MLL転座型白血病の白血病幹細胞の機能的マーカー探索と治療応用に向けた基礎的研究

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K10030
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 江口 真理子 愛媛大学, 医学系研究科, 准教授 (40420781)
• 研究分担者: 石井 榮一 愛媛大学, 医学系研究科, 教授 (20176126) ; 江口 峰斉 愛媛大学, 医学部附属病院, 准教授 (50420782)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: MLL融合遺伝子 / 白血病 / 白血病幹細胞

研究実績の概要

MLL融合遺伝子を有する白血病幹細胞の骨髄内での維持・増殖のメカニズムの解明を目指し、MLL融合遺伝子を有するヒト白血病細胞のマウス移植モデルを用いて解析を行った。MLL-AF4陽性白血病細胞において、TWEAK受容体であるFN14 (TNFRSF12A)の両アレルをノックアウトした白血病細胞株を作製した。この白血病細胞株を免疫不全マウスに移植し、骨髄への生着能や増殖能について検討した。FN14ノックアウト白血病細胞はコントロールの白血病細胞と同様に免疫不全マウスの骨髄に生着し、白血病を発症させる能力を保持していた。今後マウス骨髄中でのFN14ノックアウト細胞の局在や、遺伝子発現パターンの変化について検討を行い、MLL融合遺伝子陽性白血病におけるFN14による影響を解析し、治療標的としての可能性を検討したい。
またMLL融合遺伝子を有するマウスES細胞から得られた未分化造血細胞を用いて、MLL融合遺伝子が造血前駆細胞を白血病化するために必要な遺伝子変異の同定を試みた。白血病細胞への進展に必要な付加異常を導入するために、MLL融合遺伝子を有するマウスES細胞を未分化造血細胞を含むTie2陽性細胞へ分化させた後、インサートを持たないMSCVレトロウイルスベクターを導入した、ランダムな挿入変異を導入した。免疫不全マウスへの移植により腫瘍の形成が認められ、腫瘍細胞からDNAを抽出し、inverse PCR法によりレトロウイルスの挿入部位を同定した。レトロウイルス挿入部位の多くは遺伝子の上流に位置しており、挿入部位近傍の遺伝子の発現亢進が認められた。これらの結果よりMLL-AF4による細胞の腫瘍化には2nd hitの付加異常が必要であると考えられた。今後挿入部位近傍に存在し、発現上昇が認められた遺伝子の白血病化における意義を検討したい。

研究成果

• [雑誌論文] Early detection of the PAX3-FOXO1 fusion gene in circulating tumor-derived DNA in a case of alveolar rhabdomyosarcoma (2019)
  • 著者名/発表者名: Eguchi-Ishimae M, Tezuka M, Kokeguchi T, Nagai K, Moritani K, Yonezawa S, Tauchi H, Tokuda K, Ishida Y, Ishii E, Eguchi M
  • 雑誌名: Genes Chromosomes Cancer 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: doi:10.1002/gcc.22734
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prolonged adrenal insufficiency after high-dose glucocorticoid in infants with leukemia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Moritani K, Nagai K, Ochi F, Yonezawa S, Takemoto K, Tokuda K, Tauchi H, Eguchi-Ishimae M, Eguchi M, Ishii E
  • 雑誌名: Pediatr Hematol Oncol 巻: 35 ページ: 355-361
  • DOI: 10.1080/08880018.2018.1539148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Usefulness of positron emission tomography-CT for diagnosis of primary bone marrow lymphoma in children. (2018)
  • 著者名/発表者名: Moritani K, Nakano N, Yonezawa S, Ochi F, Tauchi H, Eguchi-Ishimae M, Eguchi M, Ishii E, Nagai K
  • 雑誌名: Pediatr Hematol Oncol 巻: 35 ページ: 125-130
  • DOI: 10.1080/08880018.2018
• [雑誌論文] Exon skipping in CYBB mRNA and skewed inactivation of X chromosome cause late-onset chronic granulomatous disease (2018)
  • 著者名/発表者名: Eguchi Mariko、Yagi Chihiro、Tauchi Hisamichi、Kobayashi Masao、Ishii Eiichi、Eguchi-Ishimae Minenori
  • 雑誌名: Pediatric Hematology and Oncology 巻: 35 ページ: 341～349
  • DOI: 10.1080/08880018.2018.1522402
  • 査読あり
• [雑誌論文] Manifestation of recessive combined D‐2‐, L‐2‐hydroxyglutaric aciduria in combination with 22q11.2 deletion syndrome. (2018)
  • 著者名/発表者名: Eguchi M, Ozaki E, Yamauchi T, Ohta M, Higaki T, Masuda K, Imoto I, Ishii E, Eguchi-Ishimae M
  • 雑誌名: Am J Med Genet Part A 巻: 176 ページ: 351-358
  • DOI: 10.1002/ajmg.a.38578
  • 査読あり
• [雑誌論文] 乳児白血病の病態解明と治療研究の変遷 (2018)
  • 著者名/発表者名: 石井榮一、江口真理子、石前峰斉
  • 雑誌名: 日本小児血液・がん学会雑誌 巻: 55 ページ: 345-351
• [雑誌論文] ゲノム研究の臨床応用-小児科学講座における取り組み- (2018)
  • 著者名/発表者名: 江口真理子、石前峰斉、石井榮一
  • 雑誌名: 愛媛医学 巻: 37 ページ: 124-130
• [学会発表] Leukemogenic pathway of MLL-AF4 fusion-positive acute lymphoblastic leukemia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Eguchi M, Eguchi-Ishimae M, Iwabuki H, Ishii E
  • 学会等名: Global Summit on Hematologic Malignancies
  • 国際学会
• [学会発表] 当院における小児固形腫瘍4例に使用した末梢血幹細胞採取におけるプレリキサホルの有効性と安全性について (2018)
  • 著者名/発表者名: 永井功造、森谷京子、手束真理、田内久道、石前峰斉、江口真理子、石井榮一
  • 学会等名: 第60回日本小児血液がん学会
• [学会発表] 小児急性リンパ性白血病におけるFGFR1の高発現 (2018)
  • 著者名/発表者名: 江口真理子、石前峰斉、森谷京子、永井功造、米澤早知子、手束真理、田内久道、石井榮一
  • 学会等名: 第80回日本血液学会
• [学会発表] 網羅的遺伝子解析により診断したD-2-hydroxyglutaric aciduriaとIDH2変異によるTリンパ球のクローナルな増殖 (2018)
  • 著者名/発表者名: 江口真理子、相原香織、尾崎依里奈、村尾紀久子、中野直子、高田秀実、石前峰斉、石井榮一
  • 学会等名: 第63回日本人類遺伝学会
• [学会発表] MLL-AF4転座型急性リンパ性白血における付加的遺伝子異常の意義 (2018)
  • 著者名/発表者名: 江口真理子、石前峰斉
  • 学会等名: 第77回日本癌学会総会
• [学会発表] Fn14(Fibroblast growth factor-inducible 14)はIgA腎症において、糸球体病変形成の早期から関与している (2018)
  • 著者名/発表者名: 手塚優子、石前峰斉、尾崎依里奈、伊藤敏恭、石井榮一、江口真理子
  • 学会等名: 第53回日本小児腎臓病学会学術集会