自家腱と滑膜幹細胞を用いた半月板再生：マイクロミニピッグによる前臨床試験

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K10891
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 大関 信武 東京医科歯科大学, 統合研究機構, プロジェクト助教 (10755359)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 半月板 / バイオメカニクス

研究実績の概要

自家腱にBMPを投与して培養すると、組織学的に軟骨細胞が誘導され、軟骨分化が進んだ。これは滑膜幹細胞と一緒に培養するかどうかは関係しなかったため、腱に内在する腱細胞がBMP-2の作用により軟骨分化を起こしたと考えられた。また、CPRを行い、SOX9やtype II collagenなどの軟骨分化に関わる遺伝子発現の上昇を認めた。
マイクロミニピッグに半月板切除術を行うと、半月板欠損部は滑膜様組織で一部被覆されたが、半月板として十分な機能をもっておらず、軟骨損傷が著明に進行していた。マイクロミニピッグの膝関節を切離してMRI撮影を行うと、半月板欠損部の状態を観察することができ、軟骨の評価も行うことが可能である。軟骨および半月板の状態について、質的評価であるT2マッピングの撮影により、軟骨の状態が質的にも不良であることを観察することができた。また、ピッグ半月板に膝蓋腱の移植を行ったバイオメカニクスの検討では、有意に半月板切除部が被覆されることで、正常に近い荷重分散機能を再獲得できることがわかった。また、半月板切除で通常生じる半月板逸脱に対しても、内方化するCentralization法を行うことで正常に近い半月板機能を獲得できることを万能試験機を用いた生体力学的試験で検証することができた。これらのことにより、半月板は可能な限り温存することが望ましいと考えられた。半月板の内方化を行う生体力学的解析については、膝関節角度を30度、45度、60度、90度と異なる膝角度においても検証を行いその有効性を示すことができた。

研究成果

• [雑誌論文] Biomechanical analysis of the centralization procedure for extruded lateral menisci with posterior root deficiency in a porcine model. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ozeki N, Koga H, Matsuda J, Kohno Y, Mizuno M, Katano H, Tsuji K, Saito T, Muneta T, Sekiya I
  • 雑誌名: J Orthop Sci. 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1016/j.jos.2019.02.015
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Specific markers and properties of synovial mesenchymal stem cells in the surface, stromal, and perivascular regions. (2018)
  • 著者名/発表者名: 1.Mizuno M, Katano H, Mabuchi Y, Ogata Y, Ichinose S, Fujii S, Otabe K, Komori K, Ozeki N, Koga H, Tsuji K, Akazawa C, Muneta T, Sekiya I
  • 雑誌名: Stem Cell Res Ther. 巻: 23 ページ: 676-681
  • DOI: 10.1186/s13287-018-0870-9.
• [雑誌論文] Trends in isolated meniscus repair and meniscectomy in Japan, 2011-2016. (2018)
  • 著者名/発表者名: 2.Hisako K, Koga H, Ozeki N, Otabe K, Mitsuru M, Tomita M, Muneta T, Sekiya I
  • 雑誌名: J Orthop Sci. 巻: 23 ページ: 676-681
  • DOI: 10.1016/j.jos.2018.04.003.
• [雑誌論文] Canine mesenchymal stem cells from synovium have a higher chondrogenic potential than those from infrapatellar fat pad, adipose tissue, and bone marrow. (2018)
  • 著者名/発表者名: 3.Sasaki A, Mizuno M, Ozeki N, Katano H, Otabe K, Tsuji K, Koga H, Mochizuki M, Sekiya I
  • 雑誌名: PLoS ONE. 巻: 13 ページ: e0202922
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0202922.
• [雑誌論文] Comparison of mesenchymal stem cells obtained by suspended culture of synovium from patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis. (2018)
  • 著者名/発表者名: 4.Kohno Y, Mizuno M, Ozeki N, Katano H, Otabe K, Koga H, Matsumoto M, Kaneko H, Takazawa Y, Sekiya I
  • 雑誌名: BMC Musculoskelet Disord. 巻: 19 ページ: 78
  • DOI: 10.1186/s12891-018-1998-6.
• [学会発表] マイクロミニピッグ半月板変性断裂モデルにおいて滑膜幹細胞投与は滑膜被覆による癒合を促進する (2018)
  • 著者名/発表者名: 大関 信武
  • 学会等名: 第33回日本整形外科学会基礎学術集会
• [学会発表] Three-Dimensional MRI, T2 Mapping and Histological Analyses of Meniscus Repair After Transplantation of Synovial Mesenchymal Stem Cells in a Novel Degenerative Meniscus Injury Model in Pig. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nobutake Ozeki
  • 学会等名: Orthopaedic Research Society 2018 Annual Meeting
  • 国際学会
• [学会発表] 三次元MRI画像による半月板高輝度像の解析 マイクロミニピッグ半月板変性モデル・滑膜幹細胞投与での解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 大関 信武
  • 学会等名: 第10回日本関節鏡・膝・スポーツ整形外科学会