皮膚抗菌ペプチド発現異常の改善を利用した掌蹠膿疱症の治療開発

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K10128
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 村上 正基 愛媛大学, 医学系研究科, 准教授 (20278302)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 掌蹠膿疱症 / 抗菌ペプチド / hCAP-18 / TLN-58

研究実績の概要

表皮内水疱に生じているhCAP-18の異常フラグメントの同定を行うために、無細胞タンパク質合成法にてhCAP-18合成ペプチドを作製し、水疱内容物でincubationを行った後、改めて同定を試みたところ、TLN-58を同定することに成功した。MASCOTデータベース検索により理論的に考えられうるproteinaseの候補を複数絞り込み、表皮内に産生しうるproteinaseを用いて、hCAP-18の消化実験を行ったところ、neutrophilic elastase (ELA2)が有力候補として同定された。さらにこの酵素に対するproteinase inhibitorとしてα1 antitrypsinを用いたprocessingの抑制に成功した。TLN-58合成ペプチドを作製し、LSE（living skin equivalent, 3D 培養表皮）並びに汗管由来細胞 (NCL-SG3) に対する炎症誘導能に関する評価を行った。ヒト角化細胞及びLSEにおいては特にIL-8に関してLL-37に比べてさらに強力なmRNA及びprotein expressionを誘導することが明らかとなり、このfragmentが生成されることにより、より水疱が膿疱形成への傾向に動くことがあきらかとなった。マウスモデルにこの合成ペプチドを投与して炎症性サイトカインの発現を確認したところ、in vitroの実験と同様にサイトカインmRNA及びprotein expressionが確認された。このproteinase inhibitorが治療オプションとして有望視されたが、実際にマウスモデルにおけるproteinase inhibitorによる抑制実験では、結果として接触皮膚炎を生じ、むしろ炎症惹起性の結果となり、残念ながら外用剤による抑制効果の確認はできなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Diagnostic histopathological features distinguishing palmoplantar pustulosis from pompholyx (2019)
  • 著者名/発表者名: Masuda‐Kuroki Kana、Murakami Masamoto、Kishibe Mari、Kobayashi Satomi、Okubo Yukari、Yamamoto Toshiyuki、Terui Tadashi、Sayama Koji
  • 雑誌名: The Journal of Dermatology 巻: 46 ページ: 399～408
  • DOI: 10.1111/1346-8138.14850
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduced-HMGB1 suppresses poly(I:C)-induced inflammation in keratinocytes (2018)
  • 著者名/発表者名: Mori Hideki、Murakami Masamoto、Tsuda Teruko、Kameda Kenji、Utsunomiya Ryo、Masuda Kana、Shiraishi Ken、Dai Xiuju、Tohyama Mikiko、Nakaoka Hiroki、Sayama Koji
  • 雑誌名: Journal of Dermatological Science 巻: 90 ページ: 154～165
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2018.01.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy and Safety of Guselkumab, an Anti?interleukin 23 Monoclonal Antibody, for Palmoplantar Pustulosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Terui Tadashi、Kobayashi Satomi、Okubo Yukari、Murakami Masamoto、Hirose Keiichiro、Kubo Hiroshi
  • 雑誌名: JAMA Dermatology 巻: 154 ページ: 309～309
  • DOI: 10.1001/jamadermatol.2017.5937
  • 査読あり
• [雑誌論文] Heparinoid suppresses Der p-induced IL-1β production by inhibiting ERK and p38 MAPK pathways in keratinocytes (2018)
  • 著者名/発表者名: Utsunomiya Ryo、Dai Xiuju、Murakami Masamoto、Masuda Kana、Okazaki Hidenori、Tsuda Teruko、Mori Hideki、Shiraishi Ken、Tohyama Mikiko、Sayama Koji
  • 雑誌名: Experimental Dermatology 巻: 27 ページ: 981～988
  • DOI: 10.1111/exd.13685
  • 査読あり
• [雑誌論文] The microbiome of the “sterile” pustules in palmoplantar pustulosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Masuda-Kuroki Kana、Murakami Masamoto、Tokunaga Naohito、Kishibe Mari、Mori Hideki、Utsunomiya Ryo、Tsuda Teruko、Shiraishi Ken、Tohyama Mikiko、Sayama Koji
  • 雑誌名: Experimental Dermatology 巻: 27 ページ: 1372～1377
  • DOI: 10.1111/exd.13791
  • 査読あり
• [学会発表] New role of exogenous HMGB1 for human keratinocyte under acute inflammatory event. (2018)
  • 著者名/発表者名: Mori H, Murakami M, Utsunomiya R, Masuda K, Shiraishi K, Dai X, Tohyama M, Sayama.
  • 学会等名: International Investigative Dermatology Meeting
  • 国際学会
• [学会発表] The microbiome exists in the ‘sterile’ pustule of palmoplantar pustulosis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Masuda K, Murakami M, Tokunaga N, Kishibe M, Mori H, Utsunomiya R, Tsuda T, Shiraishi K, Tohyama M, Sayama K.
  • 学会等名: International Investigative Dermatology Meeting
  • 国際学会