| 研究実績の概要 |
動脈管における筋収縮制御タンパク質及び低分子量ヒートショックプロテイン（HSP）20、27のリン酸化の検討を、酸素又は窒素曝露したラット胎仔動脈管/主肺動脈、胎仔や成獣の下行大動脈（対照）を試料として、調製した抗体などを用いフォスタグ電気泳動法により進めた。HSP20は胎仔血管ではリン酸化を検出しなかったが、成獣ではリン酸化シフトが検出された。HSP27は、酸素や窒素曝露試料にリン酸化が検出された。トロポミオシン２は、動脈管と肺動脈のリン酸化のパターンが酸素・窒素曝露の前後で共に異なっており、動脈管の収縮制御に特別な関与をしている可能性が考えられた。
本研究の動脈管メタボロミクスの結果から、高濃度酸素曝露条件の動脈管には主肺動脈に比べてカルニチン、パントテン酸が豊富に存在することが判明している。これらはいずれも補酵素CoAの産生に寄与する。今年度は、カルニチン、パントテン酸並びにアセチルCoA関連酵素のmRNA発現量を、ラット満期胎仔動脈管（無処理、酸素又は窒素曝露）を試料として比較した。カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼI（Cpt1a 肝臓タイプ, Cpt1b 骨格筋タイプ, Cpt1c 脳タイプ）によりパルミチン酸などのアシル基がカルニチンに結合するが、この内Cpt1bが酸素曝露の動脈管でコントロールに比べて約6倍増加した。この他カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼII, カルニチン/アシルカルニチントランスロカーゼ, カルニチンアセチルトランスフェラーゼ, アセチルCoAトランスフェラーゼ、パントテン酸キナーゼなど10種以上を検討したが、酸素曝露により明らかな増加を示したものは、Cpt1bのみであった。この結果は、生後の動脈管における筋収縮とリモデリングに、ミトコンドリアへの長鎖脂肪酸輸送の増加をCpt1bが転写レベルで関与する可能性を示唆した。
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