| 研究実績の概要 |
高脂肪食負荷C57BL6マウス、IRS-1欠損マウス、IRS-2欠損マウスを用いた検討において、Dehydroepiandrosterone(DHEA)投与により肝臓のインスリン刺激性のAktのリン酸化は亢進した(Aoki K et al.J Steroid Biochem Mol Biol, 2016)。しかし、高脂肪食負荷C57BL6マウスではAndrostenedione投与により肝臓のインスリン刺激性のAktのリン酸化は亢進しなかった。また、我々は、db/dbマウスの初代培養細胞にDHEAとDHEA-Sを添加すると糖新生がそれぞれ抑制されることを以前報告した(Aoki K et al. Life Sci, 2004)。
今回、普通食投与C57BL6マウスから初代培養肝細胞を作成しAktのリン酸化を検討した。培地に、DHEAを24時間添加し、pAkt、Aktをウエスタンブロット法にて定量し、コントロール、DHEA1μM、DHEA10μM群で比較検討した。その結果、in vivoとは異なり、コントロールに比してDHEA添加によるAktのリン酸化の亢進は認めなかった。次に、初代培養肝細胞にDHEA-Sを24時間添加し、コントロール、DHEA-S 1μM、DHEA-S 10μM群間でAktのリン酸化を比較した。その結果、コントロールに比してDHEA-S添加によるAktのリン酸化の亢進は認めなかった。Androstenedioneでも同様の検討を行い、コントロール、Androstenedione 1μM、Androstenedione 10μM群で比較検討した。その結果、Androstenedione 1μM群でAktのリン酸化の亢進が認めたが、10μM群では認めなかった。
本検討では、C57BL6マウスの初代培養肝細胞においてDHEA、DHEA-S添加によるAktのリン酸化亢進は認めなかった。現在、db/dbマウスの初代培養肝細胞を作成して、Aktのリン酸化の検討を行っている。
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