| 研究課題/領域番号 |
16K09978
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| 研究機関 | 千葉県がんセンター(研究所) |
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研究代表者 |
越川 信子 千葉県がんセンター(研究所), がん遺伝創薬研究室, 主席研究員 (90260249)
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| 研究分担者 |
渡部 隆義 千葉県がんセンター(研究所), がん研究開発グループ, 研究員 (60526060)
永瀬 浩喜 千葉県がんセンター(研究所), がん遺伝創薬研究室, 研究所長 (90322073)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | mtDNA 変異 / PIポリアミド / A3243G変異 / ミトコンドリア病 |
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| 研究実績の概要 |
代表的なミトコンドリア病である、MELAS（乳酸アシドーシスと脳卒中様症状を伴うミトコンドリア脳筋症）の病因と深く関連するとされるミトコンドリアDNA (mtDNA) 変異 A3243Gを標的とするPIP（ピロールイミダゾール・ポリアミド）を複数合成し、さらにミトコンドリア内膜へ送達するためTriphenyl- phosphonium (TPP)カチオンを結合したPIP-TPPを作成した。従来のヘアピン型の他、ヘアピン型の半分の長さで直鎖型のPIP-TPPを合成した。ヘアピン型のPIP-TPPを合成DNAを用いてBiacoreでその結合能を調べた。すると、野生型のmtDNA変異を含むDNAsequenceに比べ、変異型のmtDNA sequenceに対して、約60倍の結合能があることがわかった。これらのPIP-TPPを標的変異mtDNA A3243Gを82%有する細胞、55%有する細胞、および野生型mtDNAを有する細胞に処理した。その結果、ヘアピン型、直鎖型両方でA3243G変異を持つ細胞で細胞増殖抑制効果が認められた。細胞増殖抑制能は、A3243Gの含有量が多い細胞で強く、同変異の無い細胞では認められなかった。さらに、A3243G変異を80%以上有する細胞系で、短期間PIP-TPP処理し、LC3と Cytochrome Cの共染色によってA3243Gの含有量が多い細胞でmitophagyの増加が確認された。この結果から、mitophagyを起こしている細胞がA3243Gを持つ細胞で、正常mtDNAを持つ細胞が残存するかを検討することが必要であることから、変異mtDNAの割合の低い細胞系を用い同様の実験を行うとともに低濃度のPIP-TPPのA3243G変異細胞への長期投与が必要であると考え、現在研究を続行している。
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