-1非依存性熱産生にPin1が関与するかを検討する。
Pin1を介したPRDM16の機能調節の解析とコンディショナルノックアウトマウスの解析が予想以上に順調に進んだ。そのため、次年度に持ち越した分があるが、キナーゼ阻害剤ライブラリーを用いたキナーゼの同定やLC-MS/MSによるリン酸化部位の検出、プロテオミクスによる新規Pin1結合蛋白の同定に使用する。
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すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (7件)
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