脳腫瘍の変異型IDHを標的とした高精度診断法の確立と分子生物学的解析

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K10748
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 加藤 幸成 東北大学, 未来科学技術共同研究センター, 教授 (00571811)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: イソクエン酸デヒドロゲナーゼ / IDH1 / IDH2 / 特異的抗体 / モノクローナル抗体 / グリオーマ / 予後 / 免疫組織染色

研究実績の概要

変異型IDH1/2が検出されるglioma患者の予後は、野生型IDH1/2の患者の予後よりも格段に良く、gliomaの予後診断マーカーとして有用である。本研究では、変異型IDH1/2に対する特異的抗体を樹立し、gliomaの臨床診断に応用することを目標とした。また、抗体による変異型IDHの認識メカニズムの解明を目指した。平成２８年度には、これまで作製した変異型IDH1/2に対する抗体の中で、MsMab-2を用いた免疫組織染色を実施した。その結果、MsMab-2はIDH1-R132Lの変異型の切片に対し、特異的に反応性を示した。これまで、IDH1-R132Hに対するHMab-1、HMab-2、IDH1-R132Sに対するSMab-1、複数の変異型に対するMsMab-1が免疫組織染色に有用であることがわかっていたが、より正確にIDHの変異型を免疫組織染色で見分けることができた。また、クローンMsMab-1のFab断片と、そのエピトープであるIDH1-R132SおよびIDH2-R172Sのペプチドとの共結晶化に成功した。X線構造解析を行った結果、MsMab-1によるIDH1-R132SおよびIDH2-R172Sの認識メカニズムが明らかとなった。一方、IDH1-R132Cに対する抗体は、未だに世界で報告が一切ない。他の変異型に比べ、システインが含まれることから、抗原作製や抗体作製が非常に困難である。そこで、平成２９年度までに、IDH1-R132Cの抗原を調整し、抗体作製の準備が終了した。平成３０年度には、IDH1-R132Cの抗原をマウスに免疫し、IDH1-R132Cに特異的な抗体の作製に取り組んだ。その結果、ELISAにて、IDH1-R132Cに反応し、野生型IDH1に反応しないモノクローナル抗体の樹立に成功した。本抗体が免疫組織染色で有用かどうか、今後の検討を続ける予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Epitope mapping of an anti-alpha thalassemia/mental retardation syndrome X-linked monoclonal antibody AMab-6 (2018)
  • 著者名/発表者名: Kaneko MK, Yamada S, Itai S, Furusawa Y, Nakamura T, Yanaka M, Handa S, Hisamatsu K, Nakamura Y, Fukui M, Harada H, Kato Y
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Rep. 巻: 15 ページ: 52-56
  • DOI: 10.1016/j.bbrep.2018.07.003
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Epitope mapping of anti-telomerase reverse transcriptase (TERT) monoclonal antibodies (2018)
  • 著者名/発表者名: Furusawa Y, Itai S, Yamada S, Kaneko MK, Kato Y
  • 雑誌名: Monoclon. Antib. Immunodiagn. Immunother. 巻: 37 ページ: 185-187
  • DOI: 10.1089/mab.2018.0019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunohistochemical ATRX loss cannot be a surrogate for 1p19q codeletion. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yamamichi A, Ohka F, Aoki K, Suzuki H, Kato A, Hirano M, Motomura K, Tanahashi K, Chalise L, Maeda S, Wakabayashi T, Kato Y, Natsume A
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol. 巻: 35 ページ: 106-113
  • DOI: 10.1007/s10014-018-0312-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elevated TERT Expression in TERT Wild-Type Adult Diffuse Gliomas: Histological Evaluation with a Novel TERT-Specific Antibody (2018)
  • 著者名/発表者名: Masui K, Komori T, Kato Y, Masutomi K, Ichimura K, Ogasawara S, Kaneko MK, Oki H, Suzuki H, Nitta M, Maruyama T, Muragaki Y, Kawamata T, Sawada T, Shibata N
  • 雑誌名: Biomed. Res. Int. 巻: 37 ページ: 95-99
  • DOI: 10.1155/2018/7945845
  • 査読あり / オープンアクセス
• [備考] 抗体創薬研究分野のホームページ
  • URL: http://www.med-tohoku-antibody.com/index.htm