| 研究課題/領域番号 |
16K10830
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| 研究機関 | 札幌医科大学 |
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研究代表者 |
押切 勉 札幌医科大学, 医学部, 助教 (70754612)
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| 研究分担者 |
本望 修 札幌医科大学, 医学部, 教授 (90285007)
山下 敏彦 札幌医科大学, 医学部, 教授 (70244366)
佐々木 祐典 札幌医科大学, 医学部, 講師 (20538136) [辞退]
森田 智慶 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (60723343)
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| 研究期間 (年度) |
2016-10-21 – 2019-03-31
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| キーワード | 脊髄損傷 / 骨髄間葉系幹細胞 / 移植 / 大脳皮質 / 遺伝子発現 |
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| 研究実績の概要 |
脊髄損傷(SCI)モデルに対する骨髄間葉系幹細胞(MSC)の経静脈内投与による機能回復が報告される一方、脊髄損傷における脳の働きが注目されている。本研究の目的は、急性期SCIラットにMSCの経静脈的投与を行い、脳のMicroarrayによる網羅的遺伝子発現解析から、機能回復に関する分子メカニズムを解明することである。胸髄圧挫損傷翌日に治療群はMSC1.0x106 cells/ccを、対象群はfresh-DMEM 1ccを経静脈的に投与した。移植3日目に大脳皮質運動野の脳組織からtotal RNAを抽出しMicroarray解析を行った。MSCによる発現変動遺伝子(DEGs)に対してreal time PCRによるvalidationを行った。DEGsの機能解析のため、Clue GO解析およびInteractome解析、細胞分化に関与するpromoter解析を行った。行動学的評価にBBB scoreを用い、GSEA解析より運動機能に関連する遺伝子を抽出し、BBB scoreとの相関性を解析した。移植7日目のPCRを行い遺伝子発現量の経時的な変化を評価した。Microarray解析(68,842遺伝子)からDEGs 38遺伝子が同定され、うち15 coding 遺伝子(up:7, down:8)をPCR によりvalidationした。Clue GO解析およびPromoter解析から神経保護および神経再生作用が示唆された。GSEAからMSCと運動機能に関連する遺伝子が抽出され、PCRではBBB scoreと強い正の相関を認めた。Day7の遺伝子発現量は正常化しており、DEGsは一過性の遺伝子発現変化であった。脳のMicroarray解析から、MSCの静脈内投与により、脳の神経保護および神経再生作用を有し、運動機能回復に関与していることが示唆された。
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