胆管癌幹細胞の単離と新規治療標的の同定に関する研究

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K10592
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 石井 隆道 京都大学, 医学研究科, 特定病院助教 (70456789)
• 研究分担者: 安近 健太郎 京都大学, 医学研究科, 客員研究員 (00378895) ; 上本 伸二 京都大学, 医学研究科, 教授 (40252449) ; 河合 隆之 京都大学, 医学研究科, 客員研究員 (00813867)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 転移能 / 胆管癌 / 上皮間葉転換

研究実績の概要

当科における肝内胆管癌77例の手術検体を用いてCD90の発現を原発巣及びリンパ節転移巣に対して免疫組織学的染色を行い，臨床病理学的所見や予後との関連について検証した．さらにヒト肝内胆管癌細胞株を用いて，フローサイトメトリーで単離したCD90陽性/陰性細胞の特性解析を行った．
肝内胆管癌原発巣においてCD90の発現は77例中25例でみられた．CD90発現はリンパ節転移との有意な相関関係が認められた．さらに癌転移リンパ節についてもCD90で免疫染色を行ったところ，原発巣と転移リンパ節との間にCD90発現に関して相関性が見られた．生存分析ではCD90陽性症例は無再発生存期間，全生存期間ともに有意に短く， CD90発現は独立予後因子の一つであった．2つのヒト肝内胆管癌の細胞株を用いて解析したところ，分離したCD90陽性細胞は陰性細胞と比較し有意に高い遊走能を示した．また転移に関わる細胞機構とされる上皮間葉転換 (EMT) に関する遺伝子発現を定量PCRで確認したところ，CXCR4とMMP7の高発現を示した．CD90発現のノックダウンによりこれらの発現は低下した．CXCR4とMMP7はWnt/b-catenin signaling pathwayの標的遺伝子とされている．CD90陽性細胞で有意にWnt/b-catenin signaling活性が上昇していた．一方Wnt/b-catenin阻害薬をCD90陽性細胞に作用させると，CXCR4とMMP7の発現が低下した．
肝内胆管癌においてCD90発現細胞はin vitroではWnt/b-catenin signalingを介してEMT関連遺伝子を高発現し高い転移能を有していた．その結果in vivoではリンパ節転移のリスクが高くなり予後不良に関与すると考えられた．

研究成果

• [雑誌論文] CD90 expression in human intrahepatic cholangiocarcinoma is associated with lymph node metastasis and poor prognosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Yamaoka Ryoya、Ishii Takamichi、Kawai Takayuki、Yasuchika Kentaro、Miyauchi Yuya、Kojima Hidenobu、Katayama Hokahiro、Ogiso Satoshi、Fukumitsu Ken、Uemoto Shinji
  • 雑誌名: Journal of Surgical Oncology 巻: 118 ページ: 664～674
  • DOI: 10.1002/jso.25192
  • 査読あり
• [学会発表] 肝細胞癌におけるkeratin 19陽性癌幹細胞を追跡するバイオマーカーとしての18F-FDGPETおよびkeratin 19 fragment(CYFRA 21-1)の役割 (2018)
  • 著者名/発表者名: 河合 隆之, 石井 隆道, 安近 健太郎, 小木曾 聡, 片山 外大, 喜多 貞彦, 南 貴人, 宮内 雄也, 小島 秀信, 山岡 竜也, 福光 剣, 波多野 悦朗, 上本 伸二
  • 学会等名: 第118回日本外科学会定期学術集会