研究課題
脳室周囲白質軟化症(PVL)は、早産児脳障害の一つで脳性麻痺の主因であり、未だ有効な治療法は確立されていない。 PVLの主病態は低酸素・虚血や感染による未熟なオリゴデンドロサイト(preOL)の細胞死とその後の分化障害と推測されている。 PVLに対する治療法の開発を目的として、我々のグループは低温療法が低酸素・虚血に対するpreOLの細胞死を軽減することをこれまで報告してきた。 一方、PVLの発症部位である脳白質にはpreOLだけでなく、グリア細胞の一つであるミクログリア(MG)が生理的に集積して脳発達に寄与している。病態下ではMGが炎症性サイトカインや脳保護因子を産生する機能が明らかになり、PVLに至る過程を修飾している可能性が報告されている。 今回、低温療法のpreOL保護効果にMGを介した仕組みがあるかどうかPVLのラットモデルにMGを除去できる薬剤クロドロネート含有リポソーム(Clo-lipo)を用いて調べた。 生後4日目SDラット右側脳室にリポソームを注射した。48時間後の生後6日目に低酸素虚血処置(左総頸動脈を結紮離断、酸素濃度6.0% 30分間暴露)を施行した。また、低酸素時期に合わせて、低体温(31±1.0℃)を導入した。処置5日後、ミエリン塩基性蛋白(MBP)の発現を指標として白質傷害の程度を組織学的に評価した。 リポソーム脳室注射48時間後、Clo-lipo群はコントロールリポソーム(Con-lipo)群と比較し、Iba1陽性細胞の数が有意に減少していた。低酸素虚血処置5日後、Clo-lipo＋低体温群では、Con-lipo＋低体温群と比較して、MBP染色が有意に脱落した。Clo-lipo群(MG除去群)で低温療法の保護効果が低下したことより、(1)低温療法はMGに作用すること、(2)MGが低温下で白質保護的に機能する可能性が推測された。
2: おおむね順調に進展している
野生型マウスでのPVL動物モデルの作成については、当初の予定とは異なり現在まで作成に至っていないものの、コモンマーモセットの施設内交配については目途がつきつつあり、出生後の麻酔下手術の手法についても確立しつつある。
ミクログリアのPVLへの関与の解明に向けた研究を継続して行う。 ミクログリアの数や形態変化の観察にとどまらず、ミクログリアの状態を表すマーカーとしてM1マーカー(細胞傷害、炎症性)であるIL-1β, iNOS, TNFやM2マーカー(細胞保護、抗炎症性)であるArginase-1, IL-10ならびにOL保護因子であるIGFに着目し、免疫組織学的染色やフローサイトメトリーを用いてミクログリアの機能解析を行う。また、PVL児の神経学的予後が不良な原因を解明するために、マウスを長期飼育してローターロッドなどを用いた行動実験を行い、ミクログリアの組織学的所見とマウスの表現型・発達所見を照合し、PVL発症後のミクログリアの機能解析を行う予定である。 ミクログリアの機能低下によりOLが成熟化できず神経機能障害という表現型になるのか、ミクログリア自体が異常活性化し細胞障害性作用を発揮してOLの成熟化を阻害しているのかなど、ミクログリアを主軸にPVLと脳発達の関係を解析する。さらに、本施設内に保有するコモンマーモセット(CM)の施設内繁殖系を用いて、CM新生仔の低酸素chamber飼育と一過性脳虚血モデルを確立させ、既に我々が発見した候補薬物の投与により中枢神経系への保護作用があるか否かを検討する。
当該年度における当初のPVLマウス動物モデルの飼育に際して、交配が予定通りに進行しなかった
本施設内に保有するコモンマーモセット(CM)の施設内繁殖系を用いて、CM新生仔の低酸素chamber飼育と一過性脳虚血モデルを確立させ、既に我々が発見した候補薬物の投与により中枢神経系への保護作用があるか否かを検討する。
すべて 2016
すべて 雑誌論文 (19件) (うち査読あり 10件) 学会発表 (15件) (うち招待講演 1件)
Sci Rep.
巻: 7 ページ: 40001
10.1038/srep40001
Prenat Diagn.
巻: 36 ページ: 1121-1126
10.1002/pd.4947.
J Hum Genet.
巻: 61 ページ: 995-1001
10.1038/jhg.2016.96.
巻: 61 ページ: 647-652
10.1038/jhg.2016.25.
J Obstet Gynaecol Res.
巻: 42 ページ: 148-157
10.1111/jog.12880.
日本遺伝カウンセリング学会誌
巻: 37 ページ: 11-20
埼玉産科婦人科学会雑誌
巻: 46 ページ: 184-189
巻: 46 ページ: 170-173
巻: 46 ページ: 61-66
関東連合産科婦人科学会誌
巻: 53 ページ: 147-152
周産期医学
巻: 46 ページ: 603-607
産婦人科の実際
巻: 65 ページ: 573-575
医学のあゆみ
巻: 258 ページ: 865-866
巻: 46 ページ: 1121-1123
日本医事新報
巻: 4831 ページ: 61
巻: 4836 ページ: 60
巻: 46 ページ: 88-90
巻: 46 ページ: 306-310
巻: 46 ページ: 376-379
