| 研究課題/領域番号 |
16K11000
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| 研究機関 | 三重大学 |
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研究代表者 |
石井 健一朗 三重大学, 医学系研究科, 助教 (90397513)
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| 研究分担者 |
白石 泰三 三重大学, 医学系研究科, 客員教授 (30162762)
広川 佳史 三重大学, 医学系研究科, 講師 (30322738)
杉村 芳樹 三重大学, 医学系研究科, 教授 (90179151)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 去勢抵抗性前立腺癌 / 癌細胞分化の揺らぎ / 線維芽細胞の多様性 / 前立腺癌患者由来線維芽細胞 / in vitro共培養実験 / 癌抑制遺伝子 / 癌遺伝子 |
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| 研究実績の概要 |
本年度は、前立腺間質における線維芽細胞の多様性がアンドロゲン感受性ヒト前立腺癌LNCaP細胞に与える影響を検討する目的で、複数の前立腺癌患者の針生検組織から初代培養して得られた線維芽細胞pcPrFsとLNCaP細胞とのin vitro共培養実験を施行した。実験には市販されている正常ヒト前立腺間質細胞PrSCを比較対象細胞として使用した。Falconセルカルチャーインサートを用いたin vitro共培養実験では、LNCaP細胞に対してPrSCおよびpcPrFsそれぞれを組み合わせて、24時間および48時間の共培養を行った後に、LNCaP細胞における癌抑制遺伝子（TP53, NKX3-1, TP16）および癌遺伝子（NFKB1, SRC, MYC）のmRNA発現量をTaqMan probeを用いたリアルタイムPCRにて比較検討した。その結果、PrSCおよびpcPrFsいずれの線維芽細胞との共培養群でもTP53およびTP16 mRNA量に明らかな変化は認められなかった。一方、NKX3-1 mRNA発現量は複数のpcPrFsとの共培養群で低下することが明らかとなった。また、NFKB1およびSRC mRNA発現量は複数のpcPrFsとの共培養群で増加したものの、MYC mRNA発現量に明らかな変化は認められなかった。
以上の結果より、癌患者由来線維芽細胞pcPrFsが産生・分泌するパラクライン因子は、LNCaP細胞の増殖を促進させる細胞増殖因子やサイトカインだけでなく、LNCaP細胞における癌関連遺伝子発現を変動させる、例えばエクソソームに内包されるmiRNAが重要な役割を担っている可能性が示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は前立腺癌患者由来線維芽細胞の培養で困ることもなく、順調に癌抑制遺伝子５つと癌遺伝子３つのリアルタイムPCRを施行することができた。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は、アンドロゲン感受性LNCaP細胞から樹立したアンドロゲン低感受性やアンドロゲン不応性の亜株についても検討を進めていき、最終目標である癌抑制遺伝子もしくは癌遺伝子のメチル化状態を検討したい。
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