| 研究課題/領域番号 |
16K09818
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| 研究機関 | 国立研究開発法人国立循環器病研究センター |
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研究代表者 |
吉田 守克 国立研究開発法人国立循環器病研究センター, 研究所, 上級研究員 (70393212)
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| 研究分担者 |
宮里 幹也 国立研究開発法人国立循環器病研究センター, 研究所, 部長 (50291183)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 内分泌 / 生理活性ペプチド / Rhoキナーゼ / オーファンGPCR / 摂食・エネルギー代謝 |
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| 研究実績の概要 |
過食と消費エネルギー低下により生じる肥満は、インスリン抵抗性や糖尿病、脂質異常症、高血圧等の生活習慣病を発症する主要な危険因子であり、これらの集積が動脈硬化疾患の発症・進展に大きく寄与する。近年、低分子量GTP結合タンパク質Rhoのエフェクター分子であるRhoキナーゼ（ROCK）がインスリン及びレプチンシグナルを制御することにより、心血管疾患を含めた生活習慣病において重要な役割を果たすことが相次いで報告されている。
生理活性ペプチドをリガンドとする受容体の多くはGタンパク質共役型受容体（GPCR）であり、内因性リガンドの不明なオーファンGPCR遺伝子が数多く存在する。リガンドが結合したGPCRは共役するGタンパク質によって異なる細胞内シグナルを伝達する。Gα12/13に共役するGPCRはRho-ROCK経路を活性化するが、高感度かつ効率的な活性検出は困難であった。そのため、GPCRを受容体とするROCK活性化因子やGα12/13シグナルからROCKを介したインスリン・レプチンシグナルへのクロストーク、それに伴う肥満及び糖脂質代謝改善に対する検証は遅れている。
本研究では、摂食やエネルギー代謝、糖脂質代謝を制御する未知の生理活性ペプチドを同定し、細胞や個体レベルでの機能解析を行い、新たな食欲・脂肪蓄積調節機構を解明することを目的とする。
平成２９年度は、Gα12/13シグナルを検出するための手法として昨年度構築したTGFα切断アッセイを活用し、オーファンGPCRに対する内因性リガンド探索を実施した。オーファンGPCRは、摂食やエネルギー代謝、糖脂質代謝を制御する視床下部や骨格筋、肝臓、脂肪組織のいずれかに発現の高い受容体を標的とした。標的受容体を培養細胞に発現させ、組織抽出物を作用させ、TGFα切断アッセイを実施したが、標的受容体特異的な活性検出には至っていない。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
TGFα切断アッセイを実施したが、組織抽出物からの標的受容体特異的な活性検出には至っていないため。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、共役するGタンパク質に依存しない新たな活性検出系（EnSightアッセイ）の導入や発現細胞の変更等を行い、引き続き内因性リガンド探索を実施する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
（理由）
研究計画実施において、消耗品が当初予算額より低価格にて実施できたため、消耗品費の支出が低減できた。また、研究のための情報取集および研究打合せの回数が予定よりも少なかったため、旅費支出も少ない額となった。
（使用計画）
次年度の消耗品の使用の予定が増えることが予想されるため、物品費に充当する予定である。
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