細胞内コレステロールを標的とする新規の白血病治療法の開発

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K09851
• 研究機関: 佐賀大学
• 研究代表者: 久保田 寧 佐賀大学, 医学部, 病院講師 (60570413)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: シクロデキストリン

研究実績の概要

難溶性医薬品の溶媒である2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン (HP-β-CyD) が、慢性骨髄性白血病 (CML) 細胞からコレステロールを引き抜き、CML細胞のみならずCML幹細胞にも抗腫瘍作用を示す可能性を見出した (PLoS One. 2015)。本研究では、HP-β-CyDの作用機序をより明確にするとともに、最近の治療法の進歩に乏しい急性骨髄性白血病 (AML) に対する効果についても検討する。さらに臨床応用に向けて、より高い効果を得るために、葉酸など各種修飾を加えたHP-β-CyD の効果についても調べる。
本年度はまず、HP-β-CyDの細胞増殖抑制作用がCMLのみではなく他の白血病細胞株でもみられるのかどうかについて調べた。急性骨髄性白血病細胞株HL-60、急性リンパ性白血病細胞株NALM6、T細胞性白血病細胞株Jurkat、MOLT4、成人T細胞白血病細胞株MT1、MT2それぞれでMTTアッセイを行った。いずれの細胞株もIC50は4－8mMであり、対照として用いた肝細胞より有意に低い濃度であった。次にこれらの細胞がCML細胞株と同様にHP-β-CyD曝露によって細胞周期停止をきたすかどうか調べた。その結果、CML細胞株と同じようにG2/M期で細胞周期が停止することがわかった。今後は急性骨髄性白血病細胞を主要なターゲットとして実験を進めていく予定としている。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

良質の細胞株をそろえること、試薬の調整に時間を要したことからやや遅れている。

今後の研究の推進方策

研究計画のとおりに急性骨髄性白血病細胞株に対するシクロデキストリンの抗白血病作用の検証を引き続き行っていく。葉酸修飾シクロデキストリンについてもその効果を調べる。

次年度使用額が生じた理由

今年度は、あまり高額な試薬や設備を必要とする実験系を組むことが少なかったことが次年度使用額が生じた大きな要因と考える。次年度は、より多数の細胞株についてそれぞれアッセイを行っていくこと、またin vivoでのマウス白血病モデルを使っての実験を計画していることから、免疫不全マウス購入費や飼育費に多額の費用が必要になるものと想定される。

次年度使用額の使用計画

今年度は、あまり高額な試薬や設備を必要とする実験系を組むことが少なかったことが次年度使用額が生じた大きな要因と考える。次年度は、より多数の細胞株についてそれぞれアッセイを行っていくこと、またin vivoでのマウス白血病モデルを使っての実験を計画していることから、免疫不全マウス購入費や飼育費に多額の費用が必要になるものと想定される。白血病モデルについては、可能であれば実際の患者さんの細胞を用いたPTXモデルを樹立したい。その場合には、超免疫不全マウスが必要である。

研究成果

• [雑誌論文] The novel BMI-1 inhibitor PTC596 downregulates MCL-1 and induces p53-independent mitochondrial apoptosis in acute myeloid leukemia progenitor cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Nishida Y, Maeda A, Kim MJ, Cao L, Kubota Y, Ishizawa J, AlRawi A, Kato Y, Iwama A, Fujisawa M, Matsue K, Weetall M, Dumble M, Andreeff M, Davis TW, Branstrom A, Kimura S, Kojima S.
  • 雑誌名: Blood Cancer J 巻: 7 ページ: e527
  • DOI: 10.1038/bcj.2017.8.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The MEK inhibitor trametinib separates murine graft-versus-host disease from graft-versus-tumor effects. (2016)
  • 著者名/発表者名: Itamura H, Shindo T, Tawara I, Kubota Y, Kariya R, Okada S, Komanduri KV, Kimura S.
  • 雑誌名: JCI insight 巻: 1 ページ: e86331
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Subdural Hematoma Associated with Dasatinib and Intrathecal Methotrexate Treatment in Philadelphia Chromosome-positive Acute Lymphoblastic Leukemia. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ureshino H, Nishioka A, Kojima K, Kizuka H, Sano H, Shindo T, Kubota Y, Ando T, Kimura S.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 55 ページ: 2703-2706
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.6966.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Famotidine-induced reactive plasmacytosis and generalized lymphadenopathy: a case report and review of the literature. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hiroaki Kitamura, Yasushi Kubota, Noriyasu Fukushima, Tatsuo Ichinohe, Daisuke Hayasaka, Kazuharu Kamachi, Mari Yoshihara, Hidekazu Itamura, Takashi Hisatomi, Kazuo Wakayama, Eisaburo Sueoka, Shinya Kimura
  • 雑誌名: Int J Clin Exp Pathol 巻: 9 ページ: 7680-7685
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Rituximab-induced Acute Thrombocytopenia in High Tumor Burden Follicular Lymphoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ureshino H, Nishioka A, Kojima K, Suzuki M, Kizuka H, Sano H, Shindo T, Kubota Y, Ando T, Kimura S.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 55 ページ: 2061-2064
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.6140.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Reversible Liver Steatosis Induced by Chemotherapy of Mixed-phenotype Acute Leukemia. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishioka A, Kubota Y, Sueoka E, Kimura S.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 55 ページ: 1025-1026
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.5685.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Domino-Style Cerebral Bleeding in a Patient With Immune Thrombocytopenic Purpura. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kitamura H, Shindo T, Yakushiji Y, Yoshihara M, Eriguchi M, Kubota Y, Noguchi T, Kimura S.
  • 雑誌名: JAMA Neurol 巻: 73 ページ: 474-475
  • DOI: 10.1001/jamaneurol.2015.4508.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acute myeloid leukemia with t(3;8)(q26;q24) complicated by diabetes insipidus. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kubota Y, Ichinohe T, Yoshimura M, Itamura H, Hisatomi T, Fukushima N, Sueoka E, Kimura S.
  • 雑誌名: Ann Hematol 巻: 95 ページ: 653-655
  • DOI: 10.1007/s00277-016-2595-0.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 赤芽球癆と胸腺過形成 (2016)
  • 著者名/発表者名: 久保田 寧
  • 雑誌名: Medical Practice 巻: 33 ページ: 1822
• [雑誌論文] 移植医療における輸血関連検査 輸血とHLA (human leukocyte antigen) 検査について (2016)
  • 著者名/発表者名: 山田尚友、山田麻里江、中尾真実、久保田寧、末岡榮三朗
  • 雑誌名: 日本検査血液学会雑誌 巻: 17 ページ: 434-440
  • 査読あり
• [学会発表] The novel BMI-1 inhibitor PTC596 induces p53-independent apoptosis in AML progenitor cells (2016)
  • 著者名/発表者名: 西田有毅, 前田綾, 久保田寧, 木村晋也, 小島研介
  • 学会等名: 第78回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-15
• [学会発表] 脾摘後に自然寛解し2年後に再発したCD5陽性びまん性大細胞型B細胞リンパ腫 (2016)
  • 著者名/発表者名: 佐野 晴彦, 安藤 寿彦, 久保田 寧, 西岡 敦二郎, 木塚 遥菜, 嬉野 博志, 進藤 岳郎, 小島 研介, 大島 孝一, 木村 晋也
  • 学会等名: 第78回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-15
• [学会発表] 広範な皮下血腫と高度の貧血を呈した真性多血症と第XIII/13因子(F13)欠乏症の合併症例 (2016)
  • 著者名/発表者名: 嬉野 博志, 木塚 遥菜, 佐野 晴彦, 西岡 敦二郎, 進藤 岳郎, 久保田 寧, 安藤 寿彦, 尾崎 司, 惣宇利 正善, 片山 義雄, 小島 研介, 一瀬 白帝, 木村 晋也
  • 学会等名: 第78回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-15
• [学会発表] 輸血とHLA検査について (2016)
  • 著者名/発表者名: 山田 尚友, 山田 麻里江, 中尾 真実, 久保田 寧, 末岡 榮三朗
  • 学会等名: 第17回日本検査血液学会学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
  • 年月日: 2016-08-06 – 2016-08-07
• [学会発表] The novel BMI-1 inhibitor PTC596 induces apoptosis in a p53-independent manner and targets immature AML cells (2016)
  • 著者名/発表者名: 西田有毅, 前田綾, 久保田寧, 木村晋也, 小島研介
  • 学会等名: 日本がん分子標的治療学会
  • 発表場所: 別府国際コンベンションセンター
  • 年月日: 2016-05-30 – 2016-06-01
• [学会発表] 同種血輸血における免疫担当細胞の動態に関する解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 山田 麻里江, 山田 尚友, 中尾 真実, 東谷 孝徳, 久保田 寧, 木村 晋也, 末岡 榮三朗
  • 学会等名: 第64回日本輸血・細胞治療学会総会
  • 発表場所: 京都国際会館
  • 年月日: 2016-04-28 – 2016-04-30
• [学会発表] 少量リバビリン経口投与により軽快した臍帯血移植後播種性アデノウイルス感染症 －末梢血リンパ球数と治療効果の関連－ (2016)
  • 著者名/発表者名: 佐野 晴彦, 久保田 寧, 北村 浩晃, 嬉野 博志
  • 学会等名: 第90回日本感染症学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2016-04-15 – 2016-04-16
• [備考] 佐賀大学医学部 血液・呼吸器・腫瘍内科
  • URL: http://www.saga-hor.jp/main/1.html